血清Chemerin和NGAL在慢加急性肝衰竭患者中的表達及其對預后評估的意義

肝病是目前困擾人們健康的主要問題之一[1]。當肝臟疾病進展至一定程度時，患者可能有嚴重的慢加急性肝衰竭(ACLF)。雖然ACLF患者在行肝移植術后能獲得較好的預后，但其病死率仍居高不下[2-3]。因此，及時了解ACLF患者的病情并評估其預后對于ACLF的治療至關重要。

趨化素(Chemerin)是一種脂肪因子，廣泛參與機體代謝，與炎性反應、肥胖、多囊卵巢綜合征及糖尿病等密切相關[4]。目前有研究證實，非酒精性脂肪性肝炎患者的Chemerin表達水平升高[5]。此外，Chemerin還與非酒精性脂肪性肝病、病毒性肝炎患者的肝壞死程度及肝纖維化程度相關[6]。中性粒細胞明膠酶相關脂質運載蛋白(NGAL)可參與多種免疫反應，尤其是抗菌反應，已被證實是失代償性肝硬化患者急性腎損傷的生物標志物[7]。本研究采用酶聯免疫吸附法檢測血清Chemerin和NGAL的表達水平，分析兩者與ACLF患者預后的關系，以期為ACLF患者的預后評估提供參考。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2015年6月至2018年9月在綿陽市第三人民醫院就診的118例ACLF患者作為研究對象(設為ACLF組)。根據《肝衰竭診治指南(2012年版)》[8]對ACLF進行診斷。納入標準：(1)患者臨床表現為黃疸[總膽紅素(TBIL)>85 μmol/L]、凝血功能障礙[國際標準化比值(INR)>1.5]及低蛋白血癥等；(2)近4周內出現腹水或并發肝性腦病。排除標準：(1)合并腫瘤；(2)合并自身免疫性疾病；(3)合并嚴重細菌或病毒感染；(4)未簽署知情同意書。ACLF組男性76例，女性42例，年齡35～64歲，平均年齡(49.23±10.26)歲；ACLF的病因包括酒精性肝病18例，乙型病毒性肝炎79例，非酒精性脂肪性肝病16例，丙型病毒性肝炎5例。擇同期健康體檢者58例作為對照組。對照組男性32例，女性26例，年齡32～58歲，平均年齡(48.33±9.40)歲。兩組受試者在性別(χ2=1.399，P=0.237)、年齡(t=0.562，P=0.575)方面的差異無統計學意義，具有可比性。本研究經醫院醫學倫理委員會批準。

1.2 信息收集

收集受試者的性別、年齡、血清Chemerin和NGAL的表達水平，以及是否合并感染的情況。

1.3 血清指標的檢測

采集受試者晨起空腹靜脈血，離心并提取上層清液，保存于低溫環境中待驗。采用酶聯免疫吸附法檢測受試者血清Chemerin表達水平(試劑盒購自美國BioLegend公司，貨號XYEA945Hu)和NGAL表達水平(試劑盒購自德國BioVendor公司，貨號RD191102200R)。

1.4 隨訪

通過復診、住院觀察及電話隨訪等方式了解ACLF患者出院后90 d的預后情況，并記錄其生存時間。

1.5 統計學方法

2 結果

2.1 兩組血清Chemerin和NGAL表達水平比較

ACLF組血清Chemerin表達水平低于對照組，血清NGAL表達水平高于對照組，差異均有統計學意義(P均<0.05)。見表1。

表1 兩組血清Chemerin和NGAL表達水平比較()

2.2 ACLF生存組和死亡組患者血清Chemerin和NGAL表達水平比較

118例ACLF患者出院后90 d內共有58例(49.15%)死亡(設為死亡組)，60例(50.85%)存活(設為生存組)。死亡組血清Chemerin表達水平低于生存組，血清NGAL表達水平高于生存組，差異均有統計學意義(P均<0.05)。見表2。

表2 兩組患者血清Chemerin和NGAL表達水平比較()

2.3 血清Chemerin和NGAL評估ACLF患者預后的效能

單指標評估ACLF患者預后時，Chemerin的評估效能高于NGAL，但差異無統計學意義(Z=0.982，P=0.326)。Chemerin聯合NGAL評估ACLF患者預后的Logistic回歸方程為F=-5.882+0.173Chemerin-4.612NGAL。Chemerin聯合NGAL評估ACLF患者預后的效能高于 Chemerin和NGAL單獨評估的效能(Z=2.838，P=0.005；Z=3.489，P=0.001)。Chemerin和NGAL單獨評估ACLF患者預后的效能均低于MELD評分，但差異均無統計學意義(Z=0.916，P=0.360；Z=1.864，P=0.062)。Chemerin聯合NGAL評估ACLF患者預后的效能高于MELD，但差異無統計學意義(Z=1.231，P=0.218)。詳見圖1和表3。

表3 Chemerin和NGAL評估ACLF患者預后的效能比較

注：“—”表示無數據

圖1 Chemerin和NGAL評估ACLF患者預后的ROC曲線

2.4 不同血清Chemerin和NGAL表達水平的ACLF患者的預后情況

血清Chemerin≤79.64 ng/mL的ACLF患者的平均生存時間為30.56 d，低于血清Chemerin>79.64 ng/mL者(81.09 d)，差異有統計學意義(χ2=103.102，P<0.001)，詳見圖2A。血清NGAL≤2.23 ng/mL的ACLF患者的平均生存時間為82.72 d，高于血清NGAL>2.23 ng/mL者(35.42 d)，差異有統計學意義(χ2=77.782，P<0.001)，詳見圖2B。

圖2不同血清Chemerin和NGAL表達水平的ACLF患者的生存曲線A不同血清Chemerin表達水平的患者B不同血清NGAL表達水平的患者

2.5 影響ACLF患者預后的相關因素

將可能影響ACLF患者預后的因素如年齡、性別、是否合并感染、血清Chemerin和NGAL表達水平納入Cox單因素分析，結果顯示合并感染、血清Chemerin和NGAL的表達水平可能與ACLF患者的預后有關。將合并感染、血清Chemerin和NGAL表達水平納入Cox多因素分析，結果顯示合并感染、血清Chemerin≤79.64 ng/mL和血清NGAL>2.23 ng/mL的ACLF患者的預后較差。詳見表4。

表4 影響ACLF患者預后的相關因素分析

注：“—”表示無數據

3 討論

肝衰竭是一種常見的臨床急重癥，可導致肝臟合成、排泄、解毒及生物轉化等功能障礙，嚴重危害人們的健康[9-10]。ACLF是肝衰竭的重要類型之一，其病死率較高[11]。影響ACLF患者預后的相關因素尚未完全明確，目前國內外學者提出的評估終末期肝病患者預后的模型如MELD、MELD-Na和iMELD未考慮并發癥及相關重要生物標志物[12-14]。有研究表明，MELD、MELD-Na和iMELD等6種預測模型均不能對終末期肝病患者的預后進行準確預測[15]。ACLF患者的病情進展迅速，常規臨床治療收效甚微，因此及時評估患者預后并采取積極有效的治療具有重要意義[16-18]。本研究通過檢測118例ACLF患者血清Chemerin和NGAL的表達水平，并探究兩者與ACLF患者預后的關系，以期為ACLF的預后評估奠定基礎。

本研究結果表明，ACLF組血清Chemerin表達水平低于對照組，而血清NGAL表達水平高于對照組，提示血清Chemerin和NGAL可能參與ACLF的發生、發展。本研究進一步比較了ACLF生存組患者和死亡組患者血清Chemerin和NGAL的表達水平，結果發現ACLF生存組患者血清Chemerin表達水平高于死亡組患者，而血清NGAL表達水平低于死亡組患者。以上結果均提示Chemerin和NGAL共同參與了ACLF的發病和進展，且與ACLF患者的預后密切相關。本研究結果表明，單指標評估ACLF患者預后時，Chemerin的評估效能高于NGAL。Chemerin聯合NGAL評估ACLF患者預后的效能高于兩者單獨評估的效能。MELD評分是評價終末期肝病患者預后的常用指標，具有較高的信度和效度。本研究發現，Chemerin和NGAL診斷ACLF患者預后的效能均低于MELD評分，但差異均無統計學意義。Chemerin聯合NGAL評估ACLF患者預后的效能高于MELD評分，但差異亦無統計學意義。上述結果表明血清Chemerin和NGAL在ACLF患者預后評估中具有較高價值。此外，本研究發現，血清Chemerin≤79.64 ng/mL的ACLF患者平均生存時間短于血清Chemerin>79.64 ng/mL者；血清NGAL≤2.23 ng/mL的ACLF患者平均生存時間長于血清NGAL>2.23 ng/mL者。通過Cox單因素和多因素回歸法分析影響ACLF患者短期預后的相關因素，結果發現合并感染、血清Chemerin≤79.64 ng/mL和血清NGAL>2.23 ng/mL的ACLF患者預后不良風險較高。

綜上所述，血清Chemerin和NGAL的表達水平與ACLF患者的預后密切相關。聯合檢測血清Chemerin和NGAL的表達水平可輔助評估ACLF患者的預后。然而，本研究仍存在樣本量偏小、僅為單中心研究等不足。期望今后能夠擴大樣本量，并進行多中心研究，同時分析血清Chemerin和NGAL的表達水平與ACLF患者病情嚴重程度的關系，以期為ACLF的臨床治療提供更多幫助。