Hcy、淀粉樣蛋白、TNF-水平變化在阿爾茨海默病中的表達及意義

張照陽，范立華，蔡慶春

(河南中醫藥大學第三附屬醫院檢驗科，河南 鄭州450000)

阿爾茨海默病(Alzheimer disease，AD)俗稱老年癡呆癥，是臨床常見的神經系統退變性疾病，多發生于老年人，以進行性認知障礙、記憶力減退、生活自理能力下降、精神人格改變為主要病變特征，具有起病隱匿、治療棘手的特點，嚴重影響老年人的生存質量和家庭關系。近年來我國已步入老齡化社會，AD的發病率逐年遞增，對AD的研究已成為熱門[1]。

目前臨床對于AD的發病機制尚未完全闡明，多數學者認為與大腦皮質彌散性萎縮、淀粉樣斑塊沉積、神經元丟失等密切相關[2]。有研究發現，同型半胱氨酸 (Homocysteine，Hcy)、淀粉樣蛋白(-amyloid proteinA1-42，A1-42)、 腫瘤壞死因子(Tumor necrosis factor，TNF)等炎癥介質與神經系統疾病、心腦血管疾病的發生和進展密切相關[3]，但與AD的關系研究較少，本研究探討了血清Hcy、A1-42和TNF-在AD中的表達及意義，現報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2015年2月至2017年12月在我院治療的AD患者87例(AD組)，納入標準：(1)符合美國神經病學、語言障礙和卒中研究索阿爾茨海默病和相關疾病學會制定的診斷標準；(2)Hachinski缺血指數量表評分＜4分；(3)臨床癡呆評定量表(CDR)評分＞1分；(4)患者家屬知情同意并簽署同意書。排除標準：(1)因其他中樞神經系統導致的癡呆；(2)因肝功能衰竭、甲狀腺功能亢進、朊蛋白病等引起的癡呆綜合征。同時選取100例健康志愿者作為對照組，兩組受試者性別、年齡等一般資料比較差異無統計學意義(P＞0.05)，見表1。

表1 兩組一般資料比較(，n)

表1 兩組一般資料比較(，n)

組別 例數 男/女 年齡(歲) 受教育年限(年)AD組對照組t/x2 P 87 100 43/44 49/51 0.003＞0.05 70.16±8.43 69.50±9.11 0.512＞0.05 10.23±2.33 9.89±1.88 1.104＞0.05

1.2 實驗方法 選取AD患者和健康志愿者進行比較，抽取空腹靜脈血檢測兩組血清Hcy、A1-42和TNF-水平，同時采用簡易智能量表(MMSE)評價認知功能。Hcy采用循環酶法檢測，檢測儀器為Hitachi-7600-010型全自動生化分析儀，按照標準操作規程執行操作。Aβ1-42、TNF-α采用雙抗體夾心酶聯免疫吸附法檢測，Aβ1-42試劑盒購自比利時Innogenetics公司，TNF-α試劑盒購自南京建成生物工程研究所，均嚴格按試劑盒說明書要求操作。

1.3 簡易智能量表(MMSE)評價 采用簡易智能精神狀態檢查量表 (MMSE)評價患者認知功能的變化，由患者獨立完成量表問題的回答。MMSE量表包括定向力、即刻記憶力、計算力、注意力、延遲記憶和語言等內容。總分為30分，得分越高表示認知功能越好，得分＜27分者認為存在認知功能障礙。

1.4 統計學處理 統計分析采用SPSS19.0軟件，計量資料采用()表示，組間比較使用獨立樣本t檢驗，計數資料比較使用x2檢驗，相關性采用Pearson相關分析。P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組血清Hcy、A1-42和TNF比較 AD組血清Hcy和TNF明顯高于對照組(p＜0.05)，而A1-42為明顯高于對照組(P＜0.05)，見表2。

2.2 兩組MMSE評分比較 AD組MMSE評分明顯低于對照組，差異比較有統計學意義(P＜0.05)，見表3。

2.3 相關分析 將AD患者MMSE評分與Hcy、A1-42和TNF進行相關分析，結果顯示AD患者MMSE評分與血清Hcy濃度呈負相關 (r=-0.455，P＜0.05)，而與 A1-42、TNF 無相關性(P＞0.05)。

表2 兩組血清Hcy、A1-42和TNF比較()

表2 兩組血清Hcy、A1-42和TNF比較()

組別 例數 Hcy(μmol/l)Aβ1-42(pg/ml)TNF-α(pg/ml)AD組對照組t P 87 100 17.60±4.11 11.43±3.03 11.779＜0.05 37.42±10.16 57.89±11.26-12.973＜0.05 60.43±7.80 37.22±9.14 18.531＜0.05

表3 兩組MMSE評分比較()

表3 兩組MMSE評分比較()

組別 例數 MMSE評分(分) t P AD組對照組87 100 3.70±0.97 29.01±1.22 -155.415 ＜0.05

3 討論

AD是一種神經系統退行性病變，患者常表現為進行性認知能力下降、精神和行為異常、日常生活能力下降，在當前老齡化社會，越來越多的AD不僅影響了患者的家庭幸福，也給社會醫療資源造成沉重的負擔[4]。AD的病因迄今未明，有研究認為家族史、女性、頭部外傷、病毒感染、甲狀腺疾病、受教育程度、母親生育能力過高或過低均有可能影響AD的發生和進展[5]。近年來隨著對AD的臨床研究和基礎研究的不斷深入，血管因素在AD發生、發展中的作用已受到學術界的高度重視[6]。大量研究已經證實，腦組織缺血、缺氧性改變、慢性炎癥所引起的應激反應是導致AD發生和進展的重要危險因素[7]。

人體自身是不能產生Hcy的，正常人血清中存在的微量Hcy是蛋氨酸的代謝產物，Hcy甲基化后生成蛋氨酸、S-腺苷甲硫氨酸，后者參與蛋白質、磷脂、DNA神經遞質等物質的代謝過程[8]。高Hcy血癥是血管性疾病的危險因子，與動脈粥樣硬化、急性腦梗死等疾病密切相關。tau蛋白可結合并穩定微管系統，過度磷酸化后tau蛋白與微管的結合力下降，微管穩定性不能得到很好的維持，影響細胞骨架的穩定，最終導致神經元退行性變[9]。有研究認為，Hcy水平升高可引起tau蛋白過度磷酸化，形成成對螺旋絲堆積于神經元內，導致神經原纖維纏結而影響神經元功能[10]。Hcy水平升高引起β淀粉樣蛋白沉積，引起神經元凋亡和淀粉樣變[11]。高Hcy血癥還會引起氧化應激反應，加重腦血管內皮細胞損傷，增加血管性癡呆的發生風險[12]。 本研究發現AD患者血清Hcy水平明顯高于正常人群，AD患者MMSE評分與血清Hcy濃度呈負相關，提示血清Hcy可在一定程度上反映AD患者的認知功能障礙程度。這可能與高Hcy血癥誘導腦血管病變有關，但其具體機制尚有待于進一步深入研究。

Aβ是淀粉樣前體蛋白裂解后的氨基酸片段，主要亞型包括Aβ1-40和 Aβ1-42。其中Aβ1-40是細胞代謝的正常產物，在正常人群中也可檢出，在臨床上并無診斷意義[13]。Aβ1-42的神經毒性較強，易發生聚集，是AD老年斑形成的始動因子。有研究發現，Aβ1-42在腦脊液標本中的特異性更高，血液標本的特異性略低[14]，但由于在臨床工作中血液標本的采集更加方便快捷、創傷小，因而本研究仍采取血液標本進行Aβ1-42的檢測，發現AD患者血清中Aβ1-42水平明顯高于正常人群。在高Hcy血癥患者體內氧自由基大量產生，導致血管內皮細胞發生損害。Hcy的神經血管毒性會增強β淀粉樣蛋白的神經毒性作用，引起神經元損害。

隨著神經免疫學的研究不斷深入，免疫因子引起的慢性炎癥反應在AD的發病過程中的重要作用已受到重視，TNF-α在免疫應答的早期階段啟動炎癥反應，誘導補體、氧自由基、一氧化氮、Aβ等大量合成，作用于膠質細胞和神經元，影響神經的生長和可塑性[15]。本研究發現AD患者血清TNF-α水平明顯高于正常人群，提示AD患者機體炎癥反應程度較高。但本研究發現，AD患者MMSE評分與血清 A1-42、TNF-α無相關性，AD患者的認知功能障礙程度與血清A1-42、TNF-α水平無關。

本文結果AD患者血清Hcy和表達明顯升高，而Aβ1-42表達明顯降低，其中Hcy可能是患者認知功能的影響因素，值得進一步研究。