Cu2+和Zn2+對翅堿蓬種子萌發(fā)及幼苗滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)的影響

趙玥茹 蔡恒江 張靖凡 陳文翰 劉遠 陳淼

摘要[目的]探討重金屬脅迫對翅堿蓬種子萌發(fā)及幼苗的影響。[方法]利用不同梯度的Cu2+和Zn2+溶液進行水培試驗，測定翅堿蓬種子萌發(fā)和幼苗滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)含量的變化。[結(jié)果]翅堿蓬種子的總發(fā)芽率和萌發(fā)速率在較低濃度（50 mg/L）Cu2+脅迫下會上升，而在較高濃度（100、200 mg/L）Cu2+脅迫下會下降;Zn2+脅迫對種子的總發(fā)芽率和萌發(fā)速率均會產(chǎn)生明顯的抑制。Cu2+和Zn2+脅迫會使幼苗可溶性蛋白、可溶性糖和游離脯氨酸含量明顯升高。[結(jié)論]Cu2+和Zn2+脅迫會影響翅堿蓬種子的萌發(fā)，導(dǎo)致幼苗的滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)升高。

關(guān)鍵詞 翅堿蓬;重金屬;種子萌發(fā);滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)

中圖分類號 Q945.78文獻標(biāo)識碼 A

文章編號 0517-6611（2019）15-0045-03

doi：10.3969/j.issn.0517-6611.2019.15.014

開放科學(xué)（資源服務(wù)）標(biāo)識碼（OSID）：

Abstract[Objective]The effects of heavy metal stress on seed germination and seedlings of Suaeda heteroptera were studied.[Method]The changes of seed germination and osmotic adjustment substances in seedling were measured under different gradients of Cu2+ and Zn2+ solutions by water culture test.[Result]The total germination percent and germination rate of S. heteroptera seeds were increased under low Cu2+ concentration （50 mg/L）， but decreased under higher Cu2+ concentration （100， 200 mg/L）. Zn2+ stress could inhibit the total germination percent and germination rate of S. heteroptera seeds. The contents of soluble protein， soluble sugar and free proline in seedlings were increased under Cu2+ and Zn2+ stress.[Conclusion]Cu2+ and Zn2+ could affect the germination of S. heteroptera seeds and increased osmotic adjustment substances of S. heteroptera seedlings.

Key words Suaeda heteroptera Kitagawa;Heavy metal;Seed germination;Osmotic adjustment substances

基金項目 國家自然科學(xué)基金項目（41306104）;盤錦紅海灘濕地退化及生態(tài)修復(fù)項目（PHL-XZ-2017013-002）。

作者簡介 趙玥茹（1991—），女，遼寧本溪人，碩士研究生，研究方向：海洋生態(tài)學(xué)。*通信作者，副教授，從事海洋生態(tài)學(xué)研究。

收稿日期 2019-03-12

河口濕地是河水與海水相遇并混合的區(qū)域，在環(huán)境調(diào)控、維持生態(tài)系統(tǒng)平衡和保障生態(tài)系統(tǒng)可持續(xù)發(fā)展中起著無法替代的作用[1]。然而，陸源污染物也會大量輸入?yún)R集于此，污染相對嚴(yán)重。在這些污染物中，重金屬具有來源廣、難降解、易富集等特征，對生態(tài)系統(tǒng)健康存在較大負(fù)面影響[2-3]。遼河口濕地位于遼河、大遼河入海口交匯處，受重金屬污染較為嚴(yán)重。研究表明，Cu、Zn這2種元素在遼河口濕地沉積物中含量較高，最高分別可達108.2、207.7 μg/g[4]。

翅堿蓬（Suaeda heteroptera Kitagawa）是藜科堿蓬屬一年生草本植物，它耐鹽、耐淹，是遼河口濕地最為典型的濕地灘涂植被。近年來，翅堿蓬出現(xiàn)了不明原因的大面積死亡，濕地灘涂大面積退化裸露，生物多樣性銳減，對濕地生態(tài)系統(tǒng)造成了嚴(yán)重的威脅[5-6]。翅堿蓬死亡原因較為復(fù)雜，其中重金屬污染會對其生長產(chǎn)生影響[7]，是死亡的潛在原因之一。研究表明，在重金屬脅迫下，植物體內(nèi)的生理生化代謝會發(fā)生紊亂，導(dǎo)致植物抗逆性降低，嚴(yán)重時造成植株死亡[8]。以翅堿蓬為材料，研究重金屬Cu2+和Zn2+脅迫對翅堿蓬種子萌發(fā)及幼苗滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)的影響，為探尋濕地退化原因和機理提供參考。

1 材料與方法

1.1 翅堿蓬種子及藥品

試驗所用翅堿蓬種子采集于遼河口濕地。挑選飽滿的種子放入10%NaClO溶液中浸泡15 min后用蒸餾水淋洗，風(fēng)干后進行試驗。

CuSO4和ZnSO4溶于蒸餾水中分別配制成1.00 g/L的 Cu2+和Zn2+母液，用時逐級進行稀釋。

1.2 方法

試驗在底部鋪有3層紗布的500 mL燒杯中進行，取50粒翅堿蓬種子均勻置于燒杯的底部，再加入20 mL不同濃度梯度重金屬溶液后用封口膜密封燒杯進行水培試驗。Cu2+ 和Zn2+濃度梯度為0（對照）、50、100、200 mg/L，試驗設(shè)5個平行樣，共進行7 d，培養(yǎng)溫度為（25±1）℃，光照強度1 500 lx，光暗周期12 h∶12 h。

1.3 種子萌發(fā)的測定

每天記錄種子的發(fā)芽數(shù)，胚根突破種皮1 mm視為發(fā)芽。

總發(fā)芽率=發(fā)芽數(shù)/50×100%;

萌發(fā)速率=N1×1+（N2-N1）×1/2+（N3-N2）×1/3+…+（Nn-Nn-1）×1/n，式中，N為第1，2，…，n天發(fā)芽種子的百分率[9]。

1.4 滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)含量的測定

試驗進行7 d后，用鑷子把幼苗輕輕夾出，放入蒸餾水中漂洗，并用濾紙輕輕吸干后進行滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)含量的測定。可溶性蛋白含量參照Bradford的方法測定[10];可溶性糖含量采用蒽酮比色法測定[11];游離脯氨酸含量采用茚三酮比色法測定[12]。

1.5 數(shù)據(jù)處理

采用SPSS 11.0進行數(shù)據(jù)處理及統(tǒng)計分析，用One-way ANOVA進行差異顯著性分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 Cu2+和Zn2+對翅堿蓬種子萌發(fā)的影響

從圖1可以看出，當(dāng)Cu2+濃度較低（50 mg/L）時，翅堿蓬種子總發(fā)芽率升高，但并不明顯（P>0.05）;當(dāng)Cu2+濃度較高（100、200 mg/L）時，翅堿蓬種子總發(fā)芽率會明顯降低（P<0.05），分別較對照降低了8.32百分點和17.22百分點。從圖2可以看出，Zn2+會使翅堿蓬種子總發(fā)芽率明顯降低（P<0.05），隨著Zn2+濃度升高，總發(fā)芽率降低得愈加明顯，Zn2+濃度分別為50、100、200 mg/L時，翅堿蓬種子總發(fā)芽率分別降低了11.32百分點、15.02百分點和26.42百分點。

2.2 Cu2+和Zn2+對翅堿蓬幼苗可溶性蛋白含量的影響

從圖5、6可以看出，Cu2+和Zn2+對翅堿蓬幼苗可溶性蛋白含量有明顯的影響，幼苗可溶性蛋白含量會有不同程度的升高。Cu2+濃度為50、100、200 mg/L時，幼苗可溶性蛋白含量分別升高了2.24%、6.49%和6.85%;Zn2+濃度為50、100、200 mg/L時，幼苗可溶性蛋白含量分別升高了3.71%、572%和4.88%。可溶性蛋白是植物重要的滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)之一，重金屬能夠促進絡(luò)合蛋白的產(chǎn)生，降低對植物的毒害，這可能是植物抵抗重金屬脅迫的一種解毒機制[12]。

2.3 Cu2+和Zn2+對翅堿蓬幼苗可溶性糖含量的影響

從圖7、8可以看出，Cu2+和Zn2+會使翅堿蓬幼苗可溶性糖含量升高。當(dāng)Cu2+濃度為200 mg/L時，幼苗可溶性糖含量達到最高，升高了5.57%;Zn2+濃度為100 mg/L時，幼苗可溶性糖含量達到最高，升高了6.42%。可溶性糖是植物的滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)之一，它的升高會提高幼苗對重金屬脅迫的耐受能力。

2.4 Cu2+和Zn2+對翅堿蓬幼苗游離脯氨酸含量的影響

從圖9、10可以看出，Cu2+和Zn2+對翅堿蓬幼苗游離脯氨酸含量有明顯的影響，幼苗游離脯氨酸含量會有不同程度的升高。Cu2+濃度為50、100、200 mg/L時，幼苗游離脯氨酸含量分別升高了44.10%、89.15%和90.91%;Zn2+濃度為50、100、200 mg/L時，幼苗游離脯氨酸含量分別升高了32.51%、8706%和97.45%。在重金屬脅迫條件下，由于有機體的氨基酸代謝發(fā)生改變，所以植物會在體內(nèi)積累大量脯氨酸[13]，從而使幼苗的抗氧化能力增強。

3 結(jié)論與討論

較低濃度（50 mg/L）的Cu2+會使翅堿蓬種子總萌發(fā)率和萌發(fā)速率上升，而較高濃度（100、200 mg/L）的Cu2+會使總萌發(fā)率和萌發(fā)速率下降。在試驗選擇的濃度梯度條件下，Zn2+會對翅堿蓬種子總萌發(fā)率和萌發(fā)速率起到抑制作用。已有研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，低濃度重金屬脅迫會促進種子的發(fā)芽，而高濃度則抑制發(fā)芽[14]，這與該試驗結(jié)果相似。較低濃度Cu2+促進翅堿蓬種子的萌發(fā)，這可能與“毒物的興奮效應(yīng)”有關(guān)[15]。Cu2+和Zn2+使種子萌發(fā)受到抑制的原因是淀粉酶和蛋白酶的活性下降，使種子內(nèi)儲藏的淀粉和蛋白質(zhì)的分解受到抑制，影響種子萌發(fā)所需的物質(zhì)和能量，進而萌發(fā)受到抑制[16]。

Cu2+和Zn2+會使翅堿蓬幼苗的滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)——可溶性蛋白、可溶性糖、游離脯氨酸含量上升。在逆境受脅迫條件下，植物的滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)會不斷積累，這是植物在逆境條件下得以生存的重要機制之一[17]。受到Cu2+和Zn2+脅迫，翅堿蓬幼苗會積累可溶性蛋白、可溶性糖、游離脯氨酸，以調(diào)節(jié)細胞內(nèi)的滲透平衡，間接保護那些參與新陳代謝的酶，從而增強幼苗對Cu2+和Zn2+脅迫的抵抗能力[12]。

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