全自動血細胞分析儀與血涂片細胞形態學在血常規檢驗中的聯合應用分析

張海燕，袁甜

泗陽縣人民醫院檢驗科，江蘇宿遷 223700

血液疾病的發生一般與血細胞形態結構、數量的異常改變有關，血常規檢查結果能夠較為準確地反映血細胞性質，是血液科臨床檢驗中的重要項目[1-2]。全自動血細胞分析儀具有操作方便、檢驗快速等優勢，還設置有報警系統，若血細胞在分類、計數上出現異常，則能夠及時得到反饋，但血細胞分析儀對于血細胞的形態結構的檢驗存在欠缺、儀器系統性誤差較大等問題，因此需借助血涂片鏡檢進一步確認，以避免漏診、誤診情況[3-4]，為了探討全自動血細胞分析儀聯合血涂片細胞形態學檢驗方法在血常規檢驗中的應用價值，該研究回顧性分析比較了2018年3—10月該院檢驗科接收的84例血液樣本采用聯合檢驗、血細胞分析儀獨立檢驗的結果，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取該院檢驗科接收的血液樣本共84例，所選對象均為入院進行體檢者。血樣收集、涂片后，首先利用全自動血細胞分析儀對上述樣本進行血常規指標檢驗，后進行細胞形態學鏡檢、細胞計數等復檢項目，納入標準：所選患者均自愿參與該次研究，簽訂研究同意協議書，研究經醫院倫理委員會批準。排除標準：研究排除合并惡性腫瘤疾病、精神疾病以及急性傳染病的患者。該組受試者年齡13～84歲，平均年齡（43.9±5.27）歲，男性 50 例、女性 34 例。

1.2 方法

研究對象均保證在空腹8 h條件下于早間7：00-9：00完成血樣采集，抽血方法為肘靜脈采血法，血量為2～3 mL，將血樣分裝于無菌試管中，加入3 mg的EDTA-K2做抗凝處理，混勻后于室溫條件靜置30 min，送至檢驗科檢驗。臨床檢驗操作人員按《臨床檢驗操作規程和質控標準》并完成血液涂片、染色，染色方法為瑞特-姬母薩染色混合染色法。首先利用邁瑞CAL8000全自動血細胞流水線檢測系統及配套試劑對血樣進行檢驗，對 WBC、PLT、NE、LY、EO、MO 等血常規指標進行計數，并對血細胞形態、體積等進行初步描述和篩查分析；后將血涂片送至50倍鏡油鏡下對有核細胞進行復檢 （包括形態學鏡檢和細胞計數、血液寄生蟲檢查等項目），為了杜絕細胞變異對結果的影響，全部樣本均應在送檢后的3 d內完成檢驗和復檢的全部項目，并制成檢驗報告。

1.3 血常規異常樣本的陽性篩選標準

（1）血細胞分析儀，若符合下述結果之一檢出血常規陽性：①白細胞計數（WBC）＞28.0×109/L 或＜3.0×109/L；②血小板（PLT）＞300.0×109/L 或＜60.0×109/L；③中性粒細胞計數（NE）＞7.5×109/L 或＜2.0×109/L；④淋巴細胞計數（LY）：＞4.0×109/L 或＜0.8×109/L；⑤嗜酸性粒細胞占白細胞總數百分比（EO）：＞0.08%或＜0.004%；⑥單核細胞計數（MO）＞0.8×109/L 或＜0.3×109/L。

（2）血涂片細胞形態學，若符合下述條件之為陽性：①符合血細胞分析儀血常規異常標準之一；②晚幼粒（晚幼紅）：胞體直徑 10～16 μm，細胞核變粗、胞質增多呈紅色、充滿中性顆粒；③異型淋巴細胞（異淋）；④中性粒細胞中性毒變：中性粒細胞大小不均、核固縮、核左移、空泡變性、顆粒增粗；⑤紅細胞形態異常：紅細胞大小不一、呈現球形、橢圓形、靶形等不規則形狀，中央蒼白區擴大。

1.4 統計方法

采用SPSS 20.0統計學軟件分析數據，計數資料以[n(%)]表示，組間差異比較采用 χ2檢驗，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

84份血樣中，血細胞分析義陽性檢出率為47.6%，血涂片、血細胞義聯合陽性檢出率為65.5%（P＜0.05）。 血細胞分析技術檢驗結果中，WBC、PLT、NE、LY、EO、MO等血常規指標檢出陽性率分別為45.2%、28.6%、35.7%、21.4%、2.4%和4.8%；聯合檢驗結果顯示，上述指標檢出陽性率分別為47.6%、30.9%、39.3%、22.6%、11.9%和15.5%，其中兩組檢查結果中EO、MO陽性率、總陽性檢出率比較差異有統計學意義（P＜0.05），其余血常規項目差異無統計學意義（P＞0.05），見表 1。

表1 全自動血細胞分析技術、血涂片細胞形態學分析技術對84例血液樣本的血常規項目陽性檢出率比較[n(%)]

3 討論

血液疾病的發生與血細胞結構形態、功能和比例發生異常改變密切相關，血常規檢查主要反映血細胞的分類比例、計數情況，可為血液疾病和關聯性疾病的臨床診治提供重要參考[5]。

全自動血細胞分析儀基于電學原理，操作簡便、檢測快速、精確度高，較傳統人工鏡檢更具優勢[6]，然而，臨床目前使用的血細胞分析儀一般不具備細胞形態學分析功能，而血細胞的形態結構分類又較為復雜，細胞變異則能對染色和分類造成巨大影響[7]；此外，受操作人員因素、儀器系統性誤差的影響，不同型號的血細胞分析儀對于相同血液樣本的分析結果又具有較大的差異性，這些因素都使獨立的血細胞分析儀在血常規臨床檢驗中的應用受到局限[8]。然而人工的血液涂片鏡檢雖然具有速度慢、工序復雜等缺點，但在高倍顯微鏡下血細胞的形態學特征都能得到立體、直觀反映，從而使血細胞的分類和計數更加精確，也是血常規檢驗的金標準，可為血細胞分析儀檢驗結果提供補充和確證[9]。

該組84份樣本的血細胞分析結果顯示，WBC、PLT、NE、LY、EO、MO 幾項血常規指標陽性檢出率分別為 45.2%、28.6%、35.7%、21.4%、2.4%和4.8%，總計47.6%； 聯合檢驗結果顯示，WBC、PLT、NE、LY、EO、MO幾項血常規指標陽性檢出率則分別為47.6%、30.9%、39.3%、22.6%、11.9%和 15.5%，總計 65.5%，經統計學分析比較發現，血細胞分析儀和血涂片、血細胞儀聯合檢驗方法對84例血樣的血常規檢驗結果中的EO、MO陽性率、總陽性檢出率比較差異有統計學意義 （P＜0.05），其余血常規項目差異無統計學意義（P＞0.05），這也與楊巍[10]關于血涂片鏡檢結果中對中性粒細胞、單核細胞、嗜酸性細胞、淋巴細胞鏡檢結果分別為56.32%、9.34%、3.12%、25.87%，與血細胞分析儀檢測結果58.15%、10.02%、2.98%、24.69%比較差異無統計學意義（P＞0.05），血涂片鏡檢下的嗜堿性細胞鏡檢結果為0.82%與血細胞分析儀檢驗結果0.48%比較差異有統計學意義（P＜0.05）的結果符合。

綜上所述，在血常規檢驗中聯合應用血細胞分析技術、血涂片細胞形態學檢驗技術有助于提高血常規異常樣本的檢出率，彌補血細胞技術在細胞形態學檢驗方面的不足。