Th9/Th22 比例與小兒哮喘病情嚴重程度的相關(guān)性

張偉 張旭力

哮喘是兒童最常見呼吸系統(tǒng)疾患，近年由于環(huán)境污染等因素，發(fā)病率呈上升趨勢，已嚴重影響小兒的身心健康與生長發(fā)育[1-2]。在臨床實踐中，通過明確的癥狀體征、同時排除其他器質(zhì)性疾病所致喘息胸悶，多可確診哮喘，但具體哮喘病情嚴重程度的判斷仍存在一定難度。CD4+T細胞是體內(nèi)調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)、炎癥反應(yīng)的重要細胞群，其中Th9、Th22是近年來新發(fā)現(xiàn)的兩種CD4+T細胞亞群，已有研究報道Th9 / Th22失調(diào)與肺炎[3]及變態(tài)反應(yīng)性疾病[4]的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。但是，目前關(guān)于Th9、Th22細胞分布在哮喘患兒病情進展中扮演的角色尚不明確。為此，本文將以哮喘患兒為研究對象、具體分析外周血Th9 / Th22比例并探討其與哮喘病情的內(nèi)在聯(lián)系，以期為日后小兒哮喘病情嚴重程度評估尋找簡便的血液學(xué)指標。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2016年8月—2018年8月本院首診收治的哮喘患兒98例作為哮喘組，納入標準：（1）符合中華醫(yī)學(xué)會兒科學(xué)會呼吸學(xué)組制定的《兒童支氣管哮喘診斷與防治指南（2016年版）》中哮喘的診斷標準[5]；（2）年齡5～12周歲；（3）智力與年齡段吻合、可配合相關(guān)檢查；（4）監(jiān)護人簽署知情同意書。排除標準：（1）合并嚴重先天性疾患；（2）入組前3月內(nèi)有下呼吸道感染史；（3）合并嚴重自身免疫性疾病。另取同期在本院進行體檢的健康小兒100例作為正常對照組。

哮喘組中男性50例、女性48例，年齡5～11周歲，平均（8.19±1.25）周歲，足月兒90例、早產(chǎn)兒8例，既往肺炎病史：有26例、無72例；正常對照組中男性51例、女性49例，年齡5～12周歲，平均（8.20±1.31）周歲，足月兒92例、早產(chǎn)兒8例，既往肺炎病史：有23例、無77例。兩組小兒的性別、年齡、足月 / 早產(chǎn)、既往肺炎病史等基線資料分布差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P ＞0.05）。經(jīng)本院倫理委員會審核、此次研究獲批。

1.2 研究方法

1.2.1 Th9/Th22細胞分布比例檢測 哮喘組小兒發(fā)作期（未經(jīng)治療前）、正常對照組小兒體檢時，留取空腹外周靜脈血標本2.0～3.0 mL，采用流式細胞儀測定其中Th9、Th22細胞分布比例。

1.2.2 哮喘病情相關(guān)指標檢測 同樣留取兩組小兒的外周血標本，采用放射免疫法測定其中免疫球蛋白E（immunoglobulin E ，IgE）、半胱氨酰白三烯（ cysteinyl leukotriene ，CysLts）等過敏指標的水平；采用酶聯(lián)免疫吸附法測定炎癥介質(zhì)單核細胞趨化蛋白-1（monocyte chemoattractant protein -1，MCP-1）、轉(zhuǎn)化生長因子-β1（ transforming growth factor-β1，TGF-β1）、嗜酸性粒細胞（eosinophil，EOS）計數(shù)。采用肺功能儀測定兩組小兒的肺功能參數(shù)水平，包括第1秒用力呼氣容積（forced expiratory volume in 1 second，F(xiàn)EV1）、呼氣峰流速（peak expiratory velocity，PEF）。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法 本次研究數(shù)據(jù)計算所用統(tǒng)計學(xué)軟件為SPSS 20.0。Th9 / Th22細胞比例、過敏指標、炎癥指標、肺功能參數(shù)水平屬于計量資料，以（均數(shù)±標準差）表示，兩組間比較選擇獨立樣本t檢驗。相關(guān)性分析采用Pearson檢驗。計算所得統(tǒng)計值P＜0.05則判定差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 Th9/Th22比例

哮喘組患兒外周血中Th9細胞比例、Th22細胞比例均顯著高于正常對照組小兒，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。見表1。

2.2 過敏指標

哮喘組患兒外周血中IgE、CysLts的水平均顯著高于正常對照組小兒，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。見表2。

2.3 炎癥指標

哮喘組患兒外周血中MCP-1、TGF-β1、EOS的水平均顯著高于正常對照組小兒，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P ＜0.05）。見表3。

2.4 肺功能參數(shù)

哮喘組患兒的FEV1、PEF水平均顯著低于正常對照組小兒，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。見表4。

2.5 相關(guān)性分析

Pearson檢驗發(fā)現(xiàn)，哮喘患兒外周血中Th9細胞比例與過敏指標IgE、CysLts的水平，炎癥指標MCP-1、TGF-β1、EOS的水平均呈正相關(guān)，r分別為0.294、0.335、0.273、0.412、0.384；與肺功能參數(shù)FEV1、PEF的水平呈負相關(guān)，r分別為-0.293、-0.341。哮喘患兒外周血中Th22細胞比例與過敏指標IgE、CysLts的水平，炎癥指標MCP-1、TGF-β1、EOS的水平均呈正相關(guān)，r分別為0.313、0.235、0.391、0.441、0.367；與肺功能參數(shù)FEV1、PEF的水平呈負相關(guān)，r分別為-0.277、-0.351。以上P均＜0.05。

表1 兩組小兒外周血Th9 / Th22 比值的比較

表1 兩組小兒外周血Th9 / Th22 比值的比較

組別 例數(shù) Th9（%） Th22（%）正常對照組 100 0.71±0.09 0.92±0.15哮喘組 98 1.33±0.16 1.58±0.23 t 值 - 33.692 23.963 P 值 - 0.000 0.000

表2 兩組小兒外周血過敏指標水平的比較

表2 兩組小兒外周血過敏指標水平的比較

組別 例數(shù) IgE（mg/L） CysLts（ng/mL）正常對照組 100 0.67±0.08 21.29±3.40哮喘組 98 2.19±0.35 52.66±7.21 t 值 - 42.317 39.281 P 值 - 0.000 0.000

表3 兩組小兒外周血炎癥指標水平的比較

表3 兩組小兒外周血炎癥指標水平的比較

組別 例數(shù) MCP-1（pg/mL） TGF-β1（ng/mL） EOS（×108 個/L）正常對照組 100 29.47±4.51 10.28±1.53 256.81±32.54哮喘組 98 54.23±7.95 34.16±5.22 473.29±58.01 t 值 - 27.023 43.867 32.469 P 值 - 0.000 0.000 0.000

表4 兩組小兒FEV1、PEF 水平的比較

表4 兩組小兒FEV1、PEF 水平的比較

組別 例數(shù) FEV1（%） PEF（L/min）正常對照組 100 90.12±13.21 381.25±54.92哮喘組 98 78.51±11.32 293.41±59.23 t 值 - 9.191 8.282 P 值 - ＜0.05 ＜0.05

3 討論

Th9是主要分泌IL-9的CD4+T細胞亞群，其可促進呼吸道中IgE的分泌并增加氣道反應(yīng)性[6-7]；Th22經(jīng)配體依賴轉(zhuǎn)錄因子調(diào)節(jié)IL-22的表達，具有促進呼吸道上皮修復(fù)、縮小炎癥反應(yīng)等作用[8-9]。Th1 / Th2等免疫細胞在哮喘中的作用研究已經(jīng)開展十分廣泛，而Th9 / Th22的作用則尚不明了。文中哮喘患兒外周血中Th9細胞比例、Th22細胞比例均較同齡健康小兒有了大幅提升，說明高表達的Th9、Th22細胞參與哮喘病程，推測Th9高表達直接促進哮喘氣道炎癥、Th22反應(yīng)性表達增加是機體的一種自我保護機制。關(guān)于Th9 / Th22分布比例與小兒哮喘病情的具體內(nèi)在聯(lián)系，下文從過敏反應(yīng)、炎癥反應(yīng)、肺功能三方面展開闡述。

較多研究認為，哮喘屬于I型變態(tài)反應(yīng)，高表達的IgE是哮喘急性發(fā)作的典型特征[10-11]，CysLts也是典型的過敏指標，在變態(tài)反應(yīng)性疾病患者中呈高表達，可促進氣道平滑肌劇烈收縮以及一系列哮喘癥狀出現(xiàn)[12]。文中哮喘患兒外周血中IgE、CysLts的水平顯著高于健康同齡小兒，這與疾病的變態(tài)反應(yīng)本質(zhì)吻合。相關(guān)性分析指出，哮喘患兒外周血中Th9、Th22細胞分布比例與上述過敏指標水平呈正相關(guān)，說明Th9、Th22細胞分布比例可客觀反映哮喘患兒的過敏嚴重程度。

變態(tài)反應(yīng)發(fā)生后小兒氣道內(nèi)大量炎癥介質(zhì)合成分泌，是氣道高反應(yīng)性出現(xiàn)及維持的重要機制，具體氣道局部及全身炎癥反應(yīng)程度與哮喘病情間存在良好的相關(guān)關(guān)系。MCP-1、TGF-β1是單核巨噬細胞及白細胞等分泌的炎癥因子；EOS是典型的炎癥細胞，相關(guān)的研究已經(jīng)證實其在哮喘患兒中存在異常高表達。文中哮喘患兒外周血中MCP-1、TGF-β1、EOS的水平顯著高于健康小兒，與既往研究結(jié)論吻合。相關(guān)性分析指出，哮喘患兒外周血Th9、Th22細胞比例與上述炎癥指標的水平呈正相關(guān)，說明Th9、Th22細胞比例可客觀反映哮喘患兒的全身炎癥反應(yīng)程度、間接反映哮喘病情嚴重程度。

哮喘反復(fù)發(fā)作可導(dǎo)致患兒通氣功能發(fā)生顯著異常，主要表現(xiàn)為FEV1、PEF水平下降，這也是臨床癥狀不典型患兒進行疾病診斷的最主要肺功能參數(shù)指標。文中哮喘患兒的FEV1、PEF水平低于健康小兒，相關(guān)性分析進一步發(fā)現(xiàn)哮喘患兒外周血中Th9、Th22細胞分布比例與上述肺功能參數(shù)水平呈負相關(guān)，說明Th9、Th22細胞分布比例可客觀反映哮喘患兒的肺功能損傷程度，也同樣間接反映哮喘整體病情嚴重程度。

綜上可知，哮喘患兒存在外周血Th9、Th22細胞分布比例的異常增高，且其增高幅度與患兒過敏程度、全身炎癥反應(yīng)程度及肺功能損傷程度均直接相關(guān)，可能是反映哮喘病情的有效指標之一。