P16與Ki67的表達在宮頸病變診斷中的臨床意義

胡惠敏

（蘇州市相城人民醫(yī)院病理科 江蘇 蘇州 215131）

宮頸癌作為臨床中女性生殖系統(tǒng)常見的一種惡性腫瘤，其發(fā)病率頗高，嚴重威脅著女性的生命健康、工作和生活質(zhì)量，并且近年來呈現(xiàn)年輕化的發(fā)展趨勢，調(diào)查顯示，宮頸癌的病死率是婦科惡性腫瘤病死率最高的，且全球范圍內(nèi)宮頸癌為女性惡性腫瘤中第三位。宮頸癌發(fā)病過程為漸進式，調(diào)查資料顯示由正常宮頸進展為宮頸癌，所需時間大約為10年左右。在高危群體中開展宮頸組織活檢和病理學檢查，對于早期發(fā)現(xiàn)宮頸病變、防治宮頸癌具有重要意義。資料表明，癌癥的發(fā)生、發(fā)展受到多種抑癌基因的影響，抑癌基因P16與增殖細胞核抗原Ki67與宮頸癌發(fā)病、進展和預后有一定的相關(guān)性。采用免疫組化方法對P16與Ki67的表達在宮頸病變診斷中的臨床意義進行探討，報道如下。

1.資料與方法

1.1 一般資料

標本來自我院2016年1月－2018年12月收治的80例行宮頸活檢或手術(shù)患者，其年齡平均（43.76±6.56）歲；病程（2.73±1.05）年。其中診斷為宮頸上皮內(nèi)瘤變（cervical intraepithelial neoplasias，CIN）64例，分期為CINⅠ期患者20例，CINⅡ期患者23例，CINⅢ期患者21例，宮頸鱗癌16例。另選擇同時期內(nèi)我院20例正常宮頸組織作為對照組，平均年齡（43.15±5.46）歲。各組年齡、文化水平等指標無統(tǒng)計學差異（P＞0.05）。所有組織標本均以10%的甲醛溶液固定和常規(guī)石蠟包埋。之前所有患者均未接受放、化療和免疫治療。

1.2 方法

本試驗標本采取10%的甲醛溶液固定、石蠟包埋后，進行連續(xù)3～4 um厚度的切片，Envision免疫組化染色，使用已經(jīng)檢測的陽性片作為陽性對照，PBS緩沖液作陰性對照，將切片交由兩名副高級以上的病理醫(yī)師進行閱片，若其意見不統(tǒng)一則再經(jīng)過科室3名副高級以上病理醫(yī)師會診最終確定診斷。

1.3 診斷標準

P16在宮頸上皮細胞核、細胞質(zhì)中呈集中陽性表達，為彌漫的棕黃色；Ki67陽性表達集中于細胞核，呈棕黃色顆粒狀。以染色細胞數(shù)量、強弱來進行定性判斷：陰性（-）是指染色細胞5%以下，弱陽性（+）是指染色細胞5%～25%，陽性（++）是指染色細胞26%～50%，強陽性（+++）是指染色細胞50%以上［1］。

1.4 統(tǒng)計學方法

數(shù)據(jù)采用SPSS20.0統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計學分析，計數(shù)資料采用率（%）表示，進行χ2檢驗，計量資料采用（±s）表示，進行t檢驗，P＜0.05為差異具有統(tǒng)計學意義。

2.結(jié)果

2.1 P16與Ki67的表達

P16與Ki67在正常宮頸、CIN、宮頸鱗癌組織中的陽性表達率存在統(tǒng)計學差異（P＜0.05），見表。

表 各組P16與Ki67的表達情況比較

2.2 P16、Ki67表達與宮頸病變的關(guān)系

在宮頸病變的檢測診斷中，P16檢測的敏感性為83.8%（67/80)，采用spearman法分析相關(guān)性得知，P16的表達與病變的嚴重程度呈明顯正相關(guān)（r=0.594，P＜0.05）；Ki67檢測的敏感性為88.8%（71/80），采用spearman法分析相關(guān)性得知，Ki67的表達與病變的嚴重程度呈顯著正相關(guān)（r=0.416，P＜0.05）。

3.討論

宮頸癌的發(fā)展呈緩慢漸進的形式進行，早期病變表現(xiàn)往往缺乏特異性，從而容易被患者忽視或在臨床漏診，尤其是那些沒有癥狀和體征的早期宮頸病變患者；不利于患者及時接受積極治療，提高患者預后。臨床對宮頸病變的篩查一般采取液基薄層細胞學檢查和人乳頭狀瘤病毒（human papillomavirus，HPV）病毒檢測，但前者具有主觀性傾向，檢測結(jié)果易受醫(yī)生水平的影響，誤差率較大；后者只是對HPV的感染做出提示而并不能反映HPV在宿主細胞中的存在狀況；此外，數(shù)據(jù)表明有90%的HPV感染者可通過自身清除病毒而達到疾病自限［2］。因此，采用高敏感度的標志物進行輔助篩查宮頸病變，對于提高臨床診斷率具有重要意義。

P16是最早由Kamp報道的一種位于染色體部位的抑癌基因，又稱為多腫瘤抑制基因，是人類惡性腫瘤中最為常見的突變基因；是一種細胞周期依賴性激酶抑制蛋白，可直接參與人體細胞調(diào)控，對細胞分裂增殖起控制作用，有研究證明P16的缺失或發(fā)生突變，均可引起細胞增殖周期紊亂，使細胞陷入無限增殖，乃至于發(fā)生癌變。Ki67屬于增殖細胞核抗原，是一種有絲分裂相關(guān)蛋白，能夠反映出細胞的增殖程度與活性，陽性表達反映了細胞活躍的增殖狀態(tài)。

宮頸癌常用的診斷方法陰道鏡及宮頸細胞學檢查對一些無臨床癥狀及體征的宮頸癌患者可能出現(xiàn)誤診；因此，急需尋找可有效提高宮頸癌早期診斷率的診斷手法，以期提高宮頸癌診斷率，為患者積極治療提供可能。研究發(fā)現(xiàn)，宮頸癌的發(fā)生發(fā)展過程中抑癌基因的失活及多癌基因的激活在其中發(fā)揮重要作用，臨床常用的近年來P16與Ki67被研究證明在宮頸上皮內(nèi)病變組織中的表達有增高趨勢［3］。

本文通過免疫組化方法檢測了我院近年來行宮頸活檢或手術(shù)的80例患者中P16與Ki67的表達情況，結(jié)果表明，P16與Ki67在正常宮頸、CIN、宮頸鱗癌組織中的陽性表達率存在統(tǒng)計學差異（P＜0.05）；通過進行相關(guān)性分析得知，P16與Ki67的表達與病變的嚴重程度呈明顯正相關(guān)（P＜0.05）。

綜上所述，P16與Ki67用于宮頸病變檢測的敏感性較高，且其表達可反映宮頸上皮內(nèi)病變的嚴重程度，能夠作為臨床診斷宮頸病變的重要參考依據(jù)。