黃精臨方炮制的成分變化

劉駿 李波 劉興文

[摘要]目的探討黃精采用不同方法炮制后對其成分的影響。方法采用蒽酮-硫酸法測定黃精多糖含量。熱浸法測定醇溶性浸出物。薄層色譜法分析成分變化。結果黃精經臨制后。多糖含量降低。多糖含量由高到低分別為黃精片，九制黃精，酒黃精，制黃精;同時炮制后。制黃精浸出物降低。酒黃精、九制黃精浸出物略有升高。浸出物由高到低分別為：九制黃精>酒黃精>黃精片>制黃精;薄層色譜分析表明各炮制品鼢無明顯差異。結論黃精臨方炮制后。多糖含量降低;浸出物含量酒黃精及九制黃精略升高。其他成分的變化有待于進一步深入研究。

[關鍵詞]黃精;黃精多糖;浸出物;炮制;薏酮-硫酸法;熱浸法;薄層色譜法

[中圖分類號]R283 [文獻標識碼]A [文童編號]2096-5249（2019）14-281-03

黃精為百合科植物滇黃精Polygonatum kingianum Coll。etHemsl、黃精Polygonatum sibiricum Red。或多花黃精Polygonatum cyrtonema Hua的干燥根莖。按形狀不同，習稱“大黃精”、“雞頭黃精”、“姜形黃精”。黃精為臨床常用補益藥，歸脾、肺、腎經，其性味甘平，具有補氣養陰，健脾潤肺，益腎的功效，用于脾胃氣虛，體倦乏力，胃陰不足，口干食少，肺虛燥咳，勞嗽咳血，精血不足，腰膝酸軟，須發早白，內熱消渴等病癥。生黃精具有麻味，生品服用時，口舌麻木，刺激咽喉。接觸過生黃精或其汁液的皮膚會產生瘙癢的感覺，久聞其生味，有刺目之感，故多炮制后入藥。通過炮制，一方面可制其毒副作用，消除麻味，減輕對咽喉的刺激性，糖性變濃烈，口感好，利于服用;另一方面，黃精經炮制后轉變藥性，利于有效成分積累，可提高黃精的臨床療效，增強藥物補脾潤肺，益腎的作用。至清末，黃精的炮制方法多達十余種，但以蒸煮法為主，現代的炮制方法中又增加了加輔料蒸等不同的工藝方法。據不完全統計，黃精的臨方炮制品多為黃精片（藥典）、酒黃精（藥典，酒燉法或酒蒸法，每100kg黃精，用黃酒20kg。）、制黃精（四川炮制規范，用黑豆熬取濃汁，浸拌潤透心，蒸至內外呈滋潤黑色，干燥。每100kg黃精用黑豆10kg）、九制黃精。為了探討這些炮制方法使黃精的成分發生了什么改變，本實驗通過測定黃精不同炮制品中多糖、浸出物含量變化并對其薄層色譜進行比較研究，試探黃精臨方炮制的實際意義，為闡明黃精炮制作用機制研究奠定基礎。

1試驗儀器與材料

1.1儀器

手提式高速粉碎機：DFT-100A（溫嶺市林大機械有限公司）

數顯恒溫水浴鍋：HH-6（國華電器有限公司）

雙光束紫外可見分光光度計：TU-1901（北京普析通用儀器有限責任公司）;

電子分析天平：BP211D、BT224S（賽多利斯科學儀器（北京）有限公司）

玻璃儀器：購自重慶醫藥化玻公司。

1.2材料

對照品：無水葡萄糖（110833-201506），中國食品藥品檢定研究院。

對照藥材：黃精（121341-201705），中國食品藥品檢定研究院。

供試品：黃精片、酒黃精、制黃精、九制黃精4種炮制品，各備6個批次。

試劑：試驗用水為純化水，無水乙醇、乙醇、正丁醇、石油醚（60-90℃）、乙酸乙酯、甲酸、香草醛、硫酸、蒽酮均為分析純。

硅膠G薄層板：青島海洋化工廠分廠。

2方法與結果

2.1黃精不同炮制品的多糖含量測定

2.1.1標準曲線的繪制

對照品溶液的制備取105℃干燥至恒重的無水葡萄糖對照品33mg，精密稱定，置100ml量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得（每lml中含無水葡萄糖0.33rag）。

標準曲線的制備

精密量取對照品溶液0.1ml、0.2ml、0.3ml、0.4ml、0.5ml、0.6ml，分別置10ml具塞刻度試管中，各加水至2.0ml，搖勻，在冰水浴中緩緩滴加0.2%蒽酮-硫酸溶液至刻度，混勻，放冷后置水浴中保溫10分鐘，取出，立即置冰水浴中冷卻10分鐘。取出，以相應試劑為空白。照紫外。可見分光光度法（《中國藥典～2015年版通則0401》）在582nm波長處測定吸光度。以吸光度為縱坐標，濃度為橫坐標，繪制標準曲線，得線性方程，A=0.0395C+0.0547，r=0.9996.結果見表1及圖1.

結果表明，無水葡萄糖在3.319-19.914ug/ml范圍內，線性關系良好。

2.1.2黃精不同炮制品的含量測定

供試品溶液的制備

取60℃干燥至恒重的黃精片、酒黃精、制黃精、九制黃精細粉各約0.25g，精密稱定，分別置圓底燒瓶中，各加80%乙醇150ml，置水浴中加熱回流1小時，趁熱濾過，殘渣用80%熱乙醇洗滌3次，每次10ml，將殘渣及濾紙置燒瓶中，加水150ml，置沸水浴中加熱回流1小時，趁熱濾過，殘渣及燒瓶用熱水洗滌4次，每次10ml，合并濾液與洗液，放冷，轉移至250ml量瓶中，加水至刻度，搖勻。

黃精不同炮制品多糖含量測定 精密量取各供試品溶液lml，分別置10ml具塞干燥試管中，照標準曲線的制備項下的方法，自“加水至2.0ml"起，依法測定吸光度，從標準曲線上讀出供試品溶液中含無水葡萄糖的重量（mg），計算，即得。各炮制品作六個批次。結果見表2及圖2.

該法為藥典2015版收載的方法，穩定可靠，科學簡便，故不再做方法學考查。

結果表明，黃精經炮制后，多糖含量降低，多糖含量由高到低分別為：黃精片>九制黃精>酒黃精>制黃精。

2.2黃精不同炮制品的浸出物測定

取黃精片、酒黃精、制黃精、九制黃精供試品各約2g，精密稱定，分別置150ml的錐形瓶中，精密加稀乙醇各100ml，密塞，稱定重量，靜置1小時后，連接回流冷凝管，加熱至沸騰，并保持微沸1小時。放冷后，取下錐形瓶，密塞，再稱定重量，用稀乙醇補足減失的重量，搖勻，用干燥濾器濾過，精密量取濾液25ml，置己干燥至恒重的蒸發皿中，在水浴上蒸干后，于105℃干燥3小時，置干燥器中冷卻30分鐘，迅速精密稱定重量，計算，即得。各炮制品作六個批次。結果見表3及圖3

結果表明，黃精經炮制后，制黃精浸出物降低，酒黃精、九制黃精浸出物升高，浸出物由高到低分別為：九制黃精>酒黃精>黃精片>制黃精。

2.3黃精不同炮制品薄層色譜的比較

分別取黃精片、酒黃精、制黃精、九制黃精粉末各1g，各加70%乙醇20ml，加熱回流1小時，抽濾，濾液蒸干，殘渣加水10ml使溶解，加正丁醇振搖提取2次，每次20ml，合并正丁醇液，蒸干，殘渣加甲醇lml使溶解，作為供試品溶液。另取黃精對照藥材1g，同法制成對照藥材溶液。照薄層色譜法（《中國藥典》2015年版通則0502）試驗，吸取上述溶液各10ul，分別點于同一硅膠G薄層板上，以石油醚（60-90℃）-乙酸乙酯-甲酸（5：2：0.1）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，在1050CN熱至斑點顯色清晰，得黃精片、酒黃精、制黃精、九制黃精及黃精對照藥材薄層色譜，結果見圖4

結果表明，黃精片、酒黃精、制黃精、九制黃精薄層色譜與黃精對照藥材無明顯差異。

3討論

3.1通過以上實驗，對黃精不同炮制品的成分變化作了初步探討。結果表明：黃精經臨方炮制后，多糖含量降低，多糖含量由高到低分別為黃精片>九制黃精>酒黃精>制黃精;同時，制黃精浸出物降低，酒黃精、九制黃精浸出物升高，浸出物由高到低分別為：九制黃精>酒黃精>黃精片>制黃精;薄層色譜表明各炮制品與對照藥材無明顯差異。初步認為采用蒸制法和用輔料黃酒是確保黃精炮制質量的關鍵。

3.2目前關于黃精的刺激性作用，普遍認為其中的黏液質是主要成分，黏液質屬多糖類物質，黃精經炮制后多糖類含量降低，可能是黏液質被分解的結果。

3.3黃精的藥理作用研究多集中在黃精多糖、黃精皂苷及炮制過程中明顯增多的5-羥甲基糠醛上。黃精多糖被認為是黃精的主要藥效成分，本實驗中，炮制后多糖含量下降，這與多個研究報道的結果一致。而又有研究認為，炮制前后的多糖藥理作用并沒有顯著性差異，盡管多糖含量下降，但由于多糖水解成了易于煎出的低聚糖和單糖，才更有利于藥效的發揮。目前對黃精炮制增效的機制探討主要集中在黃精多糖質變和量變方面，而黃精多糖是否就是唯一的或者是最主要的藥效成分，以及黃精中的其他成分是否對炮制后藥效增強也起到了關鍵作用，仍然有待于進一步研究。

3.4黃精成分豐富，炮制后其成分及浸出物含量的改變，既有炮制過程中發生化學反應的作用，也有加入輔料炮制促進有效成分溶解的作用。黃精的質量標準需更加全面考慮多個因素，而黃精炮制后，補益作用增強，可能與組成成分改變（包括化學結構改變、有效成分增多、各成分構成比例改變）、成分溶出提高、氨基酸含量增多等有關。因此，有必要對黃精炮制前后的化學成分進行更深入的研究，并結合藥理實驗以闡明黃精炮制前后減毒增效的作用機制，從而為制定黃精及其炮制品的質量控制體系奠定基礎。

致謝：感謝成都新荷花中藥飲片公司周靜波博士及其團隊提供有關實驗支撐。