某地區維生素D受體基因多態性與妊娠期糖尿病關系的研究

張 琰 王曉彩

（沈陽市婦嬰醫院，遼寧 沈陽 110011）

妊娠期糖尿病（GDM）是指妊娠期發生或首次發現的任何程度的糖代謝異常，不包括孕前已經診斷或已患糖尿病的患者[1]。該病發病率隨著生活水平的提高、生育年齡的后移等因素而逐年上升。妊娠期糖尿病對母兒兩代近遠期都存在嚴重的影響，隨著血糖的升高發生不良的妊娠結局，包括先兆子癇、胎膜早破、巨大兒以及新生低血糖等[2]情況隨之增加。近年來隨著對維生素D作用的深入研究，發現維生素D及其受體基因多態性與2型糖尿病、高血壓、慢性阻塞性肺病甚至惡性腫瘤等疾病的發生、發展有關[3]。因此為了研究遼沈地區漢族人群維生素D受體（VDR）基因多態性與妊娠期糖尿病的關系，我們選擇VDR基因ApaⅠ位點作為靶點，研究其基因多態性與GDM的關系，為臨床早期預防和早期干預GDM提供新的思路和理論依據。

1 資料與方法

1.1 一般資料：選取2017年1月至2018年1月孕＜14周的單胎、漢族孕婦240例作為研究對象，參照中國2型糖尿病指南（2017年）中關于GDM的標準：24～28周口服75 g葡萄糖行OGTT試驗，空腹血糖≥5.1 mmol/L，服糖后1 h血糖≥10.0 mmol/L，2 h≥8.5 mmol/L，其中有一個值達到標準即可診斷GDM。根據是否為GDM分為兩組進行研究。所有患者均簽署知情同意書，并經我院倫理委員會討論通過。平均年齡27～42歲，孕周6～14周。所有患者排除：排除：①妊娠期顯性糖尿病及妊娠合并癥、并發癥；②孕前的糖尿病；③合并慢性阻塞性肺疾病、哮喘、慢性消化性疾病和慢性泌尿系統疾病；④惡性腫瘤；⑤血緣關系；⑥連續3個月口服維生素D以及其他鈣制劑者。

1.2 方法：采用Promega全血基因組DNA提取試劑盒制備DNA，將VDR基因多態性待檢測片段進行PCR擴增并直接進行Sanger法測序獲得VDR多態性位基因型。采用電化學發光法檢測，使用電化學發光全自動免疫分析儀測定血清1，25-二羥基維生素D水平。

1.3 統計學處理：SPSS17.0統計軟件內分析，進行t或卡方檢驗，P＜0.05即代表差異存在統計學意義。

2 結果

2.1 一般資料比較：兩組在年齡方面差異不大，但孕期體質量、2型糖尿病家族史及孕早期維生素D水平兩組差異顯著，具有統計學意義（P＜0.05），見表1。

2.2 VDR基因ApaⅠ位點基因分布及等位基因頻率比較：見表2。從結果看GDM組患者ApaⅠ表達明顯高于對照組，GDM組CC基因型明顯高于對照組，以AA型作為對照參考，CC型是GDM發病的高危因素，CA型與GDM發病無關聯，兩組間等位基因頻率分布無差異。

2.3 ApaⅠ基因型對GDM影響的多因素非條件Logistic：以是否為妊娠期糖尿病為應變量，調整相關混雜因素（年齡、孕次）建立多因素非條件Logistic回歸模型，結果顯示調整相關混雜因素后ApaⅠ、體質量指數、是否存在糖尿病家族史均是GDM發生的危險因素（OR=1.014，95%CI=1.027-1.115）。

表1 一般資料比較[n（%），]

表1 一般資料比較[n（%），]

表2 兩組ApaⅠ及等位基因頻率的比較[n（%）]

3 討 論

3.1 維生素D及其受體基因：維生素D主要以1，25-二羥維生素D的形式起作用，后者通過與其細胞內特異性受體結合而發揮生物效應。維生素D缺乏在中國人群中非常普遍，低水平的維生素D被認為是2型糖尿病的危險因素。我們的研究也發現遼沈地區孕婦維生素D缺乏極其嚴重，分析原因可能與北方地區日照較少、飲食習慣、大氣污染等因素有關。

VDR蛋白屬于親核蛋白，其結構的改變就會對所介導的生物功能產生巨大影響，因此VDR的基因多態性也一直是國內外研究的熱點。人類VDR基因位于第12染色體長臂q13～14區，整個基因組由9個外顯子和8個內含子組成，存在多個限制性內切酶酶切位點，其中常見的是TaqⅠ、FokⅠ、BsmⅠ和ApaⅠ的酶切位點。

3.2 維生素D及受體基因與GDM：本研究發現GDM患者體內維生素D水平明顯降低，這與Khan的研究一致，他通過對維生素D與代謝性疾病的分析發現維生素D與2型糖尿病呈負相關。很多學者已經發現維生素D在調節細胞生長、存活、炎性反應和胰島素分泌方面發揮著作用。近年來，針對VDR基因與2型糖尿病及其合并癥的相關研究很多，但國內外的研究結果尚不一致。有學者[3]研究發現BsmⅠ和FokⅠ與2型糖尿病的發生有關，等位基因f可能是2型糖尿病的易感基因。在老年群體研究中發現，ApaⅠ酶切位點是與空腹血糖水平呈正相關。在本次研究中，我們發現VDR基因ApaⅠ酶切位點多態性與GDM的發生具有一定關聯的，GDM患者血清中1，25-二羥基維生素D的水平較低。我們通過研究發現GDM患者更容易在維生素D缺乏的個體中發生，補充維生素D，能夠有效改善胰島素的分泌和合成，對于GDM的早期干預具有一定的意義。