西京醫院性病門診7 712例尖銳濕疣患者疣體組織HPV型別回顧性分析 *

馮 婷，李海英，曾成龍，閆 丹，趙小東，王勝春

(空軍軍醫大學西京醫院皮膚科，西安 710032)

尖銳濕疣(condyloma acuminate，CA)，也稱生殖器疣，是目前常見的性傳播疾病之一，發病率呈逐年遞增趨勢，好發于生殖器及肛周部位[1]，最顯著的臨床特點是容易復發。人乳頭瘤病毒(human papilloma virus，HPV)是引起該疾病的病原體，它是一種對人的皮膚和黏膜具有高度親嗜性的小分子雙鏈DNA病毒，人們根據編碼衣殼蛋白L1的基因序列不同來定義HPV亞型，目前已明確200余種型別[2]。資料研究顯示不同型別的HPV可以導致不同的臨床病變[3]，其中42種基因型與生殖道疾病有關，也有文獻報道CA患者的HPV流行型別具有人群和地區差異性[4]。本文擬通過回顧大樣本CA患者的臨床資料和實驗室檢測數據，掌握其HPV基因型的類型、數量和高低危險型的分布情況，以此豐富CA流行病學資料，現報告如下。

1 材料與方法

1.1 研究對象 2010年9月～2018年9月就診于西京醫院性病門診臨床診斷CA患者7 712例，年齡是8個月～84歲，平均年齡32.68±10.97歲。入選標準：有典型的CA臨床癥狀，進行過HPV基因分型檢測；排除標準：臨床資料缺失、其它HPV相關感染疾病和自身免疫性疾病患者。

1.2 試劑和儀器 HPV基因分型檢測試劑盒由亞能生物技術有限公司提供，可檢測包括18種高危型(HPV16，18，31，33，35，39，45，51，52，53，56，58，59，66，68，73和82，83)及5種低危型(HPV6，11，42，43，81)共23種HPV基因型。TL988實時熒光定量PCR儀由西安天隆科技有限公司提供，FYY-3型分子雜交儀由江蘇興化市分析儀器廠提供。

1.3 方法 充分暴露患者的疣體部位，先用生理鹽水清洗，然后于患者皮損處消毒，再用消毒活檢鉗夾取疣體組織置于標本保存液，立即檢測或置于-20℃冰箱內保存待檢。HPV基因分型檢測原理采用的是PCR反向分子雜交法，實驗步驟均嚴格按照試劑盒說明書進行操作，實驗全部過程也在質量控制范圍內，另本檢測中心每年的室間質量控制評價活動成績也均合格。

1.4 統計學分析 應用SPSS19.0軟件進行數據匯總與統計學分析，若P<0.05則差異有統計學意義。

2 結果

2.1 性別分布情況 7 712例中男性4 935例，女性2 777例，性別比例為1.78∶1。

2.2 年齡分布情況 患者年齡分布情況見表1。多為青壯年，以20～29歲最多， 0～9歲及50歲以上患者664例(8.61%)。

2.3 HPV基因型別檢出情況 見表2。7 712例中有50例未檢測出任何型別，有7 662例檢測出23種HPV基因型別，檢出頻次排名前十位的型別依次為HPV6，11，16，43，52，42，58，51，59和56型。

表1 7 712例CA患者的年齡分布情況

表2 7 712例CA患者的HPV基因型檢出頻次情況

2.4 混合感染情況和危險度分布情況 7 662例患者中單一基因型感染占58.98%(4 519/7 662)，多種基因型感染占41.02%(3 143/7 662)，其中二重感染最多占60.77%(1 910/3 143)，最多可見同時感染14個基因型；低危型占60.66%(4 648/7 662)；低高混合型占32.17%(2 465/7 662)，高危型占7.17%(549/7 662)。

3 討論

HPV是一種無包膜二十面體核衣殼結構的DNA病毒，可引起眾多的疾病，包括扁平疣、尋常疣、疣狀表皮發育不良、鮑溫樣丘疹病、CA，宮頸癌和陰莖癌等，這些疾病也都由不同的HPV亞型引起，例如扁平疣主要是由3，10，27和28型等引起，尋常疣則為1，2，4和7型等，而CA感染HPV基因型較多，主要為本研究組中的23個類型，也有研究表明HPV16，18，33，45和31型是宮頸癌中最常見的類型[5]，HPV16和18對浸潤性宮頸癌的影響為69.7%[6]。根據HPV致癌力的大小，還將HPV基因型分為高危型和低危型，前者包括HPV16，18，31，33，45，52，56和58等，其持續性感染可能會導致女性各部位上皮內瘤變和男性陰莖及肛周癌變；后者包括HPV6，11，42，43和81型等，與肛門和外生殖器疣等良性病變有關[7]。

本研究CA患者中男性患者多于女性患者，這可能與男性荷爾蒙激素偏高，性生活相對頻繁，性伴較多有關。HPV感染情況與年齡也有一定關系[8]，本研究顯示CA患者多為青壯年，以20～29歲例數最多，這些與大多數文獻均一致[9]，同時兒童及50歲以上患者約占8.61%，臨床上應重視此人群的防治。本研究HPV基因型檢出頻次依次為HPV6，11，16，43，52，42，58，51，59和56型，此與BAO等[10]研究結果不一致(亞洲最常見的HPV亞型為16，58，33，52，18型)，與現在的HPV九價疫苗(6，11，16，18，31，33，45，52，58)類型也不全相同，說明了CA患者的HPV流行型別有地區差異性[11]，也有利于西北地區CA患者的流行病學和HPV疫苗發展研究。本研究7 712例中有50例未檢測出任何型別，與目前臨床上約70%的CA患者可檢測出HPV感染[3]的觀點一致， 其中原因可能是這些患者感染的HPV型別不在本研究檢測范圍之內，是不是存在新的HPV型別？這還有待于進一步研究，并希望最終能有符合HPV感染流行譜的檢測試劑。

CA患者HPV感染的基因型復雜多樣，不同CA患者感染HPV的情況也可能不同，某位患者感染的基因型可以是一種，也可以是混合感染兩種或兩種以上，可以是低危型感染、也可以是高危型或高低危混合感染。從本研究結果來看，單一感染和低危型感染為HPV感染主要形式，這與其他地區的結果類似[12]。掌握臨床CA的HPV感染情況和基因型分布不僅僅是流行病學調查的需要，而且對于尖銳濕疣的監測和控制有重要的臨床意義。臨床中我們要優化單一感染和低危型感染患者治療方案，提倡個體化治療，力求降低患者復發頻率，同時也要注意多重感染和高危型患者的綜合治療，重視長期進行定期隨訪觀察工作，并完善女性患者的宮頸癌前病變篩查[13]，以防止HPV相關腫瘤的發生。此外，要繼續加強CA相關知識宣教工作，真正做好CA患者的全面檢查、治療和定期隨訪。

目前國內進行HPV檢測的方法很多，包括質譜、基因分型和PCR定量等，臨床采用更多的是基因分型和PCR定量檢測[14]，HPV基因分型檢測技術是一種靈敏度高、特異度好、采樣方便、能正確區分高危型和低危型感染的診斷方法，是臨床診斷HPV感染和相關研究的有效輔助手段。