植物生長調節劑對洋桔梗生長狀況的影響

孫思敏

【摘? 要】以云南當地生產培育的洋桔梗（Eustomagrandiflorum（Raf.）Shinners）品種為實驗材料，初步構建了洋桔梗的快速繁殖體系，并探討了不同植物生長調節劑對洋桔梗幼苗生長的影響。實驗結果表明：以MS+6-BA 1.0mg/L+ NAA 0.3mg/L +KT 1.0mg/L+GA3 0.3mg/L培養基適宜洋桔梗的快速繁殖。GA3濃度為0.5mg/L時，能有效誘導洋桔梗種子萌發和幼苗生長，但隨著GA3濃度過高則有抑制效應。吲哚丁酸和蕓苔素內脂處理都能促進洋桔梗幼苗生長，在0.2-0.4mg/L濃度范圍時，蕓苔素內脂效果明顯優于吲哚丁酸，根長分別達到后者的2-3倍，且莖部較壯，葉片肥大，顏色較深。其中，1/2MS+IBA 0.25mg/L+0.3mg/L蕓苔素內脂處理的生根效果最佳。

【關鍵詞】洋桔梗;組織培養;蕓苔素內脂;吲哚丁酸;生根

【中圖分類號】S482????? 【文獻標識碼】A????? 【文章編號】1672-3783（2019）01-0276-02

洋桔梗（Eustomagrandiflorum（Raf.）Shinners）龍膽科多年生植物，又名草原龍膽，德州藍鈴，原產于美國科羅拉多州、內布拉斯加州、得克薩斯州和新墨西哥一帶。我國主要從日本引進進口洋桔梗花種，并已經開始做商業化的栽培，尤其在云南進行大面積的種植培育。洋桔梗具有花色變化繁多、形態漂亮、切花壽命長等優點，可用于裝飾盆栽，深受消費者喜歡。洋桔梗富含桔梗皂苷等重要藥用成分，主要用于咳嗽痰多、咽喉腫痛、炎癥等的治療，并能增強人體抵抗力以及提高人體免疫功能。國外對于洋桔梗的快繁和生根培育研究報道甚少，國內對于洋桔梗的研究集中于不同品種的洋桔梗發芽實驗[1]，以帶芽莖段為外植體的組培苗煉苗研究，以及洋桔梗相關基因的分析研究。

洋桔梗是世界公認的栽培難度最大的花卉之一[2]，是世界前10大切花中唯一采用種子繁殖的種類。在洋桔梗室外育種過程中，會出現品種逐漸退化，育種周期較長，長勢參差不齊等現象，導致植株品質大幅下降，嚴重減產，甚至大量死亡。同時，室外育苗過程中，會出現生長緩慢甚至停滯，休眠期過長，蓮座化現象等。本實驗研究解決洋桔梗室外育種困難的問題，有效解除蓮座化現象，打破種子休眠期，培育高品質性狀優良的植株，實現洋桔梗的快速繁殖，并預期進一步誘導試管開花，研究花芽的分化和花的外部形態等。

植物生長調節劑對植物有促進或抑制的作用，是植物細胞接受特定環境信號誘導產生的可調節植物生理反應的活性物質，植物激素在植物細胞的分裂分化，開花結實，成熟衰老中也有重要的作用。本研究以選取云南本地培育的洋桔梗種子進行組織培養，利用吲哚丁酸（IBA）和蕓苔素內脂處理洋桔梗無菌苗生根，并觀察其葉片長勢，分析外源激素對洋桔梗的生長影響，并為洋桔梗快速繁殖和生根培育提供相應參考。

1 材料與方法

1.1 材料

供試材料為云南本地培育的洋桔梗（Eustomagrandiflorum（Raf.）Shinners）花種。6-芐氨基嘌呤（汕頭市先華化學廠有限公司），吲哚乙酸（長沙禎祥生物科技有限公司），6-糖基氨基嘌呤（湖北洪運隆生物科技有限公司），吲哚丁酸（安陽全豐生物科技有限公司），蕓苔素內脂（河南珍瑞生物科技有限公司）

1.2方法

1.2.1洋桔梗的消毒處理

選取洋桔梗的種子，洗滌劑浸泡10-20min，流水沖洗1h，用濾紙輕輕吸去多余水分。70%乙醇泡15-30s，0.1%HgCl2消毒10-12min，次氯酸鈉消毒10-20min，無菌水沖洗5-7次，接種，進行培養。

1.2.2洋桔梗種子生長研究

經洋桔梗初代培養，以MS+3%蔗糖+0.8%瓊脂為基礎培養基，分別用不同濃度6-BA和NAA處理，并在此基礎上配制激素組合如下：

6-BA（0.6mg/L）和NAA（0.2，0.3，0.4mg/L）;6-BA（0.8mg/L）和NAA（0.2，0.3，0.4mg/L）;6-BA（1.0mg/L）和NAA（0.2，0.3，0.4mg/L）.

每3天對洋桔梗生長情況的進行觀察記錄，30天后對洋桔梗種子發芽率進行測定。

發芽率（%）=N1/N2×100

式中：N1為正常發芽數（不包括由于外界因素或內源因素死亡的種子），N2為試樣種子粒數。

1.2.3赤霉素對洋桔梗生長的影響研究

以1.2.2中最佳激素培養基為基礎，加入赤霉素處理同一批次的洋桔梗，設置單因素變量赤霉素，濃度梯度為0，0.1，0.2，0.3，0.4，0.5，0.6，0.7mg/L。每3天對洋桔梗的生長狀況進行觀察記錄，30天后對洋桔梗種子發芽率進行測定。

1.2.4洋桔梗的蓮座化處理

在洋桔梗的培育過程中，出現了較嚴重的蓮座化現象，對此展開研究，經不同濃度的赤霉素對洋桔梗進行處理，發現赤霉素可以有效打破洋桔梗蓮座化，且赤霉素的濃度在0.15-0.25mg/L時，蓮座化程度顯著降低，長勢均勻良好，植株明顯長高。不同溫度處理洋桔梗，也可以有效降低蓮座化程度，經對照實驗，發現，在溫度為7-10度，處理時間14-18天，效果最佳。

1.2.5吲哚丁酸和蕓苔素內脂對洋桔梗生根的影響研究

在國內和國外對洋桔梗的大量研究基礎上，對洋桔梗生根做進一步研究。設置IBA和蕓苔素內脂雙因素濃度梯度培養基：

濃度分別為：IBA0.25mg/L;蕓苔素內脂0，0.1，0.2，0.3，0.4，0.5，0.6mg/L

每5天觀察洋桔梗生根的情況，并進行生根率的測定。

生根率（%）=N3/N4×100

式中：N3為生根苗數，N4為無菌苗總數

對蕓苔素內脂和IBA進行單因素水平分析，并比較蕓苔素內脂和IBA對洋桔梗生根的影響。設置兩組單因素激素分析，設置6個同等濃度梯度0.1，0.2，0.3，0.4，0.5，0.6mg/L的2種不同激素（蕓苔素內脂和IBA）同時處理已進行快速繁殖的同一批次長勢相同的洋桔梗各20瓶，觀察其生根效果。

1.2.6洋桔梗的移栽

當生根后的組培苗長至3-4對葉時，選取生根長度在3-4cm的組培苗，揭開瓶蓋2天后去取出幼苗，將附著的培養基清洗干凈，移栽到珍珠巖：蛭石：腐殖土 =1：2：1的營養土中，處理20株幼苗。經30天的觀察，洋桔梗的植株有明顯長高，苗色翠綠，葉片較大而厚實，側根較多，成活率達到75.32%。

2 結果與分析

2.1不同植物激素對洋桔梗種子發芽和快速繁殖影響結果比較

植物生長調節劑在植物的培育中有至關重要的作用，不僅能夠調控植物的生長、休眠、扦插生根、花期，還能夠提高植物的抗逆性、產量和組織培養的效果。本實驗合理搭配植物生長調節劑，并觀察記錄洋桔梗的生長情況，得到以下實驗結果：①對第一組6-BA激素處理后的洋桔梗種子進行觀察，0-1.0mg/L6-BA 處理后的種子，7天后有部分發芽，發芽率隨濃度的升高呈增長趨勢，1.0mg/L6-BA處理的種子發芽率最高，15天后部分有子葉長出，葉片小而薄，莖較短。②對第二組NAA激素處理后的洋桔梗種子進行觀察，相較于6-BA處理的種子，發芽時間較長，且發芽率不高，0.3mg/LNAA的處理的種子發芽率最高，18天后有部分長出短小的幼葉，葉片小而薄。③對第三組6-BA和NAA處理后的洋桔梗種子，發芽率明顯高于前兩組，且時間較短，以1.0mg/L6-BA和0.3mg/LNAA的激素搭配發芽率最高，10-12天后，全部有幼葉長出，且植株的高度明顯高于前兩組。④在第三組實驗的基礎下，以1.0mg/L6-BA和0.3mg/LNAA的激素處理為基礎培養基搭配，加入GA3，不同濃度的GA3濃度處理均可促進種子發芽和生長，在GA3濃度為0.1-0.3mg/L時，洋桔梗的種子發芽率有明顯提高，且長勢良好，幼葉數量較多，葉片呈翠綠色，在GA3濃度為0.4-0.6mg/L時，發芽率的變化不明顯。實驗結果數據比較見圖1.

2.2吲哚丁酸和蕓苔素內脂對洋桔梗生根的影響

以1/2MS+0.25mg/L IBA為基礎培養基，加入蕓苔素內脂，在0.1-0.3mg/L濃度下，生根效果呈增長趨勢，在0.3mg/L效果最好，主根粗壯，呈黃綠色，在15天后，根部卷曲于培養瓶底部，平均根長為7.2cm側根細密，有根毛附著，葉片較肥大，莖部較粗壯。在0.3-0.6mg/L，蕓苔素內脂的濃度升高，并未對洋桔梗生根有進一步促進作用，生根處于停止狀態，植株稍有增高。由此，1/2MS+0.25mg/LIBA培養基下，蕓苔素內脂在0.3mg/L濃度，促進根部生長效果最佳。

對蕓苔素內脂和IBA單因素水平分析，實驗結果表明：①經0.1-0.6mg/L蕓苔素內脂處理后的洋桔梗3-5天后生根，12天后，生根效果良好，平均根長為6.12cm，且生根率達85.3%，在0.3mg/L的濃度下，生根效果達到最好，主根長而粗壯，呈黃綠色，側根數量多，有根毛附著，葉片較寬大，呈翠綠色，葉質柔軟且薄，伴有部分側芽長出。20天后，根長進一步生長，卷曲在培養瓶內，根部末端呈乳白色，且較細軟，平均根長達到8.1cm。②莖0.1-0.6mg/L IBA處理后的洋桔梗在5-7天后生根，較蕓苔素內脂生根效率低，12天后，經測量，平均根長為2.68cm，生根率為70.2%，在0.4mg/L的濃度下，呈現良好的申根效果，主根長，較為柔軟，呈淺黃綠色，側根細小，葉片長勢均勻，呈綠色，葉質柔軟，只有部分植株有細小的幼嫩側芽長出。20天后，根部繼續生長，平均根長為4.06cm。

由此結果，蕓苔素內脂對洋桔梗生根效果的影響明顯優于IBA，平均根長約為2-3倍，且根部和莖部較粗壯，葉片寬大，顏色較深，側根和側芽生長數量較多。

3 結論與討論

本實驗研究結果表明：GA3可以有效打破洋桔梗種子的休眠期，提高發芽率，也可以促進洋桔梗幼苗快速繁殖。在一定濃度范圍內，隨著GA3濃度的升高，會促進洋桔梗發芽和快速繁殖。在GA3濃度為0.3mg/L時，洋桔梗的發芽率最高，且長勢良好，在GA3濃度大于0.3mg/L時，對洋桔梗的發芽率呈抑制趨勢。蕓苔素內脂相較于吲哚丁酸，對洋桔梗的生根和葉片長勢作用更好，生根率高，且用蕓苔素內脂處理洋桔梗是吲哚丁酸處理后平均根長的2-3倍，葉片較寬大，主根較粗壯，側根細密。赤霉素的濃度在0.15-0.25mg/L時，可以有效打破蓮座化現象，使植株長勢良好。

蕓苔素內脂[3]是一種新型綠色環保植物生長調節劑，也稱作第六大植物激素。通過適宜蕓苔素內脂處理后的植株，可以改善品質，提高產量，促進根部生長，使葉片更厚實，莖苗更健壯，抗逆性也會有所改善。現如今的研究發現，蕓苔素內脂的生理作用較為廣泛，可以促進細胞伸長和分裂，促進植物光合作用，在不良環境條件下，能提高植物抗逆性，增加農作物的相對含水量及葉綠素和可溶性蛋白質含量。本實驗對蕓苔素內脂的促進生根效果和植物生長調節劑對洋桔梗培養影響進一步研究，發現蕓苔素內脂促進生根和提高植物抗逆性效果顯著，合理搭配植物生長調節劑可以有效解決植物的蓮座化和休眠現象，并提高植株的產量和質量，這對植株的生根培育和組培快繁有一定的積極作用。

參考文獻

[1]?? 李竹英與吳軍，洋桔梗品種發芽試驗.北方園藝，2011（19）：第63-65頁.

[2]?? 李金澤等，洋桔梗6大種植難點分析.中國園藝文摘，2015.31（04）：第156-158頁.

[3]?? 孫振令與張紅雨，蕓苔素內酯的研究進展及其在農業生產中的應用.淄博學院學報（自然科學與工程版），2001（02）：第80-83頁.