青蒿中草藥添加劑對散養肉雞抗病及免疫性能的影響

張滔滔，陳勝昌*，張華琦，王清峰，楊林花，陸小蘿，盧盛勇

（1.貴州大學動物科學學院，貴州貴陽550025；2.銅仁職業技術學院畜禽健康養殖中心，貴州銅仁554300）

為防治肉雞疾病和提高經濟效益，在肉雞的養殖中普遍使用抗生素等人工合成類藥物做飼料添加劑，雖然有防治效果，但也產生了藥物殘留、環境污染等問題。因此，尋找安全、綠色的飼料添加劑刻不容緩（廖玉英等，2010；郭愛偉等，2009）。中草藥具有毒副作用小、無藥殘與不易產生耐藥性等特點，其含有豐富的營養與生物活性物質，能夠提高動物機體免疫和生長性能，是抗生素的理想替代品（盧福山等，2011）。青蒿是我國常見中草藥，具有解暑、祛風、止癢等功效。有研究表明，青蒿作為飼料添加劑應用于畜禽的實際生產中，能夠提高畜禽的生產性能、免疫性能以及改善畜禽的產品品質（宋志華等，2016；周全民等，2015；馬飛等，2011）。目前，關于青蒿應用于肉雞實際生產的報道相對較少。本試驗以青蒿及其中草藥復方作為飼料添加劑，研究其對散養肉雞免疫及抗病性能的影響，確定青蒿作為飼料添加劑的最佳添加方式，為其應用于肉雞的實際生產提供理論依據與實踐參考。

1 材料與方法

1.1 試驗材料 試驗所用中草藥購于貴陽市太升中藥批發市場，藥材經65℃烘干，粉碎后80目過篩備用。

1.2 試驗動物與設計 試驗選用體況健康、初始體重基本一致[（580±18.34）g]的30日齡脫溫肉雞360只，采用多因素單水平的試驗設計，將試雞隨機分為4個組，每個組3個重復，每個重復30只，進行60 d的飼養試驗，試驗1組飼喂基礎日糧（表1），試驗2、3、4組分別在基礎日糧中添加1%的青蒿、1%的青蒿復合添加劑Ⅰ（青蒿、板藍根、魚腥草、陳皮等）及1%的青蒿復合添加劑Ⅱ（青蒿、黃芪、天麻、金銀花等），具體見表2。

1.3 飼養管理 采用圍欄分區散養，每天喂料2次（早晚各1次），試雞自由采食、飲水。試驗期間，按照常規飼養管理，定期清掃圈舍，消毒。

表1 基礎飼糧組成及營養水平

表2 試驗分組情況

1.4 指標測定及方法

1.4.1 腹瀉率、發病率及死亡率 于正式期每天觀察3次（早、中、晚）雞群狀態，詳細記錄雞群腹瀉、發病、死亡等情況。

1.4.2 免疫器官指數 飼養試驗結束后，每個重復選取3只試雞，取免疫器官胸腺、脾臟以及法氏囊等稱重。

1.4.3 血清免疫及抗氧化指標 試驗結束后每個重復選取3只試雞進行翅靜脈采血5 mL，離心分離出血清，分裝于離心管中-20℃條件保存，用于血清免疫及抗氧化指標的測定。所用試劑盒均購自南京建成生物技術有限公司，操作方法嚴格按照試劑盒說明書的步驟進行。

1.5 數據處理 本試驗全部數據都采用Excel 2013進行初步整理分析，應用SAS 9.3軟件中Proc GLM過程進行統計分析。平均值的多重比較采用Duncan’s法進行，差異顯著性水平為P＜0.05。試驗數據以“平均值±標準差”表示。

2 結果與分析

2.1 青蒿及其復合中草藥添加劑對肉雞抗病性能的影響 由表3可知，青蒿及其復合中草藥添加劑都能夠顯著降低散養肉雞的腹瀉率和死亡率（P＜0.05）。試驗2組的腹瀉率和死亡率最低，較試驗1組分別降低了68.31%和85.73%（P＜0.05）。試驗2組和試驗3組的發病率較試驗1組分別降低了42.44%與57.56%（P＜0.05），其中試驗3組的發病率最低。

表3 青蒿及其復合中草藥添加劑對肉雞抗病性能的影響%

表4 青蒿及其復合中草藥添加劑對肉雞免疫器官指數的影響g/kg

2.2 青蒿及其復合中草藥添加劑對肉雞免疫器官指數的影響 由表4可知，試驗2組胸腺指數最高，與試驗1組相比提高了57.29%（P＜0.05）；脾臟指數和法氏囊指數3個中草藥添加組與對照組之間無顯著差異（P＞0.05），但都高于試驗1組。

2.3 青蒿及其復合中草藥添加劑對肉雞血清免疫指標的影響 由表5可知，青蒿及其復合中草藥添加劑能不同程度提高血清中免疫球蛋白和補體C3、C4的含量。其中3個中草藥組IgM的含量較試驗1組分別提高了93.44%、126.23%和106.56%（P＜0.05），IgM含量以試驗3組最高，3個中草藥組之間差異均不顯著（P＞0.05）。IgG含量和IgA含量各組之間差異不顯著（P＞0.05）。對于補體C3含量，3個中草藥組都顯著高于對照組，分別提高了30.82%、41.01%和27.87%（P＜0.05），其中以試驗3組含量最高，試驗2組和4組與其差異不顯著（P＞0.05）。各組之間補體C4的含量差異不顯著（P＞0.05），但都有所提高。

表5 青蒿及其復合中草藥添加劑對肉雞血清免疫指標的影響

2.4 青蒿及其復合中草藥添加劑對肉雞血清抗氧化指標的影響 由表6可知，試驗3組超氧化物歧化酶（SOD）含量最高[（223.48±15.82）U/mL）]，與試驗1組相比提高了17.84%，且差異顯著（P＜0.05），3個中草藥添加組之間差異不顯著（P＞0.05）。谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）含量和丙二醛（MDA）含量各組之間差異不顯著（P＞0.05）。

表6 青蒿及其復合中草藥添加劑對肉雞抗氧化指標的影響 U/mL

3 討論

3.1 青蒿及其復方中草藥添加劑對肉雞抗病性能的影響 研究表明，中草藥作為飼料添加劑具有藥物與營養雙重作用，不僅能提高動物的生產性能，還能防治疾病，增強動物的抗病性能（鮑宇紅等，2016）。有關青蒿在肉雞抗病性能方面的研究鮮見報道。相關研究表明，飼用青蒿復合制劑與小鼠免疫力與抗病性能的增強呈正相關。在小鼠超敏反應和T細胞介導的皮膚炎癥反應試驗中發現，局部給予小鼠青蒿素可有效抑制超敏反應和ConA驅動的T細胞增殖；誘導調節T細胞的產生，達到對相關疾病的治療作用（Li等，2012）。馮文宇（2006）將由中草藥青蒿和金銀花組成的青銀注射液注射進感染病原菌的小鼠體內，研究發現青銀注射液能夠有效抑制或滅殺小鼠體內的致病菌，并能提高小鼠的存活率以及增強其抗病性。金銀花中主要活性成分如綠原酸、黃酮類等能夠提高機體免疫力、抗病性能且具有抑菌、抗病毒的功效，而青蒿因其有效成分如黃酮類、香豆素類和揮發油類等同樣具有抑菌、抗病毒和免疫調節的作用（汪曉河等，2018；王申，2015）。因此，兩者組合而成的青銀注射液對小鼠的健康機能有促進作用。康紅軍（2009）研究表明，在斷奶仔豬的飼糧中分別添加四種青蒿提取物（RY16、RY17、RY18、RY19），與對照組相比，試驗組RY16、RY17、RY18、RY19的總發病率分別降低了27.2%、21.8%、19.8%、6.3%，且RY16、RY17的腹瀉率顯著降低（P＜0.05），表明青蒿提取物具有提高仔豬抗病性能的功效。賈玉剛（2018）通過在藏雞的基礎日糧中分別添加由黃芪、黨參、當歸、甘草等配伍而成的中草藥制劑，發現該復方中草藥制劑能提高試雞的存活率，增強機體免疫機能，接近或達到抗生素的飼用效果，有良好的替抗前景。本試驗結果表明，在試雞日糧中添加青蒿及其復方中草藥制劑均能顯著降低試雞的腹瀉率和死亡率，其中試驗2組的抗病效果最好，說明青蒿及其復方中草藥制劑具有提高散養肉雞抗病性能，降低其死亡率的功效，這與上述的研究結果較為一致。

3.2 青蒿及其復方中草藥添加劑對肉雞免疫器官指數的影響 胸腺、脾臟和法氏囊作為家禽的免疫器官在發揮免疫相關功能中有著極其重要的作用，免疫器官指數是衡量肉雞免疫性能的重要指標（燕磊等，2017）。其重量可反映肉雞的免疫狀況（呂景旭等，1998）。Rivas（1988）認為，雞的免疫性能與其免疫器官重量成正相關關系，免疫器官會因其自身重量的增加而功能增強。青蒿等中草藥中含有很多的免疫活性成分，如有機酸、生物堿、多糖及苷類等，這些活性成分能夠刺激動物的免疫系統并使其活化，增強機體免疫功能。代飛燕（2004）通過白術、干姜、天花粉等配伍而成的復方中草藥制劑添加在試雞的基礎日糧中進行為期42 d的飼養試驗，研究發現與對照組相比，復方中草藥組試雞的免疫器官指數顯著提高（P＜0.05）。帥學宏（2015）為觀察青蒿多糖對免疫抑制小鼠免疫功能的調節作用，用環磷酰胺（Cy）作用于小鼠建立免疫抑制模型，并將4個不同劑量的青蒿多糖對模型小鼠進行腹腔注射，7 d后測定其免疫器官指數，并對其胸腺、脾臟進行組織學觀察，研究發現青蒿多糖可提升免疫抑制小鼠的脾臟指數，且組織學觀察顯示青蒿多糖對Cy引起的脾臟和胸腺的結構損傷具有一定修復作用，表明青蒿多糖具有增強機體免疫功能的作用。本試驗在日糧中添加青蒿及其復方中草藥飼喂肉雞，結果表明肉雞的免疫器官指數均有不同程度的提高，其中試驗2組與試驗1組的胸腺指數相比差異顯著（P＜0.05），說明青蒿及其復方中草藥制劑對肉雞的免疫器官指數有促進作用，這與前人的研究結果一致，其中試驗2組（青蒿組）的綜合效果最好。本試驗中試驗3、4組（青蒿復合I組、青蒿復合II組）相比于試驗1組，肉雞的免疫器官指數有所提高，但差異不顯著（P＞0.05）。馬飛（2011）研究表明，青蒿復合中草藥制劑能顯著提高試雞的免疫器官指數（P＜0.05），這與本試驗中兩個青蒿復合中草藥組的研究結果并不一致，其原因可能與青蒿的配方、添加劑量以及試驗動物所處的生長階段不同有關，有待進一步研究。

3.3 青蒿及其復合中草藥添加劑對肉雞血清免疫和抗氧化指標的影響 血清中免疫與抗氧化指標能直接反映機體的健康狀況。血清中的免疫球蛋白主要有IgG、IgM、IgA等，免疫球蛋白在畜禽機體的體液免疫系統中發揮著極其重要的作用，其含量的高低能反映機體免疫力的強弱（劉輝等，2015）。補體是體液免疫中一些必須經過活化才能產生生物活性的蛋白質，能參與機體的免疫反應。C3和C4作為補體系統的重要組成部分，在動物機體免疫和維持內環境穩定中發揮著重要作用。Guo（2004）研究發現，中草藥提取物能夠改善和修復肉雞的免疫功能，并能刺激試雞使其體液免疫的活力增強。相關研究表明，青蒿口服液能夠提高小鼠體液免疫與細胞免疫功能。林盛裕（2017）通過將松針、仙人掌、辣蓼等配伍而成的復方中草藥提取物添加到廣西麻雞的基礎日糧中，進行為期120 d的飼養試驗，研究發現較對照組，中草藥提取組試雞血清中IgG、IgA、IgM、補體C3和C4的含量顯著提高（P＜0.05），表明中草藥提取物能顯著改善試雞的血清免疫指標，增強機體免疫功能。馬紹偉（2016）通過在河田雞的基礎日糧中添加復方中草藥超微粉，進行為期105 d的飼養試驗，并分別于28、56、105 d采血進行血清免疫指標的測定，結果顯示，復方中草藥超微粉能顯著提高試驗28 d時試雞血清中補體C4和IgM含量（P＜0.05），顯著提高56 d和105 d試雞IgG的含量，表明該中草藥超微粉能提高河田雞的免疫機能。本試驗結果表明，青蒿及其復合中草藥添加劑都能夠不同程度提高試雞血清中免疫球蛋白的含量，其中各中草藥組的IgM含量相比于對照組都顯著提高（P＜0.05），IgG和IgA的含量各組之間差異不顯著（P＞0.05），但中草藥組都有所提高，這與上述的研究結果較為一致，說明青蒿及其復合中草藥在一定程度上能夠增強肉雞的機體免疫功能，有利于雞群的健康狀況。

畜禽機體在代謝時會生成一些對自身不好的氧自由基，具有強氧化性，這些氧自由基會引發生物膜發生脂質過氧化反應，產生如MDA等會對膜蛋白造成損害的終產物，破壞細胞的正常功能，對機體造成損害（Rafalowska，1989）。機體對自由基的清除主要依賴于機體完整的抗氧化防御系統的預防性或阻斷性控制，從而保護機體組織和細胞免受自由基的氧化損傷（霍振華等，2009）。機體的抗氧化指標主要包括MDA、GSH-Px、SOD、CAT與T-AOC（M Szczubial，2004）。許多研究表明，中草藥添加劑能有效提高SOD和GSH-Px等酶的活性，抑制脂質過氧化反應，降低MDA等有害終產物的含量。青蒿中富含養分和抗氧化活性物質，且青蒿中的抗營養因子比例極低，能夠作為飼料添加劑應用于實際生產中。黃金華（2017）研究表明，在廣西靈山土雞的基礎日糧中添加中藥沉香粉能顯著提高試雞的抗氧化能力（P＜0.05）。邱玉朗（2017）在白羽肉雞的基礎日糧中添加復方中草藥添加劑并探究對其對抗氧化指標的影響，發現復方中草藥制劑顯著提高了血液SOD、TAOC和GSH-Px水平（P＜0.05），同時降低了MDA水平（P＜0.05），表明該復方中草藥制劑具有增強試雞機體抗氧化性能的功效。本試驗研究表明，3個中草藥組與對照組相比試雞血清中的GSH-Px與SOD含量不同程度提高，MDA含量降低，其中試驗3組的SOD含量最高，且顯著高于對照組（P＜0.05），說明青蒿及其復合中草藥添加劑可以提高散養肉雞的抗氧化能力，有利于雞群健康生長。本研究中試驗3組（青蒿復合Ⅰ組）的添加效果要優于試驗2組（青蒿組），其原因可能是多成分、多功能的青蒿復方添加劑在配伍之后發生藥效互補，使其效果要好于添加單體青蒿。

4 結論

在日糧中添加青蒿及其復方中草藥添加劑均能不同程度改善和提高散養肉雞的抗病性、免疫器官指數、血清免疫以及抗氧化指標。綜合分析，試驗2組（添加1%青蒿組）對提高散養肉雞抗病以及免疫性能的效果最好。