宮頸細胞DNA定量分析在篩查宮頸病變中價值

孫煜昀

廈門麥克奧迪醫學檢驗所，福建廈門 361006

作為一種女性常見惡性腫瘤，病因明確的宮頸癌需要一個漫長地發展過程，一般是從宮頸上皮內瘤變開始，在十數年間逐漸發展至宮頸癌，而這個發展過程實際上是可逆的，若能在上皮內瘤變期進行準確的篩查并及時為患者進行治療，宮頸癌治愈率將可以提升至98%[1]。目前，可用于診斷宮頸病變的檢查技術有常規細胞學、液基細胞學、陰道鏡、細胞DNA定量分析等，這些技術可以觀察和分析細胞的形態變化、DNA指數改變等，實現對宮頸癌及宮頸病變的準確診斷。該文選擇2015年3月—2018年3月期間接受宮頸病變篩查的1 620例受檢者，試探究宮頸細胞DNA定量分析在宮頸病變篩查中具有的價值，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取接受宮頸病變篩查的1 620例受檢者，回顧分析其臨床資料，具體包括：①性別構成：均為女性；②年齡分布：最小 20 歲，最大 64 歲，平均（42.52±11.12）歲。注：所有受檢者均無盆腔放療史與子宮切除史[2]。

1.2 方法

使用窺陰器將患者宮頸暴露，于宮頸外口插入宮頸刷，直至宮頸管內，將毛刷呈順或逆時針旋轉5～6周后取出，放入含有固定液的瓶中輕搖，留待檢驗。實驗室人員取采集到的標本制成薄層細胞片2張，一張行巴氏染色，一張行Feulgen染色，分別以液基薄層細胞檢測儀滑檢測，以細胞腫瘤篩查分析儀及配套試劑進行DNA定量分析[3]。

1.3 觀察指標

基于病理診斷結果這一金標準，對比液基細胞學、DNA定量分析兩種方法的陽性檢出率。其中陽性檢出率的標準分別為：①液基細胞學：基于TBS標準可以分為ASCUS-不明意義的非典型鱗狀上皮細胞、LSIL-低度的鱗狀上皮內病變、HSIL-高度的鱗狀上皮內病變、CIS-原位癌、SCC-鱗狀細胞癌，若達到上述標準則結果為陽性[4]；②DNA定量分析：若DNA指數高于2.5的細胞、異倍體細胞峰不可見，則結果為陰性；若是發現DNA指數高于2.5的細胞、異倍體細胞峰，則結果為陽性[5]。對于有1～2個DNA指數高于2.5的細胞并伴有ASCUS或有異倍體細胞峰的患者、LSIL及以上者、有3個以上DNA指數高于2.5的細胞者，應使用陰道鏡進行4點以上的多點組織活檢[6]。

1.4 統計方法

參與研究的宮頸病變患者的所有數據使用SPSS 19.0統計學軟件檢驗。計數資料使用[n(%)]形式表示，行χ2檢驗。P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 陽性檢出率

共有115例患者確診有宮頸病變。液基細胞學檢查結果為：ASCUS患者7例，LSIL患者33例，HSIL患者 19例，SCC患者1例，共有60例患者出現陽性檢查結果，總陽性檢出率為3.70%。

宮頸細胞DNA定量分析結果為：18例患者有1～2個DNA指數高于2.5的細胞，94例患者有3個以上DNA指數高于2.5的細胞），共有112例患者出現陽性結果，總陽性檢出率為6.91%。

就陽性檢出率而言，宮頸細胞DNA定量分析高于液基細胞學檢查，差異有統計學意義 （χ2=62.342，P=0.000＜0.05）。

2.2 具體檢查結果

這些受檢者結合液基細胞學與DNA定量分析進行聯合檢測，行多點組織活檢，其中液基細胞學檢查結果為陽性者60例，液基細胞學檢查結果為陰性但DNA定量分析結果依然呈陽性者47例，這47例受檢者中有35例顯示組織活檢結果為陽性，其中CIN I有30例，CIN II有5例，CIN III有0例。為定量分析結果為陽性的患者行組織病理檢查，115例患者中僅有3例患者因為DNA細胞正常、液基細胞學結果呈陽性而進行組織活檢，這意味著DNA含量的改變要早于形態學改變。見表1。

表1 液基細胞學與DNA定量分析結果[n(%)]

3 討論

宮頸癌是一種對女性健康乃至生命有著極大威脅的惡性腫瘤，其發病率在女性惡性腫瘤中居于次位，僅低于乳腺癌[7]。宮頸癌的高發群體為中老年女性，其中原位癌高發群體為30～35歲的女性，而浸潤癌的高發群體為45～55歲的女性，但是近年來受生活習慣、社會環境、飲食結構變化的影響，乳腺癌也呈現出越來越年輕的發病趨勢[8-9]。事實上，宮頸癌是目前唯一病因明確，可以通過醫學干預手段來顯著降低發病率與死亡率的惡性腫瘤，而對于宮頸癌患者，治療的關鍵在于盡早給予準確的篩查，我國的宮頸癌發病率與死亡率均遠遠高于歐美發達國家，原因便在于缺少對適齡女性的癌前病變篩查，無法及時發現其癌前病變，不能在早期給予針對性干預，便無法及時逆轉宮頸癌的發展[10]。及至確診患者已經進入中晚期，此時常規干預手段已經難以發揮其效果，因此患者只能通過放化療等措施來延長生存期限。

液基細胞學檢查是受檢者宮頸上皮細胞形態進行觀察，這種檢查方法雖然有較高的準確性，但是細胞形態學檢查有著一定的局限，檢測者長時間閱片帶來的視覺疲勞也會影響該項檢查的敏感性，薄層細胞片的重復性較差，基于TBS標準判片容易出現組多意義不明的結果[11]。而不明意義的非典型鱗狀上皮細胞（ASCUS）在TBS報告中是最為常見的，其既可能是良性炎癥，也可能是CIN I、CIN II、CIN III，甚至也有可能是早期浸潤癌，然而浸潤癌的檢出率較低，但病變的轉歸差異較為明顯，若進行細胞學隨訪，可能出現部分病歷丟失或假陰性診斷結果；并且，由于液基細胞學的薄層細胞片缺乏重復性，ASCUS檢查結果也具有檢查結果重復性差的問題，因此液基細胞學方法的準確性受到了一定限制。

而與液基細胞學方法相比，DNA定量分析具有更加明顯的優勢，其對癌前病變的早期診斷及宮頸癌的篩查有著更高的準確性，其可以避免細胞學方法中因人工閱片主觀經驗、技術有限、視覺疲勞所帶來的假性結論，可以避免漏診或誤診問題的出現。事實上，DNA定量分析針對病變細胞DNA異倍體來判斷染色體異常與否，在這種方法中，DNA異倍體代表了染色異常，可以作為細胞癌變及癌前病變的一種特征指標[12]。劉國生等人[13]在其研究中指出，在細胞惡變的過程中，DNA含量改變要明顯早于形態學改變，故DNA定量分析在識別出宮頸細胞中的DNA異倍體細胞的同時還可以識別出異常增生的細胞。通過這種方法甚至可以掌握腫瘤細胞遺傳基因變異過程，即使是肉芽無法觀察到的宮頸細胞發生的極其微小的改變——通常為癌前病變表現，其也可以通過檢測結果分析得知，因此臨床可以根據這種方法的檢查結果開展早期治療[14]。

該文選擇液基細胞學檢查與DNA定量分析兩種方法為宮頸病變患者進行篩查，從結果可知，兩種方法的陽性檢出率分別為3.70%、6.91%，與潘秀榮等人[15]5.62%、9.72%的研究結果相近。由此可見，具有上文提及優勢的DNA定量分析具有更高的臨床價值。

綜上所述，宮頸細胞DNA定量分析具有非常顯著的應用價值，其陽性檢出要高于常規液基細胞學檢查，臨床可以使用宮頸細胞DNA定量分析來加強對宮頸癌及癌前病變的篩查效果。