血清淀粉樣蛋白A聯(lián)合細(xì)胞角蛋白片段-1檢測對非小細(xì)胞肺癌的診斷價(jià)值

張晶 賴飛 蔡建興 葉輝銘 梁小亮

(1廈門大學(xué)附屬婦女兒童醫(yī)院 廈門市婦幼保健院檢驗(yàn)科，福建 廈門 361003；廈門醫(yī)學(xué)院附屬第二醫(yī)院 2輸血科；3檢驗(yàn)科)

肺癌目前已成為嚴(yán)重威脅人類健康和生命的常見惡性腫瘤，在我國也早在2008年取代肝癌成為發(fā)病率最高的惡性腫瘤〔1～3〕。其中非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)占肺癌患者的70%～80%〔4～6〕，由于NSCLC被診斷時(shí)常為晚期，因此患者無法進(jìn)行有效治療，5年生存率常常<15%，肺癌的血清腫瘤標(biāo)志物檢測因其操作簡便、價(jià)格低廉、無毒副反應(yīng)等優(yōu)勢，已經(jīng)成為肺癌早期診斷、療效評(píng)價(jià)和預(yù)后判斷的重要輔助參考指標(biāo)〔7〕。血清腫瘤標(biāo)志物是由腫瘤細(xì)胞分泌入血并且可以反映腫瘤存在的特異性或相關(guān)性抗原。腫瘤標(biāo)志物可由腫瘤細(xì)胞或非腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生，但在數(shù)量和性質(zhì)上有明顯差別；一種腫瘤可以有多種腫瘤標(biāo)志物并存，各個(gè)腫瘤間交叉和界限不清。因此單項(xiàng)腫瘤標(biāo)志物在腫瘤人群中的表達(dá)率并不高,僅用單項(xiàng)指標(biāo)進(jìn)行腫瘤的篩查或監(jiān)測,易于造成腫瘤的漏檢或假陽性結(jié)果。為使腫瘤的檢出率提高，可采用多項(xiàng)指標(biāo)聯(lián)合檢測，起到互補(bǔ)作用。研究表明，聯(lián)合檢測優(yōu)于單項(xiàng)檢測，不同腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合檢測可明顯提高腫瘤檢出率，但在最佳組合問題上，仍需做大量的探討和研究,才能獲取基本認(rèn)同〔8～10〕。本文通過對血清癌胚抗原(CEA)、細(xì)胞角蛋白片段(CYFRA)21-1、神經(jīng)元特異性烯醇化酶(NSE)、血清淀粉樣蛋白(SA)A四個(gè)指標(biāo)的檢測，探討其單獨(dú)檢測及兩兩聯(lián)合檢測對NSCLC的診斷和鑒別診斷的意義，從而得到準(zhǔn)確、方便、快捷的檢測組合。

1 材料與方法

1.1基本資料 收集廈門醫(yī)學(xué)院附屬第二醫(yī)院2018年1～12月NSCLC、良性肺病變、健康體檢受試者各40例，年齡>60歲，其中NSCLC組男25例，女15例，診斷標(biāo)準(zhǔn)參照我國2015版肺癌診療指南，所有入選患者經(jīng)過病理學(xué)或組織學(xué)確診，并將其進(jìn)行分期，其中Ⅰ～Ⅱ期28例，Ⅲ～Ⅳ期12例；良性肺病變組男22例，女18例，包括肺炎20例，肺結(jié)核12例，肺部纖維瘤8例；健康對照組男20例，女20例，無肺部疾病，體格檢查無異常，既往無腦、心、肝、腎等疾病。

1.2主要儀器與試劑 和邁FIC-S100型熒光免疫分析儀；羅氏E601電化學(xué)發(fā)光儀：CYFRA21-1 試劑盒、NSE、CEA試劑盒均為羅氏儀器配套原裝試劑盒；SAA試劑盒為廈門波生生物技術(shù)有限公司。

1.3方法

1.3.1標(biāo)本采集 所有實(shí)驗(yàn)對象空腹靜脈采血5 ml，離心后分離血清,-80℃冷凍保存。

1.3.2標(biāo)本檢測 正常范圍CYFRA21-1、NSE、CEA等指標(biāo)采用電化學(xué)發(fā)光法進(jìn)行檢測；SAA則采用量子點(diǎn)免疫熒光法檢測。CYFRA21-1<3.3 ng/ml；NSE<16.3 μg/L；CEA<5 μg/L；SAA<10 ng/ml，檢測結(jié)果超過正常值即判定為陽性，聯(lián)合檢測中其中任何一項(xiàng)超過正常值即判定為陽性。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS22.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行方差分析、t及χ2檢驗(yàn)。

2 結(jié) 果

2.1各組CEA、CYFRA21-1、NSE及SAA水平比較 健康對照組與良性肺疾病組血清CEA、CYFRA21-1、NSE、SAA水平比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；健康對照組與NSCLC組血清CEA、CYFRA21-1、NSE、SAA水平比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；良性肺疾病組與NSCLC組血清CEA、CYFRA21-1、NSE水平比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，血清SAA水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，見表1。

2.2不同臨床分期NSCLC患者CEA、CYFRAZ1-1、NSE及SAA水平比較 中晚期(Ⅲ～Ⅳ期)與早期NSCLC(Ⅰ～Ⅱ期)患者血清CYFRA21-1、SAA水平比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，血清CEA、NSE水平比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，見表2。

表1 各組CEA、CYFRA21-1、NSE及SAA水平比較

與健康對照組比較：1)P<0.05；與良性肺疾病組比較：2)P<0.05

表2 不同臨床分期NSCLC患者CEA、CYFRA21-1、NSE及SAA水平比較

與早期比較：1)P<0.05

2.3各組CEA、CYFRA21-1、NSE及SAA陽性率比較健康對照組及良性肺疾病組CEA、CYFRA21-1、NSE的陽性率明顯增高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；而SAA在NSCLC組和良性肺疾病組分別與健康對照組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，但NSCLC組與良性肺疾病組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，見表3。

表3 各組CEA、CYFRA21-1、NSE及SAA陽性率比較〔n(%)，n=40〕

與NSCLC組比較：1)P<0.05；與良性肺疾病組比較：2)P<0.05

2.4血清CEA、CYFRA21-1、NSE、SAA單獨(dú)檢測診斷NSCLC的ROC曲線下面積(AUC)分別為0.774、0.822、0.634、0.805，兩兩聯(lián)合檢測診斷NSCLC的ROC AUC：CEA+CYFRA21-1為0.736；CEA+NSE為0.678；CEA+SAA為0.795；CYFRA21-1+NSE為0.712；CYFRA21-1+SAA為0.923；NSE+SAA為0.734(見圖1)。CYFRA21-1與SAA聯(lián)合檢測對NSCLC的診斷敏感性、特異性、陽性預(yù)測值、陰性預(yù)測值分別為92.4%、88.5%、87.6%，82.3%均顯著高于各項(xiàng)單獨(dú)檢測及其他兩兩聯(lián)合檢測(P<0.05)。

圖1 各指標(biāo)的ROC曲線

3 討 論

細(xì)胞角蛋白(CK)是一種中間微絲蛋白，在上皮細(xì)胞中特異表達(dá)，通常在惡性腫瘤中穩(wěn)定持續(xù)表達(dá)〔11,12〕,惡性腫瘤細(xì)胞死亡或溶解時(shí)會(huì)激活蛋白酶，加速CK降解，釋放CYFRA21-1到血液中。CYFRA21-1是可溶性的CK19片段，是一種酸性蛋白質(zhì)，廣泛存在于多種組織，尤其惡性腫瘤組織呈高表達(dá)，研究顯示〔13〕，在NSCLC患者血清中的CYFRA21-1水平明顯升高，其對NSCLC的敏感性超過50%。SAA由被激活的巨噬細(xì)胞和成纖維細(xì)胞在肝臟中合成，是一類多基因編碼的多形態(tài)蛋白家族〔14〕，是組織淀粉樣蛋白A的前體物質(zhì)，在正常人血液中有少量存在。當(dāng)人體處于炎癥、疾病活動(dòng)期和大面積組織損傷時(shí)SAA則快速升高，早在20世紀(jì)70～80年代,就有學(xué)者用放射免疫法(RIA)和放射免疫擴(kuò)散法(RID)檢測SAA,發(fā)現(xiàn)該蛋白不僅僅和淀粉樣變有關(guān),與惡性腫瘤之間可能也存在著千絲萬縷的關(guān)系。當(dāng)時(shí),一部分學(xué)者發(fā)現(xiàn)該指標(biāo)在癌癥人群中的血清水平高于健康人群,尤其在肺癌患者中水平最高〔15～17〕。本研究顯示早期NSCLC患者檢測血清CYFRA21-1、SAA水平對于疾病的早診斷、早治療起著至關(guān)重要的作用，CYFRA21-1+SAA聯(lián)合檢測可提高早期NSCLC的診斷價(jià)值。