60Co-γ射線輻照誘導穿心蓮M1代群體變異及聚類分析

蘇雨苗 劉瀟晗 杜勤 黎志鵬 石志棉 李娜 黃瑞華

摘 要 目的：研究60Co-γ射線輻照誘變對穿心蓮植物學性狀和品質(zhì)性狀的影響，篩選適宜的誘變輻照劑量。方法：采用不同輻照劑量（0、10、20、50、100、200、300 Gy）的60Co-γ射線輻照穿心蓮種子，對輻照后誘變所得M1代穿心蓮的種子發(fā)芽率、根長、出苗率、幼苗株高、葉片面積、鮮重、干重、葉片下表皮氣孔數(shù)等植物學性狀指標，以及穿心蓮內(nèi)酯含量、脫水穿心蓮內(nèi)酯含量、葉綠素含量、總超氧化物歧化酶（T-SOD酶）和銅鋅超氧化物歧化酶（CuZn-SOD酶）等品質(zhì)性狀指標進行測定，計算變異系數(shù)（CV）;對出苗率進行線性回歸分析，計算半致死劑量;對植物學性狀和品質(zhì)性狀各指標與輻照劑量進行相關性分析;以組間聯(lián)接法結合平方歐式距離對各輻照劑量組M1代穿心蓮進行聚類分析。結果：不同輻照劑量對穿心蓮植物學性狀和品質(zhì)性狀的影響不同;按CV平均值大小對M1代穿心蓮植物學性狀指標排序為葉片面積>鮮重>干重>株高>根長>氣孔數(shù)>出苗率>發(fā)芽率，對不同輻照劑量排序為50 Gy>200 Gy>100 Gy>20 Gy>10 Gy>300 Gy>0 Gy;按CV平均值大小對M1代穿心蓮品質(zhì)性狀指標排序為脫水穿心蓮內(nèi)酯含量>穿心蓮內(nèi)酯含量>葉綠素含量>CuZn-SOD酶活性>T-SOD酶活性，對不同輻照劑量排序為100 Gy>50 Gy>200 Gy>20 Gy>10 Gy>300 Gy>0 Gy;半致死劑量為195.10 Gy。根據(jù)植物學性狀，可將7個劑量組M1代穿心蓮分為4類;根據(jù)品質(zhì)性狀，可將7個劑量組M1代穿心蓮分為3類。結論：穿心蓮的適宜輻照誘變劑量范圍為50～200 Gy。

關鍵詞 穿心蓮;60Co-γ射線;輻照誘變育種;變異指數(shù);聚類分析

ABSTRACT? ?OBJECTIVE： To study the effects of 60Co-γ radiation on the botanical traits and property of Andrographis paniculata， and to screen suitable irradiation dose. METHODS： The seeds of A. paniculata were irradiated by 60Co-γ rays with different irradiation doses（0，10，20，50，100，200，300 Gy）. The botanical traits indexes of A. paniculata as seed germination rate， root length， seedling rate， seedling height， leaf area， fresh weight， dry weight， stomata number of lower epidermis of leaf， and its property indexes as the contents of andrographolide， dehydrated andrographolide and chlorophyll， activity of T-SOD enzyme and CuZn-SOD enzyme， were determined after radiation. The coefficient of variation （CV） was calculated. The linear regression analysis was performed for seedling rate， and medial lethal dose was calculated. The correlation analysis was performed between the parameters of botanical trait and quality property with irradiation dose. Cluster analysis was conducted for M1 generation of A. paniculata in different irradiation dose groups by connection method combined with squared euclidean distance. RESULTS： Different irradiation doses showed different effects on botanical traits and property of A. paniculata. According to the average value of CV， the index of botanical traits was ranked as leaf area > fresh weight > dry weight > plant height > root length > stomata number > seedling rate > germination rate; among different irradiation dose groups， the coefficient of variation was ranked as 50 Gy>200 Gy>100 Gy>20 Gy>10 Gy>300 Gy>0 Gy. According to the average value of CV， the index of property was ranked as dehydrated andrographolide content>andrographolide content>chlorophyll content>CuZn-SOD enzyme activity>T-SOD enzyme activity; among different irradiation dose groups， the coefficient of variation was ranked as 100 Gy>50 Gy>200 Gy>20 Gy>10 Gy>300 Gy>0 Gy. The medial lethal dose was 195.10 Gy. According to the botanical traits， M1 generation of A. paniculata of 7 dose groups could be divided into 4 types. According to the property， M1 generation of A. paniculata of 7 dose groups could be divided into 3 types. CONCLUSIONS： The suitable irradiation dose interval for irradiating A. paniculata is 50-200 Gy.

KEYWORDS? ?Andrographis paniculata; 60Co-γ ray;Irradia- tion mutation breeding; Variation coefficient;Cluster analysis

穿心蓮來源于爵床科植物穿心蓮屬植物穿心蓮[Andrographispaniculata（Burm.f.） Nees]，以地上部分入藥[1]，是中醫(yī)臨床常用藥材。我國99%以上的穿心蓮商品藥材來源于栽培種，只有極其少數(shù)來自于野生種，由于長期的人工栽培管理，導致該植物目前存在種質(zhì)單一、藥用成分質(zhì)量下降且質(zhì)量不穩(wěn)定的問題[2-4]。輻照誘變育種是利用γ射線、Χ射線或者其他物理誘變因素對植物進行輻照處理，在短時間內(nèi)得到基因變異的新品種，以便于人們篩選出具有優(yōu)良性狀的新品種的一種新興育種技術[5-7]。輻照誘變育種技術主要是通過輻照處理，將輻照能量傳遞到生物體內(nèi)，從而改變其細胞分子結構，繼而引起其染色體突變和基因突變[6]。經(jīng)過染色體突變與基因突變后，有很大幾率可得到基因變異的新品種。在輻照誘變育種的研究領域，我國已有不少成功案例，如目前已研制成功的稻瘟病抗性得到明顯提高的水稻新品種航育1號、江蘇省里下河地區(qū)農(nóng)業(yè)科學研究所連續(xù)定向選育出的揚稻6號中秈新品種等[7]。利用輻照誘變育種技術培育的突變品種無論是產(chǎn)量還是品質(zhì)都具有較大領先優(yōu)勢[7]，有利于藥用植物的優(yōu)勢栽培和進一步開發(fā)利用。基于此，本研究采用不同劑量的60Co-γ射線對穿心蓮種子進行輻照處理，初步研究了60Co-γ射線輻照對該植物學性狀和品質(zhì)性狀的影響，對誘導后所得穿心蓮變種的植物學性狀和品質(zhì)性狀進行了變異統(tǒng)計及聚類分析，以明確60Co-γ射線輻照在穿心蓮誘變育種技術中的應用價值。

1 材料

1.1 儀器

LC-20AT型高效液相色譜儀（日本島津公司）;755B型紫外分光光度計（上海精密科學儀器有限公司）;QF-PRX-160型智能人工氣候箱（上海喬楓實業(yè)有限公司）;YMJ-A型活體葉面積測量儀（杭州大吉光電儀器有限公司）;JJ300型電子天平（廣州湘儀機電設備有限公司）;EclipseE100型生物顯微鏡（日本Nikon公司）;OK-Y104型植物營養(yǎng)測定儀（鄭州歐科奇儀器制造有限公司）;GXX-9023MBE型電熱鼓風干燥箱（上海博訊實業(yè)有限公司醫(yī)療設備廠）;TG6-W型微量高速離心機（長沙湘儀離心機儀器有限公司）;KQ5200E型超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）。

1.2 試劑

穿心蓮內(nèi)酯對照品（批號：20180526，純度：≥98%）、脫水穿心蓮內(nèi)酯對照品（批號：20180616，純度：≥98%）均購自中國食品藥品檢定研究院;植物超氧化物歧化酶（SOD）試劑盒（南京建成生物工程研究所，批號：20180523）;次氯酸鈉（廣州化學試劑廠，批號：20170912）;甲醇（色譜純，天津市致遠化學試劑有限公司，批號：20180510）;乙醇（分析純，廣州化學試劑廠，批號：20180606）;中性氧化鋁（國藥集團化學試劑有限公司，批號：20180326，規(guī)格：200～300目）;水為蒸餾水。

1.3 植物種子

穿心蓮種子購買于廣東省湛江市遂溪縣，經(jīng)廣州中醫(yī)藥大學中藥學院杜勤教授鑒定為爵床科穿心蓮屬植物穿心蓮[A.（Burm.f.）Nees]的干燥種子。

2 方法

2.1 穿心蓮種子的輻照處理

將穿心蓮種子交由廣州華大生物科技有限公司進行輻照誘變。以60Co-γ射線為輻照源，于2018年6月對穿心蓮種子進行輻照處理。據(jù)前期預試驗，設置輻照劑量分別為0（對照組）、10、20、50、100、200、300 Gy組，每組50 g種子，劑量率均為10 Gy/min，輻照時間分別為0、1、2、5、10、20、30 min。所獲初代誘變穿心蓮品種命名為M1代。

2.2 M1代穿心蓮植物學性狀的測定

2.2.1 種子發(fā)芽率和根長 采用文獻方法[8]測定發(fā)芽率和根長。取“2.1”項下各輻照劑量組M1代穿心蓮種子150粒，分為3個亞組，每個亞組50粒種子。種子均以70%乙醇浸泡處理4 min、1%次氯酸鈉溶液消毒1 min、水沖洗3次后，整齊排列于墊有雙層濕潤紗布的培養(yǎng)皿中，置于溫度28 ℃、濕度60%、12 h光照/12 h黑暗交替的人工氣候箱中培養(yǎng)。每日中午12點和下午5點補充培養(yǎng)皿中的水分，使紗布保持濕潤，7 d后測定種子發(fā)芽率和根長。發(fā)芽率=（第7天發(fā)芽種子數(shù)/供測種子數(shù)）×100%。

2.2.2 種子出苗率 采用文獻方法[8]測定出苗率。取“2.1”項下各輻照劑量組的M1代穿心蓮種子150粒，分為3個亞組，每個亞組50粒種子。種子均以水浸泡24 h后，播種于50穴育苗盆中，每穴播種1粒種子。將育苗盆移栽于大棚，每日中午12點和下午5點補充盆中水分，使培養(yǎng)土保持濕潤。每日記錄穿心蓮種子發(fā)芽數(shù)，30 d后計算出苗率。出苗率=（第30天出苗種子數(shù)/供測種子數(shù)）×100%。

2.2.3 幼苗株高 觀察“2.2.2”項下穿心蓮幼苗的生長情況，各輻照劑量組隨機選取20株M1代穿心蓮幼苗移栽于大棚內(nèi)，移栽2個月后用直尺從植株基部至頂端測量幼苗株高。每株測3次，取平均值。

2.2.4 葉片面積 采用文獻方法[9]測定葉片面積。M1代穿心蓮幼苗移栽2個月后，各輻照劑量組隨機選取50片葉子，采用活體葉面積測量儀測定葉片面積。每片葉子測3次，取平均值。

2.2.5 植株鮮重、干重 于始花期在各輻照劑量組隨機選取50株M1代穿心蓮植株采收，以水洗凈，用吸水紙吸干水分后，測定穿心蓮單株的鮮重;陰干30 d后，測定干重。每株測3次，取平均值。

2.2.6 葉片下表皮氣孔數(shù) 隨機選取“2.2.3”項下移栽2個月后各輻照劑量組M1代穿心蓮幼苗，選取20片葉子，撕取葉片下表皮，滴加1～2滴水，制成葉片下表皮的臨時水裝片，于40倍顯微鏡下觀察。每片葉子選取3個視野，統(tǒng)計氣孔數(shù)，取平均值。

2.3 M1代穿心蓮品質(zhì)性狀的測定

2.3.1 穿心蓮內(nèi)酯、脫水穿心蓮內(nèi)酯含量 （1）供試品溶液的制備。參考2015年版《中國藥典》（一部）穿心蓮項下的方法[1]，在始花期采集各輻照劑量組M1代穿心蓮植株地上部分，陰干48 h，于60 ℃烘箱烘干10 h，粉碎，過四號篩。取粉末約0.5 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入40%甲醇25 mL，稱定質(zhì)量;浸泡1 h后，超聲處理（功率：250 W，頻率：33 kHz）30 min，放冷，再次稱定質(zhì)量，以40%甲醇補足減失的質(zhì)量;搖勻后，濾過，精密量取續(xù)濾液10 mL，上樣于中性氧化鋁柱（裝填量：5 g，內(nèi)徑：1.5 cm），以甲醇15 mL洗脫;收集洗脫液，置于50 mL量瓶中，以甲醇定容，搖勻，經(jīng)0.22 μm微孔濾膜濾過，即得。（2）混合對照品溶液的制備。取穿心蓮內(nèi)酯對照品、脫水穿心蓮內(nèi)酯對照品各適量，精密稱定，加甲醇制成每1 mL含穿心蓮內(nèi)酯0.114 1 mg、脫水穿心蓮內(nèi)酯0.119 0 mg的混合溶液，經(jīng)0.22 μm微孔濾膜濾過，即得。（3）穿心蓮內(nèi)酯和脫水穿心蓮內(nèi)酯含量測定。參考2015版《中國藥典》（一部）穿心蓮項目[1]下的高效液相色譜法測定。色譜條件：色譜柱為Hydrosphere-C18（250 mm×4.6 mm，5 μm）;流動相為甲醇-水（52 ∶ 48，V/V）;柱溫為25 ℃;檢測波長為225 nm（穿心蓮內(nèi)酯）、254 nm（脫水穿心蓮內(nèi)酯）;流速為0.8 mL/min;進樣量為5 μL。

2.3.2 葉片葉綠素含量 隨機選取“2.2.3”項下移栽2個月后的各輻照劑量組M1代穿心蓮幼苗的第3對真葉，用植物營養(yǎng)測定儀測定其葉綠素含量。每片葉片分別測上、中、下3個部分，取平均值。

2.3.3 葉片SOD酶含量 取各輻照劑量組M1代穿心蓮葉片，參考植物SOD試劑盒說明書方法進行提取。以水為空白調(diào)零，采用紫外分光光度計于波長550 nm處測定總超氧化物歧化酶（T-SOD酶）和銅鋅超氧化物歧化酶（CuZn-SOD酶）的活性。

2.4 統(tǒng)計學方法

采用SPSS 25.0軟件對實驗數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析。實驗數(shù)據(jù)以x±s表示，計算變異系數(shù)（CV，CV=s/x×100%）;對M1代穿心蓮種子的出苗率進行線性回歸分析，計算半致死劑量;對M1代穿心蓮的發(fā)芽率、出苗率、根長、株高、葉片面積、鮮重、干重、氣孔數(shù)、穿心蓮內(nèi)酯含量、脫水穿心蓮內(nèi)酯含量、葉綠素含量、T-SOD酶活性、CuZn-SOD酶活性等指標與輻照劑量進行相關性分析;以組間聯(lián)接法結合平方歐式距離對各輻照劑量組M1代穿心蓮進行聚類分析。P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

3 結果

3.1 輻照誘變對穿心蓮植物學性狀的影響

3.1.1 M1代穿心蓮植物學性狀指標的變化 結果顯示，不同輻照劑量對穿心蓮植物學性狀的影響不同，其中出苗率、根長、氣孔數(shù)等指標隨著輻照劑量的增大而呈現(xiàn)下降趨勢;發(fā)芽率、株高、葉片面積、鮮重、干重等指標隨著輻照劑量的增大而呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢。其中，100 Gy劑量組M1代穿心蓮的株高、葉片面積、鮮重、干重等指標均最高，分別較對照組增加24.37%、138.58%、43.61%、19.42%（P<0.05）;300 Gy劑量組M1代穿心蓮的各個指標均最低，分別為對照組的48.97%、65.85%、46.64%、31.59%、35.88%（P<0.05），結果詳見表1。

3.1.2 M1代穿心蓮植物學性狀與輻照劑量的相關性 相關性分析結果顯示，M1代穿心蓮的發(fā)芽率、株高、葉片面積、鮮重、干重等指標與輻照劑量無顯著相關性（P>0.05），出苗率、根長、氣孔數(shù)均與輻照劑量呈顯著負相關性（r<0，P<0.05），詳見表2。對出苗率進行回歸分析，得線性回歸方程y=54.784-0.139x（y表示出苗率，x表示輻照劑量），求得半致死劑量為195.10 Gy。

3.2 輻照誘變對穿心蓮品質(zhì)性狀的影響

3.2.1 M1代穿心蓮品質(zhì)性狀指標的變化 結果顯示，不同輻照劑量對穿心蓮品質(zhì)性狀的影響不同，其中穿心蓮內(nèi)酯含量、脫水穿心蓮內(nèi)酯含量、T-SOD酶活性、CuZn- SOD酶活性隨著輻照劑量的增大而呈現(xiàn)先升高后降低的趨勢。其中，50 Gy劑量組M1代穿心蓮地上部分的穿心蓮內(nèi)酯含量和脫水穿心蓮內(nèi)酯含量最高，分別較對照組增加了100.27%、114.06%（P<0.05）;100 Gy劑量組M1代穿心蓮的葉綠素含量、T-SOD酶活性和CuZn-SOD酶活性最高，分別較對照組增加了5.31%、1.65%、6.75%（P<0.05），結果詳見表3。

3.2.2 M1代穿心蓮品質(zhì)性狀與輻照劑量的相關性 相關性分析結果顯示，M1代穿心蓮的穿心蓮內(nèi)酯含量、脫水穿心蓮內(nèi)酯含量、葉綠素含量、CuZn-SOD酶活性等指標與輻照劑量無顯著相關性（P>0.05），T-SOD酶活性與輻照劑量呈顯著負相關性（r<0，P<0.05），結果詳見表4。

3.3 M1代穿心蓮的變異情況

3.3.1 植物學性狀的變異情況 各輻照劑量組M1代穿心蓮的發(fā)芽率、出苗率、根長、株高、葉片面積、鮮重、干重、氣孔數(shù)的CV值分別為4.07%～10.56%、5.69%～15.06%、10.43%～28.21%、14.62%～38.38%、15.08%～39.69%、17.26%～35.70%、16.81%～35.70%、4.85%～14.98%。按CV平均值大小對各植物學性狀指標排序為：葉片面積>鮮重>干重>株高>根長>氣孔數(shù)>出苗率>發(fā)芽率，這表明輻照誘變對穿心蓮的葉片面積、鮮重、干重等性狀變異的影響較大，對氣孔數(shù)、發(fā)芽率等性狀變異的影響較小。按CV平均值大小對輻照劑量排序為：50 Gy>200 Gy>100 Gy>20 Gy>10 Gy>300 Gy>0 Gy，這表明50、100、200 Gy劑量對穿心蓮植物學性狀變異的影響較大，10、20 Gy劑量影響較小，結果詳見表5。

3.3.2 品質(zhì)性狀的變異情況 各輻照劑量組M1代穿心蓮的穿心蓮內(nèi)酯含量、脫水穿心蓮內(nèi)酯含量、葉綠素含量、T-SOD酶活性、CuZn-SOD酶活性的CV值分別為13.13%～23.21%、14.29%～27.27%、3.00%～13.23%、0.86%～2.58%、1.09%～3.24%。按CV平均值大小對各品質(zhì)性狀指標排序為：脫水穿心蓮內(nèi)酯含量>穿心蓮內(nèi)酯含量>葉綠素含量>CuZn-SOD酶活性>T-SOD酶活性，這表明輻照誘變對穿心蓮的脫水穿心蓮內(nèi)酯含量和穿心蓮內(nèi)酯含量變異的影響較大，對葉綠素含量變異的影響中等，對CuZn-SOD酶活性、T-SOD酶活性變異的影響較小。按CV平均值大小對不同輻照劑量排序為：100 Gy>50? Gy>200 Gy>20 Gy>10 Gy>300 Gy>0 Gy，這表明50、100、200 Gy劑量對穿心蓮品質(zhì)性狀變異的影響較大，10、20、300 Gy劑量影響較小，結果詳見表6。

3.4 M1代穿心蓮的聚類分析結果

3.4.1 植物學性狀的聚類 按植物學性狀進行聚類分析的結果顯示，當遺傳距離為2.0時，可將7個輻照劑量組的M1代穿心蓮分為4類。其中，第1類為0、10 Gy輻照劑量組，第2類為20 Gy輻照劑量組，第3類為50、100 Gy輻照劑量組，第4類為200、300 Gy輻照劑量組;相鄰輻照劑量組間的植物學性狀相似度較高，不相鄰輻照劑量組間的性狀相似度較低，結果詳見圖1。

3.4.2 品質(zhì)性狀的聚類 按品質(zhì)性狀進行聚類分析的結果顯示，當遺傳距離為2.0時，可將7個輻照劑量組的M1代穿心蓮分為3類：第1類為0、10 Gy輻照劑量組，第2類為20、50 Gy輻照劑量組，第3類為100、 200、300 Gy輻照劑量組;相鄰輻照劑量組間的品質(zhì)性狀相似度較高，不相鄰輻照劑量組間的性狀相似度較低，結果詳見圖2。

4 討論

在自然條件下，植物本身偶然發(fā)生變異的頻率很低，單個植株發(fā)生變異的頻率為10-6[10]。而輻照誘變的優(yōu)勢在于育種周期短，并且通常改變的是主基因的部分，一般只要經(jīng)過2～4代育種，性狀就能基本穩(wěn)定，穩(wěn)定性較高。但輻照誘變育種的局限性在于難以掌控誘導突變的方向，多個理想性狀難以集中到同一個突變體上[11]。因此，研究者可通過篩選適宜的輻照劑量，擴大誘變的群體，增加可選擇的機會來克服輻照誘變育種的局限性。

于虹漫等[12]認為，不同品種植物對輻照的敏感性不同，因而輻照育種成敗的關鍵點在于選擇適宜的輻照劑量，既要產(chǎn)生較多的變異，又能將植株損傷控制在一定范圍內(nèi)。本研究結果表明，在高輻照劑量的條件下，M1代穿心蓮出苗率低，但CV值大;在低輻照劑量的條件下，M1代穿心蓮出苗率高，但CV值小。這與屠禮剛等[8]、李樹發(fā)等[13]的研究結果一致。本研究通過對60Co-γ射線輻照誘導獲得的M1代穿心蓮群體的植物學性狀和品質(zhì)性狀進行變異分析后發(fā)現(xiàn)，10、20、300 Gy劑量組M1代穿心蓮群體變異幅度較小，50 Gy～200 Gy劑量組的變異幅度較大;當輻照劑量達到300 Gy時，穿心蓮的各項植物學性狀指標均出現(xiàn)大幅下降的趨勢，說明隨著輻照劑量的增大，60Co-γ射線對植株的抑制加強，甚至造成高度損傷，使植物分生組織普遍受到嚴重破壞，生長緩慢，CV值下降，這與吳世長等[14]的研究結果一致。由于植物種子在半致死劑量處理的條件下，輻照的誘變率較高，同時具有一定的成活率，因此誘變育種中輻照劑量的選擇通常采用半致死劑量作為評判指標[15]。對出苗率的回歸分析結果顯示，輻照半致死劑量為195.10 Gy。此外，本研究分別通過植物學性狀和品質(zhì)性狀指標與輻照劑量進行相關性分析發(fā)現(xiàn)，M1代穿心蓮的發(fā)芽率、株高、葉片面積、鮮重、干重、穿心蓮內(nèi)酯含量、脫水穿心蓮內(nèi)酯含量、葉綠素含量、CuZn-SOD酶活性等指標與輻照劑量無顯著相關性，而出苗率、根長、氣孔數(shù)、T-SOD酶活性與輻照劑量呈顯著負相關性。

聚類分析是誘變育種、遺傳育種和種質(zhì)資源分析研究的主要方法之一，可將相關種質(zhì)資源按照不同特征組成不同類群，從而進行鑒別和研究，對挖掘和使用優(yōu)良資源及特異性狀具有重要意義，目前已在多種中藥植物育種研究中得以應用[15]。本研究通過對60Co-γ射線輻照誘導獲得的M1代穿心蓮群體的植物學性狀和品質(zhì)性狀進行聚類分析可知，相鄰輻照劑量組間的植物學性狀、品質(zhì)性狀相似度較高，不相鄰輻照劑量組間的上述性狀相似度較低，這與崔嘉欣等[16]對小麥輻照誘變育種研究的結果一致。

綜上所述，60Co-γ射線輻照誘導穿心蓮變異的適宜輻照劑量范圍為50～200 Gy。后續(xù)可進一步根據(jù)60Co-γ射線對穿心蓮種質(zhì)的輻射效應，從中篩選出優(yōu)良突變單株，并深入研究輻照對穿心蓮生長發(fā)育、開花、結實的影響及作用機制，為擴大穿心蓮種質(zhì)資源的多態(tài)性、培育高產(chǎn)優(yōu)質(zhì)的穿心蓮新品種提供理論依據(jù)。

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（收稿日期：2019-06-20 修回日期：2019-10-30）

（編輯：段思怡）