超高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定全蛋粉中的雙酚A和雙酚S

張 昊,凌映茹,吉文亮,劉華良,朱 峰

(江蘇省疾病預(yù)防控制中心,江蘇南京 210009)

雙酚A(bisphenol A,BPA)是一類典型的環(huán)境激素,在聚碳酸酯塑料行業(yè)以及環(huán)氧樹(shù)脂行業(yè)中應(yīng)用廣泛,BPA可以與多種生理受體(如雌激素受體α/β、雌激素相關(guān)受體γ等)相互作用干擾生物體體內(nèi)激素水平,損害女性子宮、卵巢功能，降低男性精子質(zhì)量、影響嬰幼兒和青春期前期兒童的神經(jīng)發(fā)育、誘發(fā)青春期性早熟、引發(fā)肥胖等[1-2]。2011年我國(guó)衛(wèi)生部等六部門(mén)禁止BPA用于嬰幼兒奶瓶的生產(chǎn)。雙酚S(bisphenol S,BPS)作為BPA的替代物,具有類似于BPA的結(jié)構(gòu)和更強(qiáng)的酸性、穩(wěn)定性。雖然有毒理學(xué)研究表明,低劑量BPS可以影響魚(yú)類[3]和嚙齒類動(dòng)物[4]的內(nèi)分泌系統(tǒng)、影響雌激素分泌、降低繁殖能力、導(dǎo)致肥胖等[2,5],但缺少足夠的生理學(xué)毒理學(xué)證據(jù),目前世界上并沒(méi)有相關(guān)的使用禁令。由于BPA和BPS在食品包裝材料等行業(yè)的廣泛應(yīng)用,在多種食品樣品中存在BPA和BPS檢出,尤其是在豬肉、雞蛋、海鮮、水果等食品樣品中[6]。

雞蛋粉是指鮮蛋經(jīng)過(guò)打蛋、分離、過(guò)濾、均質(zhì)、巴氏殺菌、噴霧干燥而制成的干蛋產(chǎn)品,是蛋類制品的一種。雞蛋粉主要有全蛋粉、蛋黃粉、蛋白粉三種,其中全蛋粉由于其營(yíng)養(yǎng)價(jià)值與鮮雞蛋接近,在使用、運(yùn)輸、儲(chǔ)存方面比鮮雞蛋更為便捷,因此被廣泛使用于蛋糕、餅干、調(diào)味料、油炸食品等掛糊產(chǎn)品的生產(chǎn)過(guò)程中。由于全蛋粉的原料——雞蛋中可能存在BPA和BPS,同時(shí)在全蛋粉的生產(chǎn)、包裝過(guò)程可能存在的污染,均會(huì)使BPA和BPS在全蛋粉中進(jìn)一步積累,使得這兩類物質(zhì)進(jìn)入以全蛋粉為原材料的下游相關(guān)食品中,造成人體對(duì)BPA和BPS的暴露。而目前并沒(méi)有關(guān)于全蛋粉中雙酚類化合物的測(cè)定方法,因此建立相應(yīng)的檢測(cè)方法十分有必要。

目前BPA及其類似物的檢測(cè)方法主要有液相色譜法[7-9]、氣相色譜-質(zhì)譜法[10-11]和液相色譜-質(zhì)譜法[12-16],其中液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法由于其較高的分離效率和靈敏度而被廣泛應(yīng)用。目前對(duì)于食品中BPA和BPS的前處理方式主要集中在固相萃取法(solid phase extraction,SPE)[11-16]。王勝利等使用QuEChERS-SPE法對(duì)于嬰兒配方奶粉進(jìn)行凈化,能夠有效去除奶粉中基質(zhì)對(duì)多種雙酚化合物的干擾[13];張媛媛等使用HLB小柱完成瓶裝水中BPA和BPS的凈化富集,BPA和BPS的平均回收率均高于95%[14];張艷等使用了GCB小柱完成了對(duì)羅非魚(yú)、豬肉罐頭等食品基質(zhì)的凈化,其中BPA和BPS的平均回收率均高于85%[15];曹杰等同樣使用GCB小柱完成了谷物類樣品基質(zhì)的凈化,其中BPA和BPS的平均回收率均高于90%[16]。然而,這些工作并未涉及脂質(zhì)含量高(脂質(zhì)含量>30%)的樣品。與豬肉、雞蛋等食品相比,全蛋粉中脂肪含量≥42%[17],基質(zhì)中脂肪含量高,對(duì)于前處理過(guò)程中去除基質(zhì)、降低基質(zhì)干擾的要求更高,需要建立更為有效、便捷的前處理方法才能保證這類樣品中雙酚類物質(zhì)測(cè)定的準(zhǔn)確性和穩(wěn)定性。

分散系固相萃取-增強(qiáng)性脂質(zhì)基質(zhì)去除(dispersive solid-phase extractions enhanced matrix removal lipid,dSPE-EMR-Lipid)是一種新型脂質(zhì)凈化手段,該方法利用填料表面修飾基團(tuán)的空間結(jié)構(gòu)與脂質(zhì)結(jié)構(gòu)中長(zhǎng)碳鏈存在尺寸排阻作用以及填料與脂質(zhì)結(jié)構(gòu)中長(zhǎng)碳鏈的吸附作用,對(duì)于長(zhǎng)鏈脂質(zhì)有極強(qiáng)的吸附去除效果[18-20]。本文使用dSPE-EMR-Lipid去除樣品中的脂質(zhì)后,使用PRiME HLB小柱進(jìn)一步凈化,建立快速、便捷地測(cè)定全蛋粉中的BPA和BPS的方法。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

全蛋粉 購(gòu)買(mǎi)于超市和網(wǎng)店,總共20份(總共15種不同品牌,其中5種品牌為兩種不同批次);BPA(CAS:80-05-7)、BPS(CAS:80-09-1) 純度>99%,上海TCI公司;BPS-13C12純度>98.0%,加拿大TRC公司;BPA-D4純度>98.0%,美國(guó)C/D/N Isotopes公司;Acquity UPLC BEH C18液相色譜柱(2.1 mm×100 mm,1.7 μm) 美國(guó)Waters公司;乙腈、甲醇、甲酸、丙酮 色譜純,德國(guó)Merk公司;實(shí)驗(yàn)用純水 實(shí)驗(yàn)室自制一級(jí)水;純水 色譜級(jí)，美國(guó)Fisher公司;瓶裝純凈水 浙江娃哈哈公司。

SuperClean GCB/NH2雙層固相萃取柱(GCB 500 mg+NH2500 mg/6 mL)、SuperClean GCB固相萃取柱(500 mg/6 mL) 美國(guó)Supelco公司;Waters PRiME HLB固相萃取柱(200 mg/6 mL) 美國(guó)Waters公司;Bond Elut LRC NH2固相萃取柱(100 mg/10 mL)、Bond Elut EMR-Lipid 美國(guó)Agilent公司;LC-30A超高效液相色譜儀 日本Shimadzu公司;AB Sciex QTRAP 5500質(zhì)譜儀 美國(guó)AB Sceix公司;臺(tái)式離心機(jī) 德國(guó)Sigma公司;氮吹儀 美國(guó)Organomation公司;Vortex-6渦旋混合器 江蘇其林貝爾公司。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 標(biāo)準(zhǔn)品及同位素內(nèi)標(biāo)溶液配制

1.2.1.1 標(biāo)準(zhǔn)品溶液配制 分別準(zhǔn)確稱取BPA、BPS標(biāo)準(zhǔn)品 10 mg(精確至0.1 mg)至10 mL容量瓶中,甲醇溶解并定容至刻度,配制成1000 mg/L的單一標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液。準(zhǔn)確移取適量的BPA、BPS單一標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液至10 mL容量瓶中,使用甲醇-水(v∶v=1∶4)稀釋配制成質(zhì)量濃度BPA 1.0 mg/L,BPS 0.4 mg/L混合標(biāo)準(zhǔn)使用液。

1.2.1.2 同位素內(nèi)標(biāo)溶液配制 分別準(zhǔn)確稱取同位素內(nèi)標(biāo)BPA-D4、BPS-13C1210 mg(精確至0.1 mg)至10 mL容量瓶中,甲醇溶解并定容至刻度,配制成1000 mg/L的單一同位素內(nèi)標(biāo)儲(chǔ)備液。準(zhǔn)確移取適量的BPA-D4、BPS-13C12同位素內(nèi)標(biāo)儲(chǔ)備液至10 mL容量瓶中,使用甲醇-水(v∶v=1∶4)稀釋配制成質(zhì)量濃度為BPA-D40.5 mg/L,BPS-13C120.1 mg/L的混合內(nèi)標(biāo)使用液。

1.2.2 樣品前處理

1.2.2.1 樣品提取 稱取混勻后的樣品1.0 g置于15 mL離心管中,加入3 mL水,渦旋混勻,加入50 μL混合內(nèi)標(biāo)使用液和5 mL乙腈,渦旋混勻后超聲提取30 min,9000 r/min離心10 min,上清液全部轉(zhuǎn)移至裝有1 g已活化的dSPE-Lipid-EMR的50 mL離心管中(EMR-Lipid 使用前加入5 mL水進(jìn)行活化),渦旋1 min,12000 r/min離心5 min,所得上清液用純水稀釋至25 mL,加入50 μL甲酸,充分搖勻后,12000 r/min離心5 min,將上清液轉(zhuǎn)移至另一個(gè)干凈的50 mL離心管,待凈化。

1.2.2.2 凈化 將所得上清液使用PRiME HLB柱(使用前依次用18 mL甲醇和6 mL水活化)上樣,棄去濾液,分別使用6 mL水、6 mL甲醇-水溶液(v∶v=1∶1)淋洗,待淋洗液完全通過(guò)柱床后用洗耳球吹干柱床中的液體,用6 mL甲醇-丙酮(v∶v=4∶1)洗脫,洗脫液用氮?dú)獯抵两?。? mL甲醇-水(v∶v=1∶4)溶解殘?jiān)?待LC-MS/MS測(cè)定。

空白實(shí)驗(yàn):使用純水代替樣品,使用與樣品相同的前處理得到實(shí)驗(yàn)的過(guò)程空白值。

1.2.3 實(shí)驗(yàn)用水的選擇 本實(shí)驗(yàn)考察了Fisher牌色譜級(jí)純水、娃哈哈牌純凈水和實(shí)驗(yàn)室自制一級(jí)純水中BPA和BPS的本底值。使用4 mL上述三種純水分別按1.2.2中空白實(shí)驗(yàn)進(jìn)行富集,上機(jī)測(cè)定。選擇本底值低、成本低、易獲得的純水作為實(shí)驗(yàn)用水。

1.2.4 樣品除脂凈化手段的選擇 考察了不同凈化手段對(duì)基質(zhì)的凈化效果和對(duì)加標(biāo)模擬樣品的回收效果。使用加標(biāo)水平為BPA 5 μg/kg、BPS 2 μg/kg的全蛋粉模擬樣品,比較不同除脂方式與GCB小柱協(xié)同處理(正己烷萃取后使用GCB小柱凈化、冷凍(-20 ℃,2 h),除脂后使用GCB小柱凈化、使用GCB/NH2雙層SPE小柱凈化、先使用GCB小柱凈化后洗脫液使用LRC NH2小柱凈化)和EMR-Lipid與不同SPE小柱協(xié)同處理(EMR-Lipid除脂后使用GCB小柱凈化、EMR-Lipid除脂后使用PRiME HLB小柱凈化、EMR-Lipid除脂后使用PPL小柱凈化)對(duì)于模擬樣品提取液的處理效果,根據(jù)不同手段的回收率高低和前處理過(guò)程需要的時(shí)間長(zhǎng)短選擇合適的樣品前處理手段。

1.2.5 色譜條件 色譜柱 Acquity UPLC BEH C18(100 mm×2.1 mm,1.7 μm);柱溫:35 ℃;樣品室溫度:4 ℃;流速:0.3 mL/min;流動(dòng)相 A:甲醇;流動(dòng)相B:水,具體流動(dòng)相洗脫程序見(jiàn)表1;進(jìn)樣量:5 μL。本文考察了甲醇-0.1%甲酸水;甲醇-水;甲醇-0.1%氨水;乙腈-水;甲醇/乙腈(v∶v=4∶1)-水;甲醇/乙腈(v∶v=2∶1)-水;甲醇/乙腈(v∶v=1∶1)-水;甲醇/乙腈(v∶v=1∶2)-水;甲醇/乙腈(v∶v=1∶4)-水作為流動(dòng)相時(shí)對(duì)各種物質(zhì)峰型和分離度的影響。

表1 流動(dòng)相梯度洗脫程序Table 1 Gradient elution program for mobile phase

1.2.6 質(zhì)譜條件 離子源:ESI(-);噴霧電壓4.5 kV;源溫550 ℃;氣簾氣壓:40 psi;霧化氣壓:65 psi;干燥氣壓:65 psi;多反應(yīng)監(jiān)測(cè)掃描模式(MRM)進(jìn)行采集,目標(biāo)離子質(zhì)譜參數(shù)見(jiàn)表2。

表2 BPA和BPS及相應(yīng)同位素內(nèi)標(biāo)的質(zhì)譜參數(shù)Table 2 Mass spectrometry parameters for the BPA,BPS and corresponding isotope internal standards

1.2.7 線性方程、檢出限及定量限 實(shí)驗(yàn)使用混合標(biāo)準(zhǔn)使用液和混合內(nèi)標(biāo)使用液配制相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)曲線系列:BPA 1、2、5、10、20、50 μg/L,BPS 0.4、0.8、2、4、8、20 μg/L,同位素內(nèi)標(biāo)濃度:BPA-D425.0 μg/L,BPS-13C125 μg/L,使用1.2.5及1.2.6中色譜條件與質(zhì)譜條件進(jìn)行測(cè)定,以標(biāo)準(zhǔn)品峰面積和內(nèi)標(biāo)峰面積Ai/Ais為縱坐標(biāo),標(biāo)準(zhǔn)品濃度Ci為橫坐標(biāo)做標(biāo)準(zhǔn)曲線。根據(jù)3倍信噪比(S/N=3)和10倍信噪比(S/N=10)確定儀器的檢出限和定量限。

1.2.8 回收率實(shí)驗(yàn) 對(duì)低本底值的全蛋粉添加三個(gè)濃度水平:5、20、40 μg/kg(BPA),2、8、16 μg/kg(BPS),使用優(yōu)化后的前處理手段平行測(cè)定六次,計(jì)算日內(nèi)相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差,連續(xù)三天,每天平行測(cè)定6次,計(jì)算其日間相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差。

1.2.9 實(shí)際樣品檢測(cè) 本實(shí)驗(yàn)對(duì)20份從超市和網(wǎng)店購(gòu)買(mǎi)的全蛋粉進(jìn)行檢測(cè),驗(yàn)證方法的可靠性和適應(yīng)性。

1.3 數(shù)據(jù)處理

使用Analyst和MultiQuantTM軟件(美國(guó)AB SCIEX公司)采集數(shù)據(jù)并積分,使用Origin 9.0(美國(guó)Origin Lab公司)作圖,使用Microsoft Excel 2010(美國(guó)微軟公司)進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析。

2 結(jié)果與討論

2.1 實(shí)驗(yàn)用水的選擇

BPA和BPS在環(huán)境中分布廣泛,可通過(guò)生產(chǎn)途徑進(jìn)入相關(guān)實(shí)驗(yàn)耗材中,如果實(shí)驗(yàn)中使用的水的BPA和BPS本底值過(guò)高,會(huì)對(duì)測(cè)定結(jié)果造成影響。通過(guò)空白實(shí)驗(yàn)比較了Fisher牌色譜級(jí)純水、實(shí)驗(yàn)室自制一級(jí)水和娃哈哈牌瓶裝純凈水中BPA和BPS的含量。結(jié)果顯示,Fisher牌色譜級(jí)純水、實(shí)驗(yàn)室自制一級(jí)水以及娃哈哈牌瓶裝純凈水的BPA含量分別為0.37、0.45、2.30 μg/L,BPS含量為0.07、0.08、0.11 μg/L。三種水樣在BPS的含量十分接近,但娃哈哈牌純凈水BPA含量相對(duì)較高,不適合在本實(shí)驗(yàn)中使用,實(shí)驗(yàn)室自制一級(jí)水與Fisher牌色譜級(jí)純水在BPA和BPS的含量上接近,考慮到成本問(wèn)題,因此選擇實(shí)驗(yàn)室自制一級(jí)水作為實(shí)驗(yàn)用水。

2.2 樣品除脂凈化手段的選擇

參考文獻(xiàn)[15-16]中單純使用GCB小柱對(duì)模擬雞蛋粉樣品凈化后出現(xiàn)以下問(wèn)題:a、復(fù)溶后樣品溶液渾濁,使用高速離心后無(wú)改善;b、使用該樣品溶液連續(xù)進(jìn)樣后,出現(xiàn)前后針進(jìn)樣BPA信號(hào)響應(yīng)明顯不同的現(xiàn)象;c、連續(xù)多針進(jìn)樣后BPA和BPS的保留時(shí)間發(fā)生漂移,且信號(hào)響應(yīng)減弱。這說(shuō)明單獨(dú)使用GCB小柱無(wú)法有效凈化雞蛋粉中的基質(zhì),因此本文考察了不同的脂質(zhì)去除手段和不同填料類型SPE小柱協(xié)同凈化對(duì)雞蛋粉中基質(zhì)的凈化效果。

使用不同的除脂手段與不同類型SPE小柱協(xié)同凈化的具體結(jié)果見(jiàn)表3。結(jié)果顯示,正己烷萃取后使用GCB小柱凈化、GCB/NH2雙層小柱凈化、EMR-Lipid除脂后使用PPL小柱凈化在BPA的回收率上高于80%,但BPS的回收率低于70%,冷凍除脂后使用GCB小柱凈化在兩個(gè)化物的回收率均低于70%,GCB小柱與LRC NH2小柱協(xié)同凈化和EMR-Lipid與GCB小柱協(xié)同凈化、EMR-Lipid與PRiME HLB小柱協(xié)同凈化在兩個(gè)化物的回收率上均高于80%,但是EMR-Lipid與GCB小柱協(xié)同凈化后BPA的基質(zhì)抑制仍然比較嚴(yán)重,同位素內(nèi)標(biāo)BPA-D4的信號(hào)抑制達(dá)到50%以上,增加EMR粉末使用量也無(wú)法改善,這說(shuō)明造成抑制的并非基質(zhì)中的脂質(zhì)。推斷出現(xiàn)該情況的原因可能是GCB小柱填料為片狀結(jié)構(gòu)的石墨化炭黑,帶有芳香性的正六元環(huán)結(jié)構(gòu),且呈正電性,具備反相和離子交換雙重保留機(jī)制,既能保留非極性化合物,也能保留強(qiáng)極性化合物[21]。正由于這種強(qiáng)吸附能力,導(dǎo)致被吸附在固相萃取小柱上的一部分基質(zhì)無(wú)法通過(guò)選擇性淋洗去除,最后隨洗脫液洗脫下來(lái)。PRiME HLB柱由于其填料的選擇性保留可對(duì)多種基質(zhì)通過(guò)選擇性淋洗有效去除,從而降低基質(zhì)抑制。使用GCB小柱與LRC NH2小柱協(xié)同凈化操作復(fù)雜(LRC NH2需要將GCB小柱凈化后的洗脫液,通過(guò)活化后的LRC NH2小柱才能完成除脂操作),整個(gè)凈化過(guò)程需要40～50 min,而EMR-Lipid與PRiME HLB小柱協(xié)同凈化操作簡(jiǎn)單(EMR-Lipid只需要兩次離心便能完成除脂操作,并且該除脂操作在PRiME HLB 小柱凈化操作前),整個(gè)凈化過(guò)程耗時(shí)為25～30 min。考慮到EMR-Lipid除脂消耗時(shí)間更短,因此將EMR-Lipid與PRiME HLB協(xié)同凈化作為本方法的前處理方式。

表3 不同除脂方法的回收率結(jié)果Table 3 Recoveries of the different removal methods of lipid

2.3 色譜條件的優(yōu)化

2.3.1 流動(dòng)相的選擇 雙酚類化合物自身結(jié)構(gòu)中具有酚羥基,流動(dòng)相的酸堿度對(duì)于雙酚類物質(zhì)的電離效果有不同的影響。首先考察了以甲醇作為有機(jī)相時(shí),不同酸度水相(0.1%甲酸水、水、0.1%氨水)對(duì)于BPA和BPS的峰型及分離情況,以純水為水相時(shí)BPA和BPS的信號(hào)強(qiáng)度作為參考標(biāo)準(zhǔn)。使用0.1%甲酸溶液時(shí),兩個(gè)化合物信號(hào)基本消失,可能是因?yàn)槭琴|(zhì)子會(huì)抑制兩個(gè)化合物在離子源中的電離;使用0.1%氨水溶液時(shí),BPA的信號(hào)增強(qiáng)了50%,然而B(niǎo)PS的信號(hào)響應(yīng)降為原先的50%,但考慮到BPS屬于樣品中含量較低的目標(biāo)物,需要更高的靈敏度,0.1%氨水不適合作為水相。因此只能選擇純水作為水相。

隨后考察了以純水作為水相,比較甲醇、乙腈以及甲醇/乙腈混合溶劑(v∶v=4∶1、2∶1、1∶1、1∶2、1∶4)對(duì)BPA和BPS響應(yīng)信號(hào)的影響。以甲醇為有機(jī)相時(shí),BPA和BPS的信號(hào)強(qiáng)度作為參考標(biāo)準(zhǔn)。使用乙腈時(shí),BPA的信號(hào)響應(yīng)明顯增強(qiáng),但是在目標(biāo)信號(hào)峰附近存在干擾峰;使用甲醇/乙腈的混合溶劑(v∶v=4∶1、2∶1、1∶1、1∶2、1∶4)對(duì)兩個(gè)化合物的信號(hào)響應(yīng)并沒(méi)有提高,因此選用純水和甲醇作為方法流動(dòng)相。

2.3.2 色譜柱的選擇 考察了BEH C18柱(100 mm×2.1 mm,1.7 μm)和T3柱(100 mm×2.1 mm,1.8 μm)對(duì)于BPA和BPS的色譜分離情況。兩類色譜柱均能給出對(duì)稱性良好的峰型,但BEH C18柱作為分析柱時(shí)峰型更為尖銳,因此選擇BEH C18柱作為分析柱。該色譜條件優(yōu)化結(jié)果與文獻(xiàn)報(bào)道的結(jié)果相符[15-16],標(biāo)準(zhǔn)品中BPA、BPS及其同位素內(nèi)標(biāo)的提取離子流圖見(jiàn)圖1。

圖1 BPA和BPS及相應(yīng)同位素內(nèi)標(biāo)的提取離子流圖Fig.1 Extracted ion chromatogram of BPA,BPS and corresponding isotope internal standards注:A:BPA 20 μg/L;B:BPA-D4 25 μg/L;C:BPS 8 μg/L;D:BPS-13C12 5 μg/L。

2.4 線性范圍、檢出限及定量限

如表4所示,BPA和BPS在各自質(zhì)量濃度范圍內(nèi)線性良好。根據(jù)3倍信噪比(S/N=3)和10倍信噪比(S/N=10)確定儀器的檢出限和定量限,可以得到BPA的檢出限為0.3 μg/kg,定量限為1.0 μg/kg,BPS的檢出限為0.1 μg/kg,定量限為0.3 μg/kg。

表4 兩種化合物的線性方程,線性范圍,相關(guān)系數(shù),檢出限,定量限Table 4 Linear equitation,linear range,correlation coefficient,LOD and LOQ of two compounds

2.5 加標(biāo)回收率和精密度

表5的結(jié)果顯示,BPA在三個(gè)加標(biāo)水平的回收率為98.8%～105%,RSD日內(nèi)為3.84%～8.58%,RSD日間為5.65%～8.74%;在三個(gè)加標(biāo)水平BPS的回收率為98.5%～102.5%,RSD日內(nèi)為3.01%～7.86%,RSD日間為3.18%～7.03%。BPA和BPS的回收率均高于95%,日內(nèi)相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差和日間相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差均小于10%,說(shuō)明本方法具有較高的回收率、精密度和穩(wěn)定性。

表5 不同加標(biāo)水平的回收率及日內(nèi)相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(n=6)和日間相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(n=3)Table 5 Recovery,intra-day relative standard deviation(n=6) and inter-day relative standard deviation(n=3)for different spiked level

2.6 樣品測(cè)定結(jié)果

使用優(yōu)化好的樣品前處理方法和儀器條件對(duì)20份購(gòu)于商店或網(wǎng)店的全蛋粉進(jìn)行檢測(cè),結(jié)果顯示BPA和BPS在20份樣品中均有檢出,其中BPA含量為2.4～3.8 μg/kg;BPS含量為0.45～0.82 μg/kg。但檢出值均未超過(guò)GB9685-2016《食品接觸材料及制品添加劑使用標(biāo)準(zhǔn)》[22]中規(guī)定的特定遷移限量(SML)(BPA的SML為0.6 mg/kg,BPS為0.05 mg/kg)。

3 結(jié)論

本文針對(duì)全蛋粉中脂質(zhì)含量較高(脂質(zhì)含量>30%)的特點(diǎn),使用dSPE EMR-Lipid這種對(duì)于直鏈脂質(zhì)有特異性去除的材料有效降低了因脂質(zhì)造成的基質(zhì)抑制,結(jié)合PRiME HLB小柱對(duì)于其他基質(zhì)的選擇性去除進(jìn)一步降低了基質(zhì)對(duì)于BPA和BPS測(cè)定的干擾。方法具有良好的線性(相關(guān)系數(shù)均大于0.999),目標(biāo)化合物的平均回收率均大于98%,日間相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差和日內(nèi)相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差均小于10%,前處理操作簡(jiǎn)便,可以用于雞蛋粉中BPA和BPS的食品安全風(fēng)險(xiǎn)監(jiān)測(cè)工作。