瑞舒伐他汀鈣固體分散顆粒溶出度測定方法的建立

黃河倩 徐俊 陳歡 曹丹婧 肖李錢

[摘要] 目的 建立瑞舒伐他汀鈣固體分散體顆粒溶出度的測定方法。 方法 運用固體分散體技術(shù)制備瑞舒伐他汀鈣固體分散體顆粒，采用紫外分光光度法測定其溶出度，紫外檢測波長為241 nm，并進行方法學考察，主要包括考察精密度、穩(wěn)定性以及重現(xiàn)性、回收率。 結(jié)果 在6.0～22.0 mg/L，瑞舒伐他汀鈣濃度與吸光度的線性關(guān)系良好，線性回歸方程為Y=0.032X+0.0292（r = 0.999 95），平均回收率為99.77%，RSD為0.94%，重現(xiàn)性的RSD為0.33%，溶出度達到90%以上。 結(jié)論 本方法可用于瑞舒伐他汀鈣固體分散顆粒溶出度的測定。

[關(guān)鍵詞] 瑞托伐他汀鈣;溶出度;固體分散體;顆粒;紫外分光光度法

[中圖分類號] R927.2? ? ? ? ? [文獻標識碼] A? ? ? ? ? [文章編號] 1673-7210（2019）08（a）-0038-04

[Abstract] Objective To establish a method for the determination of dissolution rate of Rosuvastatin Calcium Solid Dispersion Granules. Methods Rosuvastatin Calcium Solid Dispersion Granules were prepared by solid dispersion technology. The dissolution rate was determined by ultraviolet spectrophotometry. The ultraviolet detection wavelength was 241 nm. Methodological investigation was carried out， including precision， stability， reproducibility and recovery. Results At 6.0-22.0 mg/L， the linear relationship between the concentration of Rosuvastatin Calcium and absorbance was good. The linear regression equation was Y=0.032X+0.0292 （r = 0.999 95）. The average recovery rate was 99.77%， RSD was 0.94%， RSD was 0.33% and the dissolution rate was over 90%. Conclusion This method can be used to determine the dissolution of Rosuvastatin Calcium Solid Dispersion Granules.

[Key words] Rosuvastatin calcium; Dissolution; Solid dispersion; Granule; Ultraviolet spectrophotometry

高脂血癥又稱為高脂蛋白血癥，作為目前?；嫉娜硇约膊。涫怯捎谥敬x異常造成脂質(zhì)高于正常水平而導致的，長期發(fā)展可加速患者的全身動脈粥樣硬化病變[1]，他汀類藥物是高脂血癥調(diào)節(jié)的首選藥物。而瑞舒伐他汀作為第三代他汀類代表藥物，由英國阿斯利康A(chǔ)stra Zeneca公司原研，2003年在加拿大批準上市，商品名定為可定;該年8月經(jīng)美國食品和藥物管理局（AFDA）審核批準上市[2]。瑞舒伐他汀作為還原酶抑制劑，被稱為3-羥基-3-甲基戊二酰輔酶A（HMG-CoA），和其他他汀類藥物相比，其調(diào)節(jié)血脂能力更佳，逆轉(zhuǎn)動脈粥樣硬化能力更好，還可消減或減退斑塊，降低心血管病發(fā)率等[3-5]。瑞舒伐他汀鈣作為目前較新的他汀類藥物，其國內(nèi)制劑產(chǎn)品的市場規(guī)模突破60億元。而藥物制劑的種類除了常用的片劑、膠囊劑以及液體制劑外，各種新劑型層出不窮，如微囊劑[6-7]、透皮給藥控釋劑[8-9]、脂質(zhì)體[10-11]以及磁性給藥劑[12-13]等，固體分散體作為藥物制劑技術(shù)中的新劑型之一，這類速效制劑可以使藥物高度分散在載體中，增加難溶藥物的溶解度和溶出速率，提高生物利用度[14-21]。因此，瑞舒伐他汀鈣固體分散體溶出度的質(zhì)量控制尤為重要，在既往研究[22-25]的基礎(chǔ)上，本研究建立了紫外分光光度法測定瑞舒伐他汀鈣固體分散體顆粒的溶出度，為質(zhì)量控制提供參考。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

UV-1800PC-DS2型紫外分光光度計（上海美譜達儀器有限公司）;RC-8DS型溶出度測試儀（天津市拓普儀器有限公司）;BSA224S型電子天平[規(guī)格210 g×0.1 mg，賽多利斯科學儀器（北京）有限公司];BSA124S-CW型電子天平（規(guī)格120 g×0.01 mg，德國賽多利斯公司）;RE5299型水浴型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（上海亞榮生化儀器廠）;GHG9240A型電熱恒溫鼓風干燥箱（太倉精密儀器設(shè)備有限公司）;KQ-50E型超聲波儀（昆山市儀器有限公司）;13 mm×0.45 μm型水系針式樣品過濾器（上海楚定分析儀器有限公司）;BKH-C型玻璃儀器快速烘干器（鄭州長城科工貿(mào)有限公司）。

1.2 試藥

瑞舒伐他汀鈣對照品（批號：101028-201202，含量>97%，中國食品藥品檢定研究院）;羥丙甲纖維素（批號：170212，I型，粘度30 mPa·s，安徽山河藥用輔料有限公司）;共聚維酮（批號：20150901，S630，上海昌為醫(yī)藥輔料技術(shù)有限公司）;乳糖（批號：20170101，BR，含量≥99%，上海晶納試劑有限公司）;麥芽糖醇（批號：20160513，含量為95%;上海沃凱化學試劑有限公司）;淀粉（批號：161209，含量≥99%，上海滬試試劑有限公司）;聚乙烯吡咯烷酮（批號：20160101，含量≥99%，上海潤捷化學試劑有限公司）;十八酸鎂（批號：20170301，含量≥95%，上海滬試試劑有限公司）;滑石粉（批號：170916，含量≥99%，商丘市亮峰衛(wèi)生用品有限公司）;純化水：自制。

瑞舒伐他汀鈣固體分散顆粒：自制。制備方法：稱取1.0 g瑞舒伐他汀鈣，溶解于二氯甲烷液，另稱取共聚維酮2.0 g、羥丙甲纖維素4.0 g，邊攪拌邊加入含有瑞舒伐他汀鈣的二氯甲烷溶液中;轉(zhuǎn)入水浴型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中，設(shè)置30℃溫度進行旋蒸，去除溶劑二氯甲烷，取出瑞舒伐他汀鈣固體分散體。稱取輔料乳糖0.5 g、麥芽糖醇1.0 g、淀粉12 g，于研缽中分別研細，稱取瑞舒伐他汀鈣固體分散體1.0 g，用等量遞增法進行混合。另取聚乙烯吡咯烷酮0.3 g、十八酸鎂0.02 g、滑石粉0.02 g，加入混合好的原輔料，邊混合邊加入少量純化水，制成軟材后以40目篩篩過，所得濕顆粒產(chǎn)物均勻平鋪在不銹鋼盤中，50℃溫度下于恒溫干燥箱中保溫干燥20 min，過篩整粒，得到瑞舒伐他汀鈣固體分散體顆粒。

2 方法與結(jié)果

2.1 溶液制備

2.1.1 對照品溶液配制? 取瑞舒伐他汀鈣對照品1.0 mg，置于100 mL量瓶，加入80 mL純化水，超聲波儀超聲15 min溶解，定容，搖勻，備用。

2.1.2 供試品溶液配制? 稱取一定量自制的瑞舒伐他汀鈣固體分散體顆粒，按對照品溶液配制方法配制供試品溶液。

2.1.3 空白輔料溶液配制? 另取按處方比例配制的不含瑞舒伐他汀鈣的瑞舒伐他汀鈣固體分散體顆粒的空白輔料0.5 mg，置于50 mL量瓶，加純化水適量，超聲15 min溶解，0.45 μm水相濾膜過濾，取少量濾液，加純化水稀釋定容于10 mL容量瓶中，搖勻，即得空白輔料溶液。

2.2 檢測波長

在200～400 nm波長范圍內(nèi)，依據(jù)紫外分光光度計操作流程對對照品溶液進行全波長掃描，發(fā)現(xiàn)最大吸收波長在241 nm處;輔料在241 nm波長處測定無影響。故確定瑞舒伐他汀鈣固體分散體顆粒的檢測波長為241 nm。

2.3 標準曲線繪制

取瑞舒伐他汀鈣對照品10.0 mg，精密稱定，置100 mL容量瓶，其余按“2.1.2”項下制備方法制備對照品儲備液。依次精密量取對照品儲備液0.6、0.8、1.0、1.2、1.4、1.6、1.8、2.0、2.2 mL，分別置于10 mL容量瓶，以純化水定容，搖勻，于241 nm波長下測定其吸光度，以瑞舒伐他汀鈣濃度為橫坐標（X），以其對應(yīng)吸光度為縱坐標（Y）繪制標準曲線，得到線性回歸方程Y=0.032X+0.0292（r = 0.99 995）。瑞舒伐他汀鈣濃度在6.0～22.0 mg/L與吸光度線性關(guān)系良好。見圖1。

2.4 精密度和穩(wěn)定性試驗

2.4.1 精密度試驗? 根據(jù)2015年版《中華人民共和國藥典》（三部）（以下簡稱“《中國藥典》”）中的技術(shù)指南（9101藥品質(zhì)量標準分析方法驗證指導原則）可以得知，精密度和穩(wěn)定性試驗的RSD可接受范圍為≤6.0%。

分別取低、中、高3種不同濃度的對照品溶液，測定溶液日內(nèi)和日間的吸光度，重復測定每個溶液3次，計算日內(nèi)精密度和日間精密度。低、中、高3種不同濃度的日內(nèi)和日間精密度RSD均<1.0%，均符合相關(guān)要求。見表1。

2.4.2 穩(wěn)定性試驗? 取瑞舒伐他汀鈣固體分散體顆粒適量，按“2.1.2”供試品溶液的制備項下方法處理，分別制成濃度為12 mg/L的供試品溶液A和濃度為18 mg/L的供試品溶液B，分別在0、1、2、4、6 h于241 nm波長處測定其吸光度。其中A供試品溶液的RSD為0.36%，B供試品溶液的RSD為0.31%，兩種不同濃度瑞舒伐他汀鈣溶液測得吸光度數(shù)值的RSD均<1%，。表明瑞舒伐他汀鈣溶液在6 h內(nèi)穩(wěn)定性良好。

2.5 重現(xiàn)性試驗

稱取一定量瑞舒伐他汀鈣固體分散體顆粒，共6份，分別按“2.1.2”供試品溶液的制備項下方法處理，制成10.0 mg/L濃度的供試品溶液，于241 nm波長處測定吸光度，其RSD為0.33%。表明該方法的重現(xiàn)性良好。見表2。

2.6 回收率試驗

取已知含量的瑞舒伐他汀鈣固體分散體顆粒約1 g共9份，分別精密稱定，再分別加入高、中、低濃度的瑞舒伐他汀鈣對照品，按“2.1.2”供試品溶液的制備項下方法處理，于241 nm波長處測定，平均加樣回收率為99.77%，RSD為0.94%。表明該方法測定瑞舒伐他汀鈣的含量回收率高，準確性好。見表3。

2.7 溶出度的測定

精密稱取瑞舒伐他汀鈣固體分散體顆粒適量（相當于瑞舒伐他汀鈣20 mg），參照2015年版《中國藥典》（四部）中的方法（通則0931第二法），溶出測試儀參數(shù)設(shè)定：溶出液溫度為（37.0±0.5）℃，槳法轉(zhuǎn)動速度為50 r/min，依法操作。于3、5、10、15、20、30、45、60 min分別抽取溶出液5 mL（同時在溶出杯中補充5 mL同溫空白介質(zhì)保持體積不變），用水系針式樣品過濾器（0.45 μm）過濾，其續(xù)濾液，于241 nm波長處測定吸光度，計算并繪制溶出曲線。

選擇以純化水為溶出介質(zhì)，瑞舒伐他汀鈣的溶出度效果良好，其溶出度隨時間的變化曲線見圖2。取6袋瑞舒伐他汀鈣固體分散體顆粒，依據(jù)上述溶出度測定方法重復測定6次，測定結(jié)果顯示，各平行點測試的RSD均<2.0%。采用紫外分光光度法測定瑞舒伐他汀鈣固體分散顆粒溶出度時，溶出10 min后的溶出量均>90%，即較短的時間內(nèi)即可達到較高溶出量，提示瑞舒伐他汀鈣固體分散顆粒溶出效果好。

3 討論

溶出度作為制劑藥物最重要的檢測項目之一，根據(jù)溶出度試驗判斷、篩選處方、驗證結(jié)果是藥物制劑工藝設(shè)計、改進常用的方法。本研究制備了瑞舒伐他汀鈣固體分散顆粒，考察了采用紫外分光光度法進行瑞舒伐他汀鈣固體分散體顆粒溶出度的檢測方法，并對檢測波長、標準曲線、回收率、精密度和穩(wěn)定性以及重現(xiàn)性進行了考察。此外，本研究還考察了以0.1 mol/L鹽酸溶液和一定pH值的醋酸緩沖溶液為溶出介質(zhì)，瑞舒伐他汀鈣溶出情況均不太理想，最終優(yōu)化確定以純化水作為溶出介質(zhì)。選擇純化水作為溶出介質(zhì)，成本低廉，溶出效果佳，重現(xiàn)性好，體外溶出的試驗顯示瑞舒伐他汀鈣固體分散體顆粒溶出效果好，固體分散體技術(shù)能夠改進藥物的溶解性，提高藥物的治療效果。

作為先進的制劑技術(shù)之一，固體分散技術(shù)從1961年由日本科學家Sekiguchi和Obi提出用尿素為載體運用熱熔法制備固體分散體以來，至今已經(jīng)發(fā)展到以表面活性劑為載體材料的第三代新技術(shù)。傳統(tǒng)的溶劑法、熔融法等在速釋、緩（控）釋以及腸溶等固體分散體制備上已經(jīng)成熟，藥物溶出性大大提高。而各種新技術(shù)技術(shù)如超臨界流體技術(shù)、噴霧冷凍干燥技術(shù)以及高速靜電紡絲技術(shù)也越來越多應(yīng)用于固體分散體的制備中。運用靜電紡絲技術(shù)制備固體分散體，固體分散體的粒徑可以達到納米級，比表面積增大，増溶效果佳。將超臨界流體技術(shù)和噴霧冷凍干燥技術(shù)等用于制備固體分散體，如聯(lián)苯雙酯、非諾貝特和丹參酮等目標藥物，都呈現(xiàn)出不同的特點。應(yīng)用固體分散體技術(shù)制備固體分散體，除了關(guān)注提高藥物的溶出度外，應(yīng)從源頭上關(guān)注瑞舒伐他汀鈣固體分散體的體內(nèi)動力學及生物利用度，關(guān)注保持固體分散體長期穩(wěn)定性、在胃腸道的溶解度、對胃腸道的刺激性等不良反應(yīng)以及固體分散體老化問題等，為固體分散體技術(shù)制備提供更好的參考。

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（收稿日期：2019-01-18? 本文編輯：王? ?蕾）