復發性卵巢癌患者血清NDRG4水平表達與臨床特征及預后的相關性研究 *

馬 歡，田小飛，李紅霞

(1.榆林市第一醫院綏德院區a.婦產科；b.小兒一科，陜西榆林 718000；2.延安大學附屬醫院婦科，陜西延安 716000)

卵巢癌(ovarian cancer，OC)是常見的婦科惡性腫瘤之一，在我國婦科腫瘤導致的死亡中居第9位[1-3]，2019年美國腫瘤年報顯示在女性腫瘤導致的死亡人數中OC居第5位[4-6]，根據全球癌癥統計(GLOBOCAN)組織2018年腫瘤統計數據估計OC全球新發病例295 414例，死亡184 799例[7]，嚴重危害女性健康。目前認為OC發展到晚期才能確診，并且并發轉移、耐藥、復發等因素才導致了OC的高病死率。現代腫瘤治療中，腫瘤相關標志物的發現為腫瘤治療和預后提供了科學依據[5-6，8]，為提高OC患者診斷和治療的成功率，醫務工作者同樣開展了大量生物標志物相關研究。有研究報道抑癌基因N-myc下游調節因子4(N-myc downstream regulated gene 4，NDRG4)在OC中低表達[9]，提示NDRG4可作為OC患者生存和預后的生物標志物，但是尚未見到NDRG4蛋白質在復發性卵巢癌(recurrent ovarian cancer，ROC)患者血清中的研究報道，本研究著眼于ROC患者血清中NDRG4蛋白質的表達及其對患者生存和預后的影響，開展以下研究，以期為ROC患者生存和預后提供可行的生物標志物。

1 材料與方法

1.1 研究對象 本研究所用到的147例ROC患者血液標本均為2010年1月～2014年12月收集于榆林市第一醫院，課題組每三個月對以上患者電話隨訪一次，追蹤隨訪時間最短1個月，最長68個月，隨訪時間中位數為23個月。患者平均年齡55.4±11.3歲。患者相互之間不存在血緣關系。

1.2 儀器與試劑 本研究電化學發光法采用德國羅氏E411 全自動電化學發光儀，試劑購買于北京陸橋技術公司。

1.3 方法 本研究采用電化學發光法測定NDRG4蛋白質在血清中的含量，每次測定均進行室內質控，每個樣品重復測量3次，取平均值作為最終濃度結果，血清NDRG4水平按濃度分為2組(<20.0 ng/ml，≥20.0ng/ml)。

1.4 統計學分析 采用Pearson卡方檢檢分析組間差異，kendall’s taub相關性檢驗分析等級相關性，采用K-M法繪制生存曲線，用log-rank檢驗不同組患者生存時間之間的差異。統計過程使用SPSS13.0軟件運行，所有檢驗均為雙側檢驗，α=0.05，P<0.05為差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 不同臨床分期ROC患者血清NDRG4蛋白質水平對比 見表1。通過分析不同臨床分期ROC患者血清NDRG4蛋白質水平發現，分期愈高者其血清NDRG4水平越低，且組間差異具有統計學意義(F=20.311，P<0.001)。

表1不同臨床分期ROC患者血清NDRG4水平比較

臨床分期百分比[n(%)]血清NDRG4水平(x±s,ng/ml)Ⅰ期Ⅱ期Ⅲ期Ⅳ期總數38(25.9)41(27.9)18(12.2)50(34.0)147(100)150.76±88.6468.61±55.0853.78±49.6539.28±56.9181.73±79.88

2.2 ROC患者血清NDRG4蛋白質水平與臨床分期之間的相關性 見表2。經kendall’s taub相關性檢驗分析發現，ROC患者血清NDRG4水平與臨床分期之間呈正相關，且正相關差異具有統計學意義(γ=0.326，P<0.001)。

表2ROC患者血清NDRG4蛋白質水平與臨床分期之間的相關性[n(%)]

血清NDRG4水平(ng/ml)Ⅰ期Ⅱ期Ⅲ期Ⅳ期<20.0≥20.0合計10(26.3)28(73.7)38(100)16(39.0)25(61.0)41(100)3(16.7)15(83.3)18(100)37(74.0)13(26.0)50(100)

2.3 血清NDRG4蛋白質水平與ROC患者臨床特征之間的關系 見表3。通過分析血清NDRG4蛋白質水平與ROC患者臨床特征之間的關系可見，血清NDRG4蛋白質水平與ROC患者的吸煙、飲酒、腫瘤臨床分期、T分期、N分期和M分期等因素相關。

表3血清NDRG4蛋白質水平與ROC患者臨床特征之間的關系[n(%)]

臨床特征n<20.0 ng/ml(n=66)≥20.0 ng/ml(n=81)χ2P年齡(歲) 吸煙 飲酒 臨床分期 T分期 N分期 M分期 <50≥50否是否是Ⅰ+ⅡⅢ+Ⅳ1+23+40+1+2301471006483905779688364126211232422(33.3)44(66.7)19(28.8)47(71.2)47(71.2)19(28.8)26(39.4)40(60.6)20(30.3)46(69.7)64(97.0)2(3.0)61(92.4)5(7.6)25(30.9)56(69.1)45(55.6)36(44.4)43(53.1)38(46.9)53(65.4)28(34.6)63(77.8)18(22.2)62(76.5)19(23.5)62(76.5)19(23.5)0.102 10.600 5.033 9.918 33.344 12.392 6.7140.859 0.001 0.028 0.003 <0.001 <0.001 0.013

2.4 血清NDRG4蛋白質水平與ROC患者預后之間的關系 通過進一步分析血清NDRG4蛋白質水平與ROC患者預后之間的關系，發現血清NDRG4蛋白質水平較高的ROC患者生存期較低表達患者生存期短，且經log rank檢驗差異有統計學意義(χ2=5.94，Plog rank=0.0148)。見圖1。

圖1 血清NDRG4水平與ROC患者預后之間的關系

3 討論

卵巢癌是女性生殖系統常見惡性腫瘤之一，但在各種生殖系統惡性腫瘤的死亡率中卻位居首位[9-11]，對女性健康造成了嚴重威脅。因卵巢癌早期無癥狀或癥狀較輕，待有癥狀并最終確診時相當一部分卵巢癌患者已是腫瘤終晚期[12-13]，故，對卵巢癌的診斷和治療提出了巨大挑戰。在造成卵巢癌患者死亡的原因中，ROC占到了很大的比重，因復發的特性，其惡性程度往往高于首發，且往往伴隨著腫瘤轉移，其造成的死亡率比首發卵巢癌更高[14-15]。

NDRG4在多種腫瘤中發揮抑癌基因的作用，其中包括卵巢癌[16-20]，NDRG4蛋白質在卵巢癌組織中的表達顯著低于正常組織[19]，在宮頸癌細胞中的表達較正常宮頸內皮細胞低，且抑制DNRG4基因的表達能夠促進宮頸癌細胞遷移和侵襲[20]。本研究中，通過分析ROC患者血清NDRG4蛋白質的表達情況，發現NDRG4蛋白質水平較高的患者臨床分期較靠前，且NDRG4蛋白質水平較高的患者生存期較低水平NDRG4蛋白質患者明顯延長，說明NDRG4在卵巢癌中發揮抑癌基因的效應，如早期檢測發現患者血清NDRG4蛋白質水平較低，則該患者有較大可能預后較差，這與曹雪嬌等[9]的研究相符。

本研究雖揭示了NDRG4蛋白質與ROC患者之間的生物學關聯，但是尚未探討其生物學機制，NDRG4如何抑制卵巢癌，特別是ROC的生物學機制尚未明確，需進一步探討。