腦微出血患者血漿1，25-(OH)2D3，sLRP1水平與頭顱SWI影像學特征的相關性 *

劉 玥，唐 鵬，侯 辰，張 欣

(陜西省人民醫院神經內三科，西安 710068)

腦微出血(cerebral microbleeds，CMBs)是指腦基底核、丘腦區和皮質下白質等部位的微血管出血性病變導致的腦實質損害[1]。CMBs在無腦血管病史的老年人中發生率約為5%，在存在腦血管病史的人群中發生率更高[2]。CMBs是老年人生活能力和生活質量下降的重要原因[3]。研究發現一種低密度脂蛋白受體家族成員的細胞表面受體低密度脂蛋白受體相關蛋白1(low density lipoprotein receptor related protein 1，LRP1)可參與β淀粉樣蛋白(amyloid β-protein，Aβ)在中樞神經系統的清除[4]。LRPl的β鏈跨膜區斷裂，釋放出可溶性形式sLRP1，Aβ血漿濃度與sLRP1血漿水平相關[5]，提示LRP1可能通過清除Aβ在腦內沉積，對CMBs產生保護作用。1，25-二羥維生素D3[1，25-dihydroxyvitamin D3， 1，25-(OH)2D3]可以通過上調LRP1的表達促進Aβ清除[6]，提示1，25-(OH)2D3同樣可能具有防治CMBs的作用。本研究選取我院CMBs患者及正常對照人群外周血漿1，25-(OH)2D3和sLRP1水平進行檢測，研究外周血1，25-(OH)2D3和sLRP1水平在兩組人群的關系。以進一步研究驗證1，25-(OH)2D3是否能介導上調LRP1的表達來影響CMBs病程。

1 材料與方法

1.1 研究對象 連續收集2017年1月～2019年5月就診于我院的CMBs患者196例(男性152例，女性44例)。CMBs符合2014年中國腦小血管病診治共識[7]定義。對照組：選取年齡、性別匹配的健康人99例(男性67例，女性32例)作為對照組。受試前所有的受試者取得知情并簽署知情同意書。

1.2 試劑和儀器 我們使用Philips Ingenia 3.0T MR成像儀采集影像，磁敏感加權成像(susceptibilitg weighted imaging，SWI)圖像采用3D梯度回波序列掃描后，進行最小密度投影重建(minimal intensity projection，MinIP)技術獲得。檢測血漿sLRP1和1，25-(OH)2D3所用試劑由上海源葉生物科技有限公司提供。

1.3 方法 按照年齡性別匹配的方法選擇健康志愿者99例。采集所有研究對象的基本資料(年齡、性別、吸煙史等)、血液檢測結果[血漿sLRP1和1，25-(OH)2D3]及頭顱磁共振SWI檢查。研究對象空腹8～10 h，采空腹肘靜脈血5 ml，3 000 r/min離心10 min后取血漿放置于-80℃深低溫保存。在全自動分析儀(日本日立7020)上應用散射比濁法檢測血漿sLRP1和1，25-(OH)2D3水平，以上操作均由專業人員嚴格按照說明進行。顱腦磁共振SWI圖像由一位神經放射學醫師與兩位神經內科高年資醫師共同讀取，記錄并分析CMBs病灶的數量及部位。

1.4 統計學分析 采用SPSS12.0軟件進行。組間計量資料的比較采用t檢驗，計數資料的比較應用卡方檢驗，不同研究指標間的相關性分析選擇皮爾遜相關分析。所有統計學顯著性水平設為0.05。

2 結果

2.1 CMBs組與對照組血漿sLRP1和1，25-(OH)2D3水平的相關性 見表1。將CMBs組與對照組血漿sLRP1和1，25-(OH)2D3等指標進行t檢驗。CMBs組的血漿sLRP1和1，25-(OH)2D3水平均低于對照組，差異具有統計學意義(均P<0.01)。

表1 CMBs組與對照組血漿sLRP1和1，25-(OH)2D3水平

2.2 CMBs組患者年齡、性別與血漿sLRP1和1，25-(OH)2D3水平的相關性 見表2。將CMBs組患者按年齡、性別分組，分別將血漿sLRP1和1，25-(OH)2D3進行對比。CMBs組患者的血漿sLRP1和1，25-(OH)2D3水平在CMBs患者不同年齡、性別組差異均無統計學意義(均P>0.01)。

表2 CMBs患者年齡、性別分層后血漿sLRP1和1，25-(OH)2D3水平比較

2.3 CMBs組患者CMBs病灶部位及數量與血漿sLRP1和1，25-(OH)2D3的相關性 見表3。CMBs組按照CMBs病灶部位的不同分為腦皮質CMBs組與腦深部白質CMBs組，并將CMBs病灶數量與血漿sLRP1和1，25-(OH)2D3等檢驗值進行皮爾遜相關性分析。結果發現，血漿sLRP1水平與病灶的數量具有負相關性(r=-0.216，P=0.002)，同時發現血漿sLRP1水平與腦皮質CMBs病灶數量呈負相關(r=-0.239，P=0.001)。

表3 CMBs病灶部位及數量與血漿sLRP1和1，25-(OH)2D3的相關性

3 討論

與白種人相比，亞洲人群的CMBs與腦出血關系密切[8]。CMBs與認知障礙也具有明顯相關關系，極大影響老年人生活質量[9]。同時，缺血性卒中患者的CMBs明顯增多[2]，也增加了該類患者抗栓治療的出血風險[10，11]，影響抗栓藥物的選擇策略。因此，CMBs受到了越來越多臨床醫師的關注和重視。LRP1作為一種重要的細胞表面受體，參與細胞信號傳導、胞內運輸以及膽固醇代謝等眾多的生理過程，對于神經元發育和突觸可塑性具有非常重要的作用，同時參與神經元膠質細胞和腦微血管內皮細胞等的表達[4]。相關機制研究表明LRP1可能通過下調脂蛋白相關磷酯酶A2(lipoprotein phospholipase A2，LPA2)活性，參與血小板源性生長因子(platelet-derived growth factor，PDGF)[12]等途徑在CMBs發生中起作用。本團隊曾進行的研究證實LPA2在CMBs發生中可能起到重要作用[13]。LRP1的β鏈跨膜區斷裂，釋放出可溶性形式sLRP1，最新研究發現Aβ血漿濃度與sLRP1血漿水平相關[5]。血漿Aβ濃度升高提示腦脊液中Aβ被更多地轉運至血漿中，從而導致腦脊液中Aβ濃度降低，可能會延緩CMBs發生。本研究發現CMBs患者的血漿sLRP1水平與腦皮質CMBs病灶數量負相關，提示高表達的sLRP1與腦內Aβ清除增多有關，對腦皮質CMBs的發生具有一定的保護作用。本研究中，CMBs患者的血漿sLRP1水平與腦深部CMBs病灶數量無明顯相關，可能因為腦深部CMBs的發生與高血壓具有更高的相關性[1]。

本研究還發現，CMBs患者的血漿sLRP1水平與年齡、性別均無明顯相關性，說明血漿sLRP1水平檢測受年齡性別影響較小。CMBs患者的血漿sLRP1和1，25-(OH)2D3水平低于正常人群，1，25-(OH)2D3可以通過上調LRP1的表達促進Aβ清除[6]，提示補充活性維生素D可能有利于預防CMBs發生或減緩疾病進展。我國西部地區中老年人群普遍存在活性維生素D不足的情況[14]，下一步我們將對CMBs患者進行補充活性維生素D治療，對比治療前后1，25-(OH)2D3和血LRP1水平的變化情況，并觀察一年內兩組間CMBs病灶部位及數量的變化。以進一步了解活性維生素D是否通過LRP1途徑在防治CMBs發生中起到保護作用。

綜上所述，CMBs患者的sLRP1和1，25-(OH)2D3水平較正常人群偏低。sLRP1水平與患者顱內CMBs數量具有相關性，尤其與腦深部白質CMBs數量更為相關?；钚跃S生素D可能通過提高sLRP1的表達，對腦皮質CMBs的發生具有一定的保護作用。因此，臨床上補充活性維生素D進行早期干預，將有助于CMBs的防治。本研究的局限性在于為單中心隊列研究，存在選擇偏倚及信息偏倚等可能，接下來有必要進行大樣本的研究，并驗證補充活性維生素D對預防CMBs的作用，希望能夠得到更有意義的臨床結果。