廣州地區女性患者泌尿生殖道CT，NG，MG和UU感染狀況分析 *

唐 盈，林佩萱，陳 翊，鐘家禹，謝嘉慧，朱 冰

(廣州市婦女兒童醫療中心a.中心實驗室；b.計劃生育科，廣州 510120)

泌尿生殖道感染是全球范圍內危害嚴重的重要性傳播疾病之一，沙眼衣原體(chlamydiatrachomatis，CT)、淋病奈瑟菌(neisseriagonorrhoeas，NG)、解脲脲原體(ureaplasmaurealyticum，UU)和生殖支原體(mycoplasmagenitalium，MG)是引起人類泌尿生殖道疾病常見的4種病原微生物，其主要通過性接觸被感染，易造成女性泌尿生殖道炎癥、流產、不孕不育和異位妊娠等不良結局，嚴重威脅女性生殖健康[1]。廣州屬于經濟發達地區，人口流動規模較大，是疾病感染和傳播的高發地。近年來，由于CT，NG，UU和MG發病率逐年增加并且存在著多種病原體混合感染，病原體的多樣性和耐藥性的產生給臨床診療帶來極大的挑戰。由于傳統的實驗方法存在著一定的局限性，采用新一代技術實時熒光核酸等溫擴增檢測技術(simultaneous amplification and testing，SAT)能更快速、精準地檢出各種生殖道病原體[2-3]。為了解廣州地區女性泌尿生殖道患者4種病原體的感染情況，對廣州市婦女兒童醫療中心近2年門診女性患者進行CT，MG，NG和UU檢測，報道如下。

1 材料與方法

1.1 研究對象 收集2017年1月～2018年12月首次在我院婦科、計劃生育科、泌尿科、生殖免疫科等門診就診的女性患者的宮頸分泌物或尿液標本共計2 388份。患者年齡15～70歲，平均年齡31.66±6.45歲，首診通常表現為尿頻、尿急、腹痛、白帶增多等泌尿生殖道感染癥狀或月經不規則、流產、不孕不育等其他病癥。

1.2 試劑和儀器 CT，MG，NG，UU實時熒光核酸等溫擴增檢測試劑盒由上海仁度生物科技有限公司提供，采用美國ABI-7500型和ABI-7300型熒光定量 PCR儀進行測定。

1.3 方法

1.3.1 標本采集和保存：宮頸分泌物2 357份，尿液31份。宮頸分泌物標本由婦科醫生采集，用無菌棉拭子伸入宮頸口內旋轉1周，停留10 s后取出放入1 ml生理鹽水中密封送檢；尿液標本由患者自行留取首段尿液，送檢后吸取標本1 ml加入1 ml尿液保存液，于3天內檢測。

1.3.2 檢測方法：采用新一代病原體RNA檢測技術SAT法進行擴增。具體擴增條件為42℃ 1 min，40個循環，熒光通道為FAM；每批檢測均設立陰、陽性對照及質控。根據擴增曲線和循環數判讀結果，dt≤35為陽性。

1.4 統計學分析 采用Excel 2007和SPSS17.0軟件對數據進行分析，組間比較采用χ2檢驗，以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 CT，MG，NG和UU感染情況分析 見表1。兩年間4種病原體均有陽性檢出率，UU的陽性檢出率最高，其陽性率明顯高于其他3種病原體，差異有統計學意義(χ2=3 561.6，P<0.01)。MG檢出率2018年略高于2017年，差異無統計學意義(χ2=0.752，P>0.05)。

表12017～2018年四種病原體檢測結果[n(%)]

年份nCTMGNGUU2017年2018年合 計1 0461 3422 38871(6.79)86(6.41)157(6.57)12(1.15)21(1.56)33(1.38)8(0.76)7(0.52)15(0.63)569(54.40)714(53.20)1 283(53.73)

2.2 CT，MG，NG和UU感染類型分布 見表2。4種病原體總檢出率為55.78%，1 332份陽性病例中共檢出12種不同感染類型，以單一UU感染率最高，其次分別為CT+UU混合感染，單獨CT感染。感染1種病原體的女性患者有1 186例，合并感染2種病原體的有137例，合并感染3種病原體的有8例，發現1例女性患者同時感染4種病原體。CT，MG，NG及UU的陽性患者中混合感染率分別為75.16%(118/157)，81.82%(27/33)，86.67%(13/15)和11.22%(144/1 283)。

表22 388例女性患者不同感染類型陽性率及構成比

感染類型陽性數陽性率(%)構成比(%)單獨UUCT+UU單獨CTMG+UUNG+UU單獨MGCT+MG+UUCT+NG+UU單獨NGCT+MGCT+NGCT+MG+NG+UU1 13910739208653211147.704.481.630.840.340.250.210.130.080.040.040.0485.518.032.931.500.600.450.380.230.150.080.080.08

2.3 不同年齡段女性患者CT，MG，NG及UU感染情況 見表3。21～40歲年齡組送檢樣本數最多，21～40歲女性為泌尿生殖系統疾病高危人群。UU在各年齡組均有較高的檢出率，差異有統計學意義(χ2=9.928，P<0.05)。15～20歲年齡段4種病原體陽性檢出率均最高，但樣本含量較少。

2.4 不同臨床癥狀女性患者病原體檢測情況 見表4。診斷為泌尿生殖系統炎癥(包括尿道炎、宮頸炎、盆腔炎等)、不孕癥或月經不調的女性患者病原體的檢出率高于其他臨床診斷患者，各組檢出率之間差異有統計學意義(χ2=173.2，P<0.01)。

表3 不同年齡段女性患者CT，MG，NG及UU感染情況

表4 不同臨床癥狀女性患者檢測結果

3 討論

CT，NG，MG和UU是通過性接觸感染的4種病原體，國際上被列為性傳播疾病，簡稱性病。我國從上世紀九十年代開始，以淋病為代表的性病逐漸轉變成以CT，UU和MG引起的泌尿生殖系統感染為主。自2011年以來，我國淋病發病率呈現下降趨勢，非淋菌性病原體的發病有所增加。本研究對2 388例泌尿生殖系統疾病患者分別檢測了CT，MG，NG和UU，總檢出率為55.78%，符合國內性病的流行現狀。其中，CT和UU的陽性率均高于方偉禎等[4]報道的廣州地區2015～2016年女性CT陽性率(4.49%)和UU陽性率(45.10%)，說明CT和UU的感染率呈現增長趨勢，但不能排除不同時期的人群特點和年齡分布不同等因素造成的差異。檢測結果均低于王敬仁等[5]報道的柳州地區CT陽性率(12.20%)、UU陽性率(64.97%)和NG陽性率(3.47%)，原因除了與地域不同有關外，很大可能是本研究采用了新一代病原體RNA檢測技術，與傳統的 PCR 法相比，該方法檢測的是活的病原體中的RNA，RNA在環境中比較容易降解從而有效避免了假陽性。

MG是人類泌尿生殖道感染的重要病原菌之一。早在1981年，Tully從13例非淋菌性尿道炎的男性病人中分離出2株MG。在美國和加拿大等國家醫院的婦科、性病等門診就診女性患者中，MG的發病率已超過CT和NG[7-8]。MG可引發多種疾病[9]，是可能比UU危害更大的生殖健康殺手。WHO性傳播疾病診斷指南(2013)中將核酸擴增技術作為MG唯一的診斷方法。本文對MG采用SAT法檢測，結果提示MG多為并發感染。目前，SAT法檢測MG僅在國內少數機構開展，由于MG的致病機制和耐藥性仍不清楚，臨床上缺乏MG患病率的數據，建議臨床上將MG作為高風險人群的常規篩查項目之一。

由表1可見，UU在廣州地區女性泌尿生殖道疾病中的檢出率最高，這與國內外諸多報道一致。有學者報道[6]UU在女性感染中更多見，其原因可能由于一方面UU在女性泌尿生殖道有高度定居性，其中相當一部分支原體感染者都是沒有自覺癥狀不接受診療；另一方面，由于女性泌尿生殖系統的特征，支原體更容易侵犯女性泌尿生殖道。表2中，混合感染共146例，占陽性檢出人群的10.96%(146/1 332)，以CT+UU居多。泌尿生殖道病原體混合感染是患者臨床治療不徹底、易反復發作的原因之一。臨床上不能忽視這幾種病原體的協同感染，建議醫生在為患者診治前，應同時檢測CT，MG，UU和NG，一方面可以防止某種病原體的漏診，另一方面可以為臨床用藥提供治療依據，提高治愈率。

表3提示，UU是本地區女性主要的流行病種。病原體感染主要集中在21～40歲組，可能與此年齡段的女性性生活活躍有關。15～20歲年齡段女性由于抵抗力低下加上缺乏正確的性健康知識、容易受感染造成陽性檢出率最高，不排除此年齡段檢測病例數較少，存在統計誤差。不同臨床癥狀女性患者病原體檢測結果顯示排在前三位的癥狀分別為泌尿生殖道炎癥、月經不調和不孕癥。女性泌尿生殖道感染臨床上除了表現為尿道炎、宮頸炎、盆腔炎等之外遠期還可造成流產、輸卵管性不育、異位妊娠等嚴重的不良結局。后續應對年輕女性開展流行病學調查和實驗室篩查，同時加大宣傳教育力度，進行早期預防和干預。

SAT技術是將新一代核酸恒溫擴增技術和實時熒光檢測技術結合起來的一種新型核酸檢測技術，SAT技術檢測UU-RNA，CT-RNA和NG-RNA已被廣泛應用于臨床[4]，SAT的優點同樣適用于MG篩查，由于SAT技術以RNA 為目標，其靈敏度高且特異度好，一份標本可以同時檢測4種病原體，尿液采集簡便，減輕了患者取材的痛苦。

目前，國家推行“二孩”政策，人口政策從原來的計劃生育逐漸轉向優生優育，較多育齡夫婦有再生育要求，建議地方政府將CT，NG，MG和UU納入孕前、產前及不孕癥檢查的篩查項目，對控制疾病的傳播具有重要意義。