注射用鹽酸羅沙替丁醋酸酯與注射用卡絡磺鈉體外配伍的穩定性研究

周 燦，王林海，余世榮，陳富超，于慧斌，胡 曉*

0 引言

鹽酸羅沙替丁醋酸酯(Roxatidine acetate hydr-ochloride，ROX)屬于第4代H2受體拮抗劑，可有效治療消化性潰瘍或急性胃黏膜病變引起的上消化道出血[1]。卡絡磺鈉(Carbazochrome sodium sulfonate，CSS)屬于腎上腺素腙衍生物止血藥，常用于上消化道、呼吸道、泌尿系統和婦產科出血[2]，有較好的安全性[3]。臨床上對于消化內科和重癥醫學科的患者，常將兩藥以三通或多通管的形式進入同一靜脈通道，在此過程中藥物相互混合，其配伍禁忌需嚴格注意，但《400 種常見藥物配伍禁忌表》并未收錄其配伍情況，配伍后藥物的成分和含量是否改變，如何維持其穩定性均有待于研究。因此，本文參照臨床常用劑量，采用聚丙烯離心管在體外模擬兩藥在三通管中的配伍過程，在室溫和高溫下，以藥物含量、pH值、不溶性微粒和外觀變化為指標，對ROX與CSS在0.9%氯化鈉注射液和5%葡萄糖注射液中的穩定性進行考察，為臨床安全有效用藥提供理論依據。

1 儀器與試藥

1.1 儀器 LC-20AT高效液相色譜儀(日本島津)，STARTER2100 pH計(奧豪斯儀器上海有限公司)，CP214電子天平(奧豪斯儀器上海有限公司)，聚丙烯離心管(江蘇南通理能實驗器材有限公司)，GWJ-4型智能微粒檢測儀(天津天大天發科技有限公司)。

1.2 試藥 ROX對照品(四川維克奇生物科技有限公司，批號：wkq17010901，純度：99.5%)，CSS對照品(中國食品藥品檢定研究所，批號：100366-200702，純度：98.6%)，注射用ROX(哈藥集團三精加濱藥業有限公司，批號：20151003，規格：75 mg)，注射用CSS(湖南五洲通藥業有限責任公司，批號：1702231，規格：40 mg)，0.9%氯化鈉注射液(湖北華仁同濟藥業有限責任公司，批號：WA1611001，規格：250 ml)，5%葡萄糖注射液(湖北華仁同濟藥業有限責任公司，批號：WA1612001，規格：250 ml)，甲醇、乙腈為色譜純，其余試劑為分析純，去離子水(十堰市人民醫院制劑室自制)。

2 方法與結果

2.1 配伍溶液的制備 模擬臨床用藥濃度，精密稱取注射用ROX 10 mg和注射用CSS 4.8 mg 4份于聚丙烯離心管中，分別加入0.9%氯化鈉注射液和5%葡萄糖注射液各20 ml溶解，稀釋，搖勻，得ROX質量濃度為0.5 mg/ml和CSS質量濃度為0.24 mg/ml的配伍溶液，貼上標簽備用，作為試驗組。

2.2 考察指標與判定標準 在室溫(25±1)℃和高溫(40±1)℃，操作間相對濕度55%±5%，自然光照條件下放置，在0 h(混合即刻)、1 h、2 h、4 h、6 h、8 h觀察溶液外觀變化，測定不溶性微粒數及pH值，用高效液相色譜法測定ROX和CSS含量變化，以0 h含量為100%參照。凡符合以下情況之一者即判斷為不能配伍[4]：出現變色、氣泡、沉淀、渾濁等明顯外觀變化；混合后pH值RSD>2%；含量變化至少10%；每1 ml靜脈注射液中10 μm及10 μm以上(粒徑≥10 μm)的微粒數超過25粒，25 μm及25 μm以上(粒徑≥25 μm)的微粒數超過3粒。

2.3 含量測定

2.3.1 對照品溶液的配制 精密稱取ROX對照品5.16 mg置于10 ml容量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，配制成濃度為516 μg/ml的對照品溶液；精密稱取CSS對照品1.92 mg置于10 ml容量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，配制成濃度為1.92 mg/ml的對照品溶液，置4 ℃保存備用。

2.3.2 色譜條件 色譜柱：Lichrospher C18柱(250 mm×4.6 mm，5 μm)；ROX流動相：乙腈-0.02%磷酸緩沖液(0.1 ml的磷酸溶液，溶于500 ml的蒸餾水中，用三乙胺調節pH值為5.84)=18∶82；CSS流動相：乙腈-0.15 mol/L醋酸銨溶液(用冰醋酸調節pH值至3.6)=11∶89；流速：1.0 ml/min；柱溫：35 ℃；檢測波長：ROX與CSS分別為230、363 nm；進樣量：20 μl。

2.3.3 色譜專屬性 取“2.3.1”項下2種藥物的對照品溶液、“2.1”項下配伍溶液(0 h)適量，按“2.3.2”項下色譜條件，進樣，記錄色譜圖，在此條件下，得出ROX、CSS保留時間分別為11.2、7.6 min，二者色譜峰理論塔板數均>4 000，兩主峰與相鄰雜質峰的分離度>1.5，表明專屬性均良好。見圖1。

2.3.4 標準曲線的建立 分別配制ROX濃度為3.25、6.5、13、26、52、104、208 μg/ml及CSS濃度為1.5、3、6、12、24、48、96 μg/ml的對照品溶液。按“2.1.3”項下色譜條件，以質量濃度(C)為橫坐標，峰面積(A)為縱坐標繪制標準曲線。結果，兩藥標準曲線方程分別為A1=26.5 C1-186(r=0.999 5，n=7)，A2=379 C2+ 572.4(r=0.999 7，n=7)。線性范圍分別為3.25～208、1.5～96 μg/ml。

2.3.5 精密度試驗 取“2.3.4”項下ROX濃度為104、26、6.5 μg/ml及CSS濃度為48、12、3 μg/ml的溶液，按“2.1.3”項下色譜條件測定峰面積，1 d內每個濃度平行操作5次，得ROX和CSS平均日內精密度RSD分別為0.83%、1.06%，結果表明，儀器精密度良好。

圖1 高效液相色譜圖

2.3.6 重復性試驗 取“2.1”項下的配伍液適量，用適量流動相稀釋得質量濃度為25 μg/ml的ROX溶液和12 μg/ml CSS溶液，重復配制6份，按“2.3.2”項下色譜條件，進樣，記錄峰面積，得兩藥峰面積RSD分別為0.95%、0.71%(n=6)，表明該方法重復性良好。

2.3.7 加樣回收試驗 精密吸取已知含量的配伍溶液9份，置10 ml量瓶中，再分別加入濃度為20、25、30 μg/ml的ROX對照品溶液和濃度為9.6、12、14.4 μg/ml CSS對照品溶液適量各3份，用流動相稀釋至刻度，搖勻，按“2.3.2”項下色譜條件，記錄峰面積，計算加樣回收率。結果ROX和CSS平均回收率分別為98.99%和99.28%，RSD分別為0.89%和1.11%，結果見表1。

2.3.8 含量測定 分別于0、1、2、4、6、8 h精密吸取配伍液1.0 ml至20 ml量瓶中，用流動相稀釋至刻度，搖勻，按“2.3.2”項下色譜條件測定峰面積，以0 h含量為100%，計算各時間點兩藥的相對百分含量，結果表明，在上述條件下，8 h ROX含量呈下降趨勢，在5%葡萄糖注射液中，分別降低了4.76%、3.59%，在0.9%氯化鈉注射液中，分別降低了1.74%、2.45%；CSS含量相對穩定，結果見表2。

2.4 外觀及pH值變化 配伍液置聚丙烯離心管中，于0、1、2、4、6、8 h分別取適量，加入具塞比色管中，在黑色、白色背景下觀察6 s，記錄溶液外觀，參照《中國藥典》2015版四部pH值測定法測定溶液pH值[5]。結果顯示，在上述條件下，配伍液的外觀均橙紅色澄明，無氣泡及沉淀產生，8 h內各組配伍液pH值均保持穩定，RSD<2%，結果見表3。

2.5 不溶性微粒數 取配伍液適量，參照《中國藥典》(2015版)四部通則中“不溶性微粒檢查法”[5]，采用光阻法測定上述條件下不同時間點配伍液的不溶性微粒數，各配伍液重復測定4次，棄去第1次測定數據，取后續3組數據的平均值作為測定結果。結果表明，在24 h內配伍液的不溶性微粒未明顯增加，均符合規定，見表4。

2.6 對照組溶液的制備與測定 取0.9%氯化鈉注射液和5%葡萄糖注射液各20 ml置于聚丙烯離心管中，作為對照組。分別觀察對照組溶液的外觀，測定其pH值及不溶性微粒數。結果顯示，對照組中0.9%氯化鈉注射液和5%葡萄糖注射液的外觀、pH值及不溶性微粒數均符合《中國藥典》2015版的相關規定。

表1 加樣回收率試驗結果(n=9)

表2 ROX和CSS在5%葡萄糖注射液和0.9%氯化鈉注射液中的含量變化(n=6)

表3 各配伍液pH值變化(n=6)

表4 各配伍液不溶性微粒變化(n=3)

3 討論

筆者曾考慮篩選理想的流動相同時測定ROX和CSS的含量，但是，在預試驗發現流動相的pH變化對ROX的洗脫影響較大，當pH值小于5.2時，該藥在30 min內無色譜峰出現，而結合相關文獻[6-8]，CSS流動相最佳pH為3.0左右。同時，由于兩藥最大吸收波長分別為230、363 nm，相差較大，在相應檢測波長處，另一藥物幾乎無吸收峰，兩藥含量無法同時測定，因此，采用平行實驗分別測定兩藥含量。

輸液中的不溶性顆粒容易引起不良反應[9]，對人體造成危害。在實際操作量取液體時，注射器的抽吸會產生一些小氣泡，影響不溶性微粒測定結果，因此，在操作過程中先用去離子水洗凈容器外壁，取部分配伍液沖洗開啟口及取樣杯，將剩余溶液倒入取樣杯中，靜置2 min，以減少氣泡對測定結果的干擾。試驗結果顯示，24 h內配伍液不溶性微粒數符合藥典規定。

本實驗結果顯示兩藥與5%葡萄糖注射液配伍pH值在4.14左右，8 h時ROX含量呈下降趨勢，但含量變化小于10%；而與0.9%氯化鈉注射液配伍pH值在4.96左右，其含量基本保持穩定。可能的原因為ROX對pH值較敏感，酸性條件下其結構中哌啶環上的胺基給出電子，易被氧化聚合反應產生雜質，造成藥物含量降低，對雜質的定性及該藥在更長時間內的含量變化有待進一步研究。本研究說明注射用ROX與注射用CSS在5%葡萄糖注射液和0.9%氯化鈉注射液中配伍8 h內穩定。