微柱凝膠技術應用于臨床輸血檢驗中的效果及優勢

林曉霞，龐文英，陸慧

（廣東醫科大學附屬醫院 檢驗科，廣東 湛江 524001）

0 引言

輸血檢驗就是指將健康的血液輸入到病人體內，用以增加血量，改善病人體內血液循環的一種方式，但在輸血之前，一定要將供血者與受血者各自的血液進行血型鑒定，經過交叉試驗，無凝血現象，才可以進行輸血[1-2]。本文將結合對微柱凝膠技術應用于臨床輸血檢驗所產生的效果以及所具有的優勢進行研究與分析，詳情見于下文。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2018 年1 月至12 月于我院申請懸浮紅細胞治療的患者320 例作為研究對象，其中男性178 例，女性142 例，年齡為17～79 歲，平均（49.52±5.17）歲。用兩種方法做交叉配血，同時做不規則抗體測定。卡氏微柱凝膠法進行交叉配血試驗為觀察組，用凝聚胺法交叉配血作為對照組，所有患者均自愿參與本研究。

1.2 方法

對照組采用凝聚胺配血，將供血者與受血者的紅細胞放于生理鹽水當中，制備細胞懸液；取試管2根，分別做主側、次側的標記，在主側孔內加入受檢者血清25 μL 以及供血者的2 %細胞懸液50 μL；在次側孔內加入受檢者血清25 μL 以及受血者的3 %細胞懸液50 μL；加0.6 mL 低離子介質溶液于管中，混勻靜置1 min，加兩滴凝聚胺于管中，混勻靜置，離心1 min，只保留管底的0.1 mL 液體。

觀察組患者采用卡氏微柱凝膠法交叉配血，將供血者與受血者的紅細胞放于生理鹽水當中，制備細胞懸液；取一個凝膠卡，記錄患者姓名，并在凝膠卡寫上主側、次側以及自身，填完資料之后撕開凝膠卡封條；在主側孔內加入供血者的1 %細胞懸液50 μL，受檢者血清25 μL；在次側孔內加入受血者的1%細胞懸液50 μL，受檢者血清25 μL；在自身對照孔內加入1 %細胞懸液50 μL，受檢者血清25 μL，將相應物質放置于37 ℃的環境內孵育15 min；采用臨床專用離心機離心9 min。

1.3 觀察標準

凝聚胺配血觀察有無紅細胞凝塊，其中1 min 內散開為凝聚胺引起的非免疫性凝集結果，實驗結果匹配；1 min 內未散開的為異體抗體引起的免疫性凝集結果，實驗結果不匹配。

卡氏微柱凝膠法其中陰性顯示:100 %的紅細胞在凝膠卡的底部；+/-顯示:100 %的紅細胞在凝膠卡的下1/3；+顯示:80 %紅細胞在凝膠卡的下2/3；++顯示:80 %紅細胞在凝膠卡的上2/3；+++顯示:80 %紅細胞在凝膠卡的上1/3；++++顯示:全部紅細胞都在凝膠卡的頂部。

DP:凝膠管頂部有部分紅細胞，底部有部分沉淀；PH:凝膠管內液體透明，以及少量紅細胞殘留；H:凝膠管內液體透明，無紅細胞殘留。

1.4 統計學方法

將數據納入SPSS 17.0 軟件中分析。計量資料用均數±標準差（±s）表示，計數資料用率（%）表示，采用t和χ2檢驗，以P＜0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

兩種不同交叉配血方法結果，卡氏微柱凝膠法交叉配血患者出現主側凝集12 例，次側凝集3 例；凝聚胺法交叉配血患者出現主側凝集8 例，次側凝集3 例。凝聚胺法交叉配血不合的11 例患者用卡氏微柱凝膠法交叉配血也不合。做不規則抗體測定，12 例患者及3 例獻血者有不規則抗體的存在，與卡氏微柱凝膠法交叉配血結果相符，結果如下表1所示。

表1 兩種不同交叉配血方法對不規則抗體檢出率比較（n,%）

兩種不同交叉配血方法對不規則抗體檢出率比較差異有統計學意義（P＜0.05）。

3 討論

微柱凝膠技術，是由1990 年法國最先提出以及介紹的免疫學檢測技術，即將抗原抗體反應與凝膠分子篩技術相結合的微柱凝膠免疫試驗[3]。微柱凝膠的實質為血凝試驗，即是紅細胞抗原抗體，在微柱腔內的凝膠介質中發生的免疫凝集反應，是將液相技術與固相技術、凝膠過濾技術、離心技術、紅細胞凝集試驗技術進行結合，并通過對凝膠種類的選擇以及濃度的調節來控制分子篩孔徑大小，使分子篩只能允許游離紅細胞通過，達到分辨凝集紅細胞和非凝集紅細胞的目的，同時也是目前最易大規模推廣、最適用于常規試驗的血型血清學試驗技術[4-6]。

聚凝技術是能夠用于交叉配血當中，同時可對免疫抗體IgG 的能力進行檢測的技術，其應用原理即首先利用地理中介質降低溶液的例子強度，減少紅細胞周圍的陽離子，從而促進血清中抗體以及紅細胞相應的抗原結合，再加入聚凝胺溶液，從而起到中和紅細胞表面負電荷的作用，形成可逆的而非特性聚集現象，并使得IgG 抗體直接凝集紅細胞。具有快速簡便、特異性強、重復性好以及靈敏度較強的特點，還會用于對一些不完全抗體的檢測，但結合臨床使用效果觀察，聚凝胺容易受到冷凝素以及肝素等的影響，且如果實驗中所用的試管、滴管吸頭以及玻片等未滿足清潔干燥要求，也容易出現融血現象。同時還容易受到人為因素的影響，對于一些Rh 血型存在漏檢的情況，同時不同廠家以及不同批次的聚凝胺之間也存在著較大的個體差異[7]。本研究結果顯示，用凝聚胺法交叉配血對不規則抗體檢出率只有73.3 %。容易漏檢，有一定的安全隱患。

微柱凝膠技術在臨床可用作對ABO 的血型檢驗，也能夠用于Rh 血型抗原檢測、HDN 檢測、血小板抗體篩檢與交叉配血，同時也可以用作于本次實驗當中的不規則篩體檢查與交叉配血[8]。結合本次實驗結果，微柱凝膠技術在應用于臨床檢驗時，具有簡單易操作、無需洗滌、無需對陰性結果進行確證實驗以及標本的用量少、結果留存時間長，敏感性和準確率高，不易受人為因素的干擾，結果更符合標準化要求易于判讀以及操作更加安全可靠等的優點。本次實驗結果卡氏微柱凝膠法交叉配血對不規則抗體檢出率達100 %。但其不足之處就是對比傳統輸血檢驗方法，成本要更高一點，同時檢驗時間要稍長一點，因此當有緊急輸血狀況時，微柱凝膠技術相對傳統方式而言不占優勢[9]。

臨床在對微柱凝膠技術應用時，一定要求嚴格按照規范化進行操作，以排除人為因素對于實驗結果的影響，同時準備采集標本一定要嚴格按照采集標準，避免溶血以及纖維蛋白等對結果造成影響[10-11]。交叉配血則是將供血者與受血者的紅細胞抗原作為主側，供血者與受血者的紅細胞血清抗體作為次側。而其中的不完全抗體，則要依據間接試驗用以檢測和觀察其血凝結果，并且一定要采用標準化加樣。正確的交叉配血結果一般會取決于血液樣本的正確率,從而排除由于人為因素、操作失誤以及供血者血液不合格等對于交叉配血的影響[12]。

結合本次實驗研究結果，在微柱凝膠管內，當機體的紅細胞與相應抗體相結合后，會形成紅細胞凝集團塊[13]。而在一定的離心力作用之下，紅細胞凝集團塊可位于凝膠的表面或者凝膠的上部或下部當中。但如果紅細胞未能夠與相應抗體相結合，仍舊是分散的紅細胞，此時經歷離心力作用，紅細胞就會沉降至微膠管的底部[14]。

綜上所述，將微柱凝膠技術應用于臨床輸血檢驗中具有良好的檢查效果，也不易受到其他因素的影響，特異性較高，因此可以用作臨床進行輸血檢驗的首選[15]。