SULT2A1、Bcl-2蛋白在子宮肌瘤組織中的表達及意義

(泰州市人民醫院婦科，江蘇 泰州225300)

流行病學研究顯示，子宮肌瘤的發病率在合并有相關高危基礎因素的育齡期女性群體中進一步上升[1]。子宮肌瘤的發生發展，能夠導致患者繼發性不孕的發生，增加了遠期臨床結局惡化的風險[2]。在探討子宮肌瘤發病的基礎性生物學領域中，發現細胞因子的改變，能夠通過影響到子宮平滑肌細胞的異常增殖，影響到平滑肌細胞的凋亡，進而參與到子宮肌瘤的發生過程。硫酸基轉移酶2A1(Sulfate transferase 2A1,SULT2A1)的表達下降，能夠通過誘導雌激素的磷酸化障礙，提高游離的雌激素水平，進而促進子宮平滑肌細胞膜上雌激素受體敏感性的上升，促進了平滑肌細胞的持續性增殖[3]；B淋巴細胞瘤-2基因(B lymphocytoma-2 gene,Bcl-2)的表達上升，能夠通過抑制平滑肌細胞的凋亡，降低平滑肌細胞的分解破壞速度，進而促進早期平滑肌細胞的異常分裂[4]。為了揭示SULT2A1、Bcl-2的表達與子宮肌瘤的病情關系，從而為臨床上子宮肌瘤的診療及預后隨訪提供參考，本次研究選取2017年1月至2018年9月我院保存的子宮肌瘤標本110例，探討了SULT2A1、Bcl-2的表達與子宮肌瘤的病情關系。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2017年1月至2018年9月我院保存的子宮肌瘤標本110例(子宮肌瘤組)，同時選取正常子宮肌層組織70例(正常子宮肌層組)，兩組一般資料比較差異無統計學意義(P>0.05)，見表1。納入標準：(1)均經病理學確診；(2)術前3個月內未使用過激素類藥物；(3)臨床資料保存完整。排除標準：合并有甲狀腺疾病、惡性腫瘤、糖尿病等嚴重基礎性疾病。

表1 兩組一般資料比較 (例)

1.2 實驗方法

石蠟包埋，連續性切片厚度3 μm，60 ℃烤片60 min，常規脫水后，采用EDTA進行抗原修復，加入10 μL蒸餾水，加入10%過氧化氫5il，室溫下孵育30 min,磷酸鹽緩沖液(PBS)洗滌3次*3 min，加入SULT2A1、Bcl-2蛋白的單克隆抗體(1∶1 000購自羅氏檢測公司)，37 ℃孵育60 min，PBS洗滌3次*3 min，加入HRP標記的SULT2A1、Bcl-2蛋白二抗(1∶2 000購自羅氏公司)，37 ℃孵育20 min，PBS洗滌3次*3 min，加入DAB后，PBS沖洗和復染，脫水后在顯微鏡下進行觀察。

1.3 結果判斷

細胞核內或胞漿出現棕黃色顆粒為陽性細胞，根據半定量積分法，對染色強度和陽性細胞比例進行評分，染色強度：無著色為0分，淺黃色為1分，棕黃色為2分，棕褐色為3分；陽性細胞比例：<5%為0分，5%～25%為1分，26%～50%為2分，51%～75%為3分，>75%為4分。最終得分為染色強度和陽性細胞比例得分之積，分數<4分為陰性表達，≥4分為陽性表達。

1.4 統計學處理

采用SPSS19.0進行統計分析，計數資料比較使用χ2檢驗，相關性采用Spearman秩相關分析，以P<0.05表示差異有統計學意義。

2 結 果

2.1 子宮肌瘤組和正常子宮肌層組SULT2A1、Bcl-2蛋白表達

子宮肌瘤組SULT2A1陽性表達率明顯低于正常子宮肌層組(P<0.05)，而Bcl-2蛋白陽性表達率明顯高于正常子宮肌層組(P<0.05)，見表2。

表2 子宮肌瘤組和正常子宮肌層組SULT2A1、Bcl-2蛋白表達 (例,%)

2.2 子宮肌瘤組不同分期SULT2A1、Bcl-2蛋白表達

子宮肌瘤組分泌期Bcl-2蛋白陽性表達率明顯高于增生期(P<0.05)；子宮肌瘤組分泌期和增生期SULT2A1蛋白陽性表達率比較差異無統計學意義(P>0.05)。見表3。

表3 子宮肌瘤組不同分期SULT2A1、Bcl-2蛋白表達 (例,%)

2.3 不同大小子宮肌瘤SULT2A1、Bcl-2蛋白表達

直徑<2 cm和≥2 cm子宮肌瘤組織SULT2A1、Bcl-2蛋白陽性表達率比較差異無統計學意義(P>0.05)，見表4。

表4 不同大小子宮肌瘤SULT2A1、Bcl-2蛋白表達 (例,%)

2.4 相關性分析

子宮肌瘤組織SULT2A1和Bcl-2蛋白表達無相關性(rs=-0.008，P>0.05)，見表5。

表4 相關性分析

3 討 論

遺傳易感性因素、雌激素受體敏感性的改變，均能夠促進子宮肌瘤的發生，在年齡大于35歲的育齡期女性人群中，子宮肌瘤的發病率可進一步的上升[5]。臨床上子宮肌瘤的發生，不僅能夠嚴重影響到患者的工作學習，同時還能夠增加子宮肌瘤交界性或者惡性病變的風險，增加子宮肌瘤肉瘤樣變的可能[6-7]。現階段缺乏對于子宮肌瘤發病或者預后評估的生物學因子，而通過對于相關蛋白的分析，能夠為臨床上子宮肌瘤的預防、治療后復發的隨訪提供依據。部分研究者認為，雌激素受體a的表達，能夠在子宮肌瘤的發生過程中發揮作用。但雌激素受體a的表達與子宮肌瘤患者的臨床病理特征并無明顯的關系。本次研究通過對于子宮肌瘤患者體內SULT2A1、Bcl-2的表達分析研究，不僅能夠揭示子宮肌瘤的發病機理，同時能夠為臨床上子宮肌瘤的診療提供理論方面的參考。

SULT2A1是磷酸基團轉移酶，其能夠通過對于雌激素及睪酮等激素受體的修飾，進而影響到雌激素的作用效果，干預到雌激素下游信號通路的激活程度。SULT2A1結構上含有的多重絲氨酸結構，能夠通過磷酸修飾平滑肌細胞膜上的糖蛋白，進而導致雌激素敏感性的改變[8]；Bcl-2是凋亡相關調控因子，其能夠通過抑制上皮細胞的凋亡，降低子宮平滑肌細胞的凋亡比例，促進平滑肌細胞間質成分的纖維化，進而導致肌瘤的發生發展。相關臨床研究還認為，Bcl-2能夠影響到子宮肌瘤的新生血管的形成，促進平滑肌組織的血流灌注[9]。相關研究已經探討了SULT2A1的表達與子宮肌瘤的關系，認為在子宮肌瘤患者中，SULT2A1的表達下降與肌瘤的早期發生密切相關[10]，但缺乏對于SULT2A1和Bcl-2在子宮肌瘤患者不同月經周期中的分析。

本次研究通過免疫組化研究了SULT2A1和Bcl-2在子宮肌瘤病灶組織中的表達情況，發現在子宮肌瘤病例組患者中，SULT2A1蛋白的表達陽性率明顯的下降，而Bcl-2蛋白的表達陽性率明顯的上升，提示了SULT2A1和Bcl-2的差異性表達均能夠顯著影響到子宮肌瘤的發生發展過程。分析其內在的原因，考慮由于SULT2A1和Bcl-2的下列幾個方面的病理性改變有關[11-14]：(1)SULT2A1的表達下降，失去了其對于雌激素下游NF-KB信號通路的修飾調控作用，導致平滑肌細胞核DNA的分裂速度明顯加快；(2)Bcl-2的表達上升，能夠提高平滑肌細胞周期中G1/S期的比例，提高了平滑肌細胞的持續性擴增能力，最終促進了肌瘤瘤體的形成。王隨鄖等[15]研究者也發現，在子宮肌瘤病灶組織中，Bcl-2蛋白的表達陽性率可平均上升45%以上，在多發性子宮肌瘤或者子宮肌瘤病程較長的患者中，Bcl-2蛋白的表達陽性率可進一步的上升。本次研究還探討了不同月經周期中SULT2A1和Bcl-2的表達，發現在分泌期患者中，Bcl-2蛋白的表達陽性率明顯的上升，高于增生期患者，統計學差異顯著，提示了月經周期可能影響到了Bcl-2蛋白的表達，這主要由于不同月經周期的肌瘤組織，其瘤體細胞膜受到周期性雌孕激素的調控，導致凋亡相關蛋白Bcl-2的轉錄活性明顯上升，最終促進了Bcl-2蛋白的合成和釋放。但本次研究并未發現SULT2A1的表達與月經周期的關系，提示SULT2A1蛋白的表達具有一定的穩定性。在不同子宮肌瘤病灶直徑的患者中，并未發現SULT2A1和Bcl-2的表達差異，提示SULT2A1和Bcl-2的表達與子宮肌瘤患者的一般性臨床特征并無明顯的關系。

綜上所述，在子宮肌瘤患者病灶組織中，SULT2A1蛋白的表達明顯下降，而Bcl-2蛋白的表達明顯上升，說明SULT2A1和Bcl-2與子宮肌瘤發生發展有密切關系。