碘過量對成年Balb/c小鼠小腦形態學的影響

宋翠榮 張海峰

摘 要：[目的]探討碘過量對Balb/c小鼠小腦形態學的影響。方法 取斷乳一個月的Balb/c小鼠，雌雄各半，隨機分為3組：適碘組（NI），10倍碘組（10HI），50倍碘組（50HI）。給與不同劑量碘化鉀飼養三個月后處死取大腦。 焦油紫染色和鍍銀染色觀察小腦形態并進行計量學分析。[結果]與同月份NI組比較，實驗3個月親代各碘過量組小腦形態學無明顯改變（P>0.05）。結論 碘過量不會造成成年Balb-c小鼠的小腦形態學變化。

關鍵詞：高碘;小鼠;小腦

小腦維持機體平衡，調控運動協調功能。碘攝入量過低會使仔鼠小腦發育受阻，國內某些學者在碘過量的小鼠也發現其腦發育落后，盡管碘過量會使小腦功能障礙的研究已有報道，但尚缺乏進一步細致的定量研究。為進一步探明碘過量對小腦功能障礙的影響，本實驗選擇3個月成鼠作為觀研究對象，采用焦油紫染色和鍍銀染色觀察不同劑量碘對小腦皮質和髓質形態的影響。

1 材料和方法

1.1 實驗動物分組與飼養方法

1.2 實驗方法和實驗指標

1.2.1 腦絕對、相對重量

以上三組動物分別喂養至三個月及六個月，用斷頸的方法把動物處死，稱體重后完整取出腦組織，用冷鹽水清洗后濾紙拭干，接著用1/1000分析天平稱重，計算腦組織的相對重量（全腦重量除以其體重）。

1.2.2 組織切片及染色

把固定液中的大腦租出，在正中矢狀面切開，右側大腦進行石蠟包埋。在距端腦（嗅腦）9mm處開始作冠狀連續切片，厚度5μm，每隔6張取一張，每只動物取8張，貼于涂有蛋白甘油的載玻片，作焦油紫染色， 做硝酸銀染色的切片厚度為20μm，每隔5張取一張。

1.2.3 形態計量學分析

依照大鼠斷層圖譜定位在小腦原裂及其前方的山頂區，拍攝低倍鏡下（10×10）下小腦圖像（焦油紫染色），繼而在每個小葉皮質的側壁處隨機選取8個部位測量其分子層、顆粒層厚度;然后選用油鏡（100×10）拍攝此區域的蒲肯野細胞層蒲肯野細胞的圖像，計算蒲尼氏體在肯野細胞胞體中的面積比，每張切片隨機選10個細胞，每只小鼠計量8張切片。

1.3 統計學方法

測量數據以均數±標準差（x±s ）表示，采用SPSS21.0統計學軟件包進行統計學分析。

2 結果

2.1 全腦絕對重量和相對重量（見表1）

經方差分析：各碘過量組腦絕對重量和相對重量和適碘組比沒有明顯變化。

2.2 小腦的形態學觀察

2.2.1 焦油紫染色

在低倍鏡（4×10）觀察適碘組小鼠，其表面是小腦皮質即灰質，皮質下為髓質即白質，表面被淺溝分隔成許多個小葉片。小腦皮質從外到內分為三層：即分子層、蒲肯野細胞層和顆粒層。高倍鏡（40×10）可見分子層較厚，神經元較少;蒲肯野細胞層由一層蒲肯野細胞胞體組成;顆粒層有密集的顆粒細胞和一些高爾基細胞組成。油鏡（100×10）下觀察蒲肯野細胞，可見其胞體略呈梨形，核大而圓、位于中央染色淺、核仁明顯，胞質內可見染色為深紫色、顆粒狀或斑塊狀尼氏體。各碘過量組小鼠小腦鏡下形態與同月份相近，未見明顯改變。

2.2.2 鍍銀染色觀察

各實驗組小鼠小腦皮質各層分層明顯，小腦山頂區蒲肯野細胞可見棕黑色蒲肯野細胞，其胞體成梨形，從頂端發出2～3條粗的主樹突伸向分子層，樹突的分枝繁多，數突棘多而密集，未見到其軸突。各實驗組小鼠小腦前葉的蒲肯野細胞密集程度和著色深淺未見明顯不同。

2.3 形態計量學分析結果

焦油紫染色形態計量學分析結果（分子層、顆粒層厚度和尼氏體占胞體的面積比）。

經統計學分析：各碘過量組與同月份NI組比較，其小腦山頂區的分子層、顆粒層厚度均無明顯改變（P>0.05）。

經統計學分析：實驗3個月各碘過量組與同月份NI組比較小腦蒲肯野細胞層蒲肯野細胞胞體中尼氏體的面積比均無明顯差異（p>0.05）。

3 討論

碘是合成甲狀腺激素的主要原料，甲狀腺激素是調節腦發育的一種重要激素。甲狀腺激素通過促進細胞的增殖;合成微管結合蛋白和微管蛋白，增加微管的組裝;促進軸突、樹突的生長;促進突觸的發生和髓鞘的形成等途徑刺激神經系統的發育，影響小腦神經細胞的增殖分化、神經元的移行、神經突起的分支、軸突的延伸、髓鞘化和突觸形成等。

本研究結果表明，機體攝入過量的碘時，甲狀腺會呈現較強的自我保護和代償能力，使其自身的含碘量維持在一個相對穩定的水平，來穩定甲狀腺的功能。當碘攝入量為正常攝入量的50倍以內時，不會明顯影響仔鼠小腦的發育。但當仔鼠長期處于嚴重碘過量，即大于生理需要量50倍以上時，由于長期攝入過多的碘造成甲狀腺功能的失代償，甲狀腺激素水平減少，會引起小腦發育落后。本實驗結果為碘過量的防治提供了有力的實驗依據，并可能為進一步探明碘過量引起小腦功能障礙的機制提供了新的定量形態學資料。

參考文獻

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