慢性乙型肝炎病毒感染患者血清IL-33、sST2、MCP-1水平變化及其臨床意義

李勁　駱仲榆　陳劉鎮　林沛基

[摘要] 目的 探討慢性乙型肝炎病毒感染患者血清白細胞介素-33（IL-33）及其受體可溶性生長刺激表達基因2蛋白（sST2）與單核細胞趨化蛋白-1（MCP-1）表達水平變化，并分析其臨床意義。 方法 選取2017年1月～2018年1月廣東省東莞市人民醫院收治的105例慢性乙型肝炎病毒感染患者作為觀察組，其中單純慢性乙肝患者67例（慢性乙肝組），合并肝衰竭38例（肝衰竭組），同期選擇50名無肝臟疾病的健康志愿者作為對照組。分別測定各組血清IL-33、sST2以及MCP-1水平，并根據Ishak病理評分對慢性乙肝組患者的肝纖維化程度進行評定，比較不同肝纖維化程度患者的上述指標表達情況。 結果 慢性乙肝組與肝衰竭組的IL-33、sST2與MCP-1水平均明顯高于對照組，且肝衰竭組的IL-33、sST2與MCP-1表達水平明顯高于慢性乙肝組，差異有統計學意義（P < 0.05）。與輕度肝纖維化組比較，中度肝纖維化組、重度肝纖維化組和肝硬化組的IL-33、sST2與MCP-1均升高，且重度肝纖維化組和肝硬化組IL-33、sST2與MCP-1水平高于中度肝纖維化組，肝硬化組IL-33、sST2與MCP-1水平高于重度肝纖維化組，差異有統計學意義（P < 0.05）。經Pearson相關分析顯示，慢性乙肝組患者IL-33、sST2與MCP-1與Ishak評分呈正相關（r = 0.573、0.728、0.654，P < 0.05）。 結論 血清IL-33、sST2與MCP-1對慢性乙型肝炎病毒感染及其病情加重有評估預測作用，對患者開展血清指標檢驗有助于疾病診斷與預后評估。

[關鍵詞] 慢性乙型肝炎病毒;可溶性生長刺激表達基因2蛋白;單核細胞趨化蛋白-1;白細胞介素-33

[中圖分類號] R575.1? ? ? ? ? [文獻標識碼] A? ? ? ? ? [文章編號] 1673-7210（2019）06（b）-0125-04

Changes of serum IL-33， sST2 and MCP-1 levels in patients with chronic hepatitis B virus infection and its clinical significance

LI Jin1? ?LUO Zhongyu1? ?CHEN Liuzhen2? ?LIN Peiji1

1.Department of Infectious Diseases， Dongguan People′s Hospital， Guangdong Province， Dongguan? ?523000， China; 2.Medical Department， Dongguan People′s Hospital， Guangdong Province， Dongguan? ?523000， China

[Abstract] Objective To investigate the changes of serum levels of interleukin-33 （IL-33） and its receptor soluble growth STimulation expressed gene 2 （sST2） and monocyte chemotactic protein-1 （MCP-1） in patients with chronic hepatitis B virus infection， and to analyze their clinical significance. Methods One hundred and five patients with chronic hepatitis B virus infection in Dongguan People′s Hospital from January 2017 to January 2018 were selected as the observation group， including 67 patients with simple chronic hepatitis B （chronic hepatitis B group）， 38 patients with hepatic failure （hepatic failure group）， and 50 healthy volunteers without liver diseases were selected as the control group. Serum levels of IL-33， sST2 and MCP-1 were measured in each group， and the degree of hepatic fibrosis in chronic hepatitis B group was assessed according to Ishak pathological score. The expression of the above indicators in patients with different degrees of hepatic fibrosis was compared. Results The levels of IL-33， sST2 and MCP-1 in chronic hepatitis B group and hepatic failure group were significantly higher than those in control group， and the expression of IL-33， sST2 and MCP-1 in hepatic failure group was significantly higher than those in chronic hepatitis B group （P < 0.05）. Compared with mild hepatic fibrosis group， the levels of IL-33， sST2 and MCP-1 in moderate hepatic fibrosis group， severe hepatic fibrosis group and cirrhosis group increased， and the levels of IL-33， sST2 and MCP-1 in severe hepatic fibrosis group and cirrhosis group were higher than those in moderate hepatic fibrosis group， while the levels of IL-33， sST2 and MCP-1 in cirrhosis group were higher than those in severe hepatic fibrosis group， the differences were statistically significant （P < 0.05）. Pearson correlation analysis showed that IL-33， sST2 and MCP-1 was positively correlated with Ishak score in patients with chronic hepatitis B （r = 0.573， 0.728， 0.654， P < 0.05）. Conclusion Serum IL-33， sST2 and MCP-1 can evaluate and predict chronic hepatitis B virus infection and the aggravation of the disease. The test of serological indexes for the patients is helpful for disease diagnosis and prognosis evaluation.

[Key words] Chronic hepatitis B virus; Soluble growth STimulation expressed gene 2; Monocyte chemotactic protein-1; Interleukin-33

目前，乙型肝炎病毒感染仍是我國公共衛生事業重點關注的問題，根據統計我國約有乙型肝炎感染者1.5億，感染者人數眾多，且是演變為肝硬化的最主要原因[1]。目前，對于肝硬化的發病機制仍未完全明確，相關研究表明，炎癥損傷、纖維細胞轉化等在肝硬化發生、發展中起到重要作用[2-3]。白細胞介素-33（IL-33）是新近發現的具備多類生物效應的細胞因子，可溶性生長刺激表達基因2蛋白（sST2）是IL-33的重要受體[4]。研究發現，當IL-33與sST2結合后可以介導細胞內信號轉導，啟動一系列炎性變化過程[5];單核細胞趨化蛋白-1（MCP-1）為CC趨化因子家族成員之一，在人體發生炎性反應時會出現異常表達[6]。本研究分析了上述三種因子對人體肝組織炎癥的評估作用，選擇慢性乙型肝炎病毒感染患者為分析對象，旨在提出新的肝組織炎癥血清學指標。現報道如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取廣東省東莞市人民醫院（以下簡稱“我院”）2017年1月～2018年1月收治的105例慢性乙型肝炎病毒感染患者為觀察組，其中單純慢性乙肝患者67例（慢性乙肝組），合并肝衰竭患者38例（肝衰竭組）。納入標準：①符合《慢性乙型肝炎防治指南（2015年版）》[7]中關于慢性乙型肝炎的診斷標準，以及《肝衰竭診治指南（2012年版）》[8]中關于肝衰竭的診斷標準;②患者經乙型肝炎病毒-DNA檢測確診為乙型肝炎病毒感染;③未進行抗病毒治療;④慢性乙肝患者接受肝組織穿刺活檢，病歷資料完整;⑤患者及其家屬知情本研究并簽署同意書。排除標準：①合并其他肝臟疾病;②合并其他病原體感染;③先天性免疫異常患者。慢性乙肝組67例，男37例，女30例;年齡22～61歲，平均（37.81±13.66）歲。肝衰竭組38例，男22例，女16例;年齡24～64歲，平均（38.29±13.84）歲。同時選擇無肝臟疾病的健康志愿者50名為對照組，男28名，女22名;年齡24～63歲，平均（38.34±14.52）歲。各組受檢者年齡、性別等基線資料比較差異無統計學意義（P > 0.05），具有可比性。本研究已獲我院倫理學委員會批準。

1.2 方法

1.2.1 血清學檢查? 檢驗前1 d對受檢者進行健康教育，檢驗當日于清晨采集所有受檢者的空腹靜脈血，置入離心機，以3500 r/min、離心半徑8 cm離心處理7 min后獲得血清標本，再分別采用酶聯免疫吸附法（ELISA）測定IL-33、sST2與MCP-1水平。江蘇江萊生物科技有限公司提供的IL-33與可溶性ST2 ELISA試劑盒（生產批號：20161121），上海江萊生物科技有限公司提供的MCP-1 ELISA試劑盒（生產批號：20160724），根據產品指示說明書完成檢驗，測定上述指標的具體表達。

1.2.2 肝組織活檢? 所有慢性乙肝患者進行肝臟穿刺組織活檢，應用活檢針在B超引導下進行肝臟穿刺，取至少2 cm肝臟組織，由病理學醫師制片，蘇木精-伊紅染色，參照Ishak評分標準[9]對慢性乙肝組患者的肝臟纖維化進行判定，Ishak評分為0～6分，其中0分表示未見纖維化;1～2分表示部分匯管區纖維組織增生，有或無短纖維間隔形成（輕度肝纖維化）;3～4分表示大部分匯管區纖維組織增生，匯管區間的橋狀纖維間隔明顯或匯管區-中央靜脈纖維隔形成（中度肝纖維化）;5分表示匯管區間的橋狀纖維間隔或匯管區-中央靜脈纖維隔明顯，偶見結節形成（重度肝纖維化）;6分表示肝硬化。根據判定結果，將慢性乙肝組患者進一步分為輕度肝纖維化組（13例）、中度肝纖維化組（14例）、重度肝纖維化組（14例）、肝硬化組（26例）。

1.3 統計學方法

數據處理采用SPSS 19.0統計學軟件，計量資料以均數±標準差（x±s）表示，應用t檢驗，多組間計量資料比較采用單因素方差分析。計數資料應用χ2檢驗，應用Pearson相關分析分析相關性。以P < 0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 三組受檢者的IL-33、sST2與MCP-1比較

慢性乙肝組與肝衰竭組的IL-33、sST2與MCP-1水平均明顯高于對照組，并且肝衰竭組的IL-33、sST2與MCP-1表達水平明顯高于慢性乙肝組，差異有統計學意義（P < 0.05）。見表1。

2.2 慢性乙肝組中不同肝纖維化程度患者的IL-33、sST2與MCP-1比較

與輕度肝纖維化組比較，中度肝纖維化組、重度肝纖維化組和肝硬化組的IL-33、sST2與MCP-1均升高，且重度肝纖維化組和肝硬化組IL-33、sST2與MCP-1水平高于中度肝纖維化組，肝硬化組IL-33、sST2與MCP-1水平高于重度肝纖維化組，差異有統計學意義（P < 0.05）。見表2。

2.3 慢性乙肝組患者IL-33、sST2、MCP-1與Ishak評分的相關性分析

經Pearson相關分析顯示，慢性乙肝組患者IL-33、sST2與MCP-1與Ishak評分呈正相關（r = 0.573、0.728、0.654，P < 0.05）。見圖1。

3 討論

慢性乙型肝炎病毒的變異性與異源性均較為嚴重，機體發生慢性乙型肝炎病毒感染后，病毒會在體內長時間存在，并促使病情不斷進展，加重肝纖維化，誘發肝硬化甚至惡性腫瘤[10]。現階段研究已證實人類感染病毒后并不會形成肝部的直接損傷，而由于感染而引發的免疫反應過程為其肝部損傷的重要原因，機體免疫失衡是疾病的主要發生機制，其中免疫細胞因子對疾病發生、進展及預后均形成影響作用[11-12]。目前，臨床評定肝纖維化程度主要采用病理組織活檢方法，但該種檢驗方式具備一定的有創性，容易對患者形成臨床風險[13]。近年臨床影像學技術也不斷發展，部分醫院針對患者開展瞬時彈性成像檢查，雖能在避免穿刺創傷的基礎上了解患者的肝臟損傷程度，但其影響因素較多，導致診斷評估作用有所限制[14]。近年來，不斷有研究分析慢性乙型肝炎病毒感染患者的血清學指標，發現部分免疫學因子在疾病發生與進展過程中均發揮著影響作用。

[12]? Tseng TC，Huang LR. Immunopathogenesis of Hepatitis B Virus [J]. J Infect Dis，2017，216（suppl_8）：S765-S770.

[13]? 姜紹文，林蘭意，項曉剛，等.IL-33及其受體ST2在D-GalN/LPS誘導的急性肝功能衰竭小鼠中的表達及意義[J].肝臟，2016，21（4）：267-272.

[14]? Jiang SW，Wang P，Xiang XG，et al. Serum soluble ST2 is a promising prognostic biomarker in HBV-related acute-on-chronic liver failure [J]. Hepatobiliary Pancreat Dis Int，2017，16（2）：181-188.

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