液-液萃取法檢測白酒中塑化劑破乳化方法探討

曹榮升，王少磊，王靈紅，金曉麗，黃 瑜，項興本

（安徽迎駕貢酒股份有限公司，安徽霍山 237200）

塑化劑，學名“鄰苯二甲酸酯類”，是環境激素類物質中的一類重要化合物，廣泛用于食品接觸類材料、化妝品、玩具等產品中，是增塑劑的組成部分，它能有效增加產品的可塑性和柔韌性[1]。研究表明，鄰苯二甲酸酯類具有較強生殖毒性，長期接觸易導致男子精子數量減少，活力降低，嚴重危害生殖健康，長期蓄積在人體內，易引起基因突變、胚胎畸形、肝臟癌變等[2-3]。白酒在中國具有幾千年的歷史，是我國傳統飲料酒，其中主要成分為酒精及水，而鄰苯二甲酸酯類易溶于酒精。國家明令禁止白酒中添加鄰苯二甲酸酯類化合物，但是由于生產、運輸中的一些環節問題，致使鄰苯二甲酸酯類化合物遷移到白酒中對白酒造成污染，從而對人體產生傷害[4]。

目前國內對白酒中塑化劑大都采用GC-MS檢測[5-8]，其中液-液萃取法具有快速、簡單、成本低的優點而被廣泛用來進行白酒樣品的前處理，然而對液-液萃取方法中產生的乳化問題均未有系統研究。查閱文獻[9-12]，對于液-液萃取產生的乳化現象常采用長時間靜置、冷凍、加熱、過濾、鹽析、補加溶劑、超聲、離心等方法消除。本文結合實際，研究了適合本試驗消除乳化現象的方法，系統考察了方法的回收率以及重復性，為液-液萃取法測定白酒中塑化劑提供了實驗依據。

表1 白酒中DEP、DEHP保留時間、定量離子、定性離子及其豐度比

1 材料與方法

1.1 材料、試劑及儀器

酒樣：安徽迎駕貢酒股份有限公司生產的3個液-液萃取時產生乳化現象的42度、52度、60度白酒樣品，并分別編號為1#、2#、3#樣品。

試劑：塑化劑混標溶液（德國Dr公司）、正己烷（色譜純）；氯化鈉（優級純）。

儀器設備：安捷倫氣相色譜-質譜儀（7890A GC-5975C）、氮吹儀、漩渦混合器、離心機、超聲波清洗儀、水浴鍋、冰箱等。

1.2 試驗方法

1.2.1 標曲配制

將塑化劑混標溶液（100 mg/L）用正己烷逐級稀釋至2.0 mg/L、1.5 mg/L、1.0 mg/L、0.5 mg/L、0.2 mg/L的標準系列溶液待用。

1.2.2 樣品處理

準確吸取5.0 mL酒樣于10 mL比色管中，40℃氮吹去除酒精，冷卻至室溫，加入2.0 mL正己烷，混勻，靜置分層，取上層有機相供GC-MS分析。

1.2.3 儀器條件

1.2.3.1 色譜條件

色譜柱：安捷倫HP-5MS色譜柱（30m×0.25mm×0.25μm）；載氣：氦氣（純度≥99.999%），流速：1 mL/min；進樣量：1.0μL；進樣口溫度：250℃；GC與MS接口溫度：280℃；程序升溫：65℃（保持1 min）→以10℃/min升溫至190℃（保持3 min）→以5℃/min升溫至280℃（保持2 min）。

1.2.3.2 質譜條件

電離方式：EI；電子能量：70 eV；離子源溫度：230℃；四級桿溫度：150℃；監測方式：SIM；溶劑延遲：7 min；白酒中2種鄰苯二甲酸酯保留時間、定性離子、定量離子及其豐度比見表1，圖1為塑化劑混標溶液色譜圖。

圖1 塑化劑混標溶液全掃描離子色譜圖

2 結果與分析

2.1 破乳方法初選

對于因液-液萃取而形成的乳化現象常用破乳方法，主要有兩類，分別是化學破乳法及物理破乳法。化學破乳法是通過改變兩相間的平衡來達到破乳目的，對于水及有機相形成的乳化液，采用鹽析、加入水相和加入有機相來消除乳化現象。物理破乳法主要是通過改變乳化液的物理性質來達到破乳目的，采用冷凍、加溫、離心、超聲等方法。本文考察了鹽析、補加水相、補加有機相、冷凍、加溫、離心、超聲共7種破乳方法，破乳情況見表2。由表2可知，鹽析、補加水相、補加有機相、加溫4種方法無法消除乳化現象；冷凍、離心、超聲3種方法可有效消除乳化現象。

2.2 加標回收率實驗

本方法針對1#、2#、3#樣品，考察了冷凍、離心、超聲3種破乳方法的加標回收率。分別向白酒樣品中添加塑化劑混標，加入量分別為0.5 mg/L、1.5 mg/L濃度水平，試驗結果見表3。由表3可知，經冷凍法破乳，3個樣品加入0.5 mg/L水平濃度標樣，DBP及DEHP的平均回收率分別為102.6%、104.1%，加入1.5 mg/L水平濃度標樣，DBP及DEHP的平均回收率分別為95.0%、111.6%；經離心法破乳，3個樣品加入0.5 mg/L水平濃度標樣，DBP及DEHP的平均回收率分別為110.9%、143.6%，加入1.5 mg/L水平濃度標樣，DBP及DEHP的平均回收率分別為110.2%、136.0%；經超聲法破乳，3個樣品加入0.5 mg/L水平濃度標樣，DBP及DEHP的平均回收率分別為82.8%、169.3%，加入1.5 mg/L水平濃度標樣，DBP及DEHP的平均回收率分別為88.2%、166.4%。

表2 不同破乳方法及其破乳效果

表3 白酒中DBP、DEHP經不同破乳方法處理后加標回收率

2.3 重復性實驗

本方法考察了冷凍、離心、超聲3種破乳方法的重復性。通過冷凍、離心、超聲處理乳化加標樣品后，對其上層有機相平行測定6次，試驗結果見表4。由表4可知，經冷凍法破乳后樣品中DBP、DEHP的RSD的分別為3.32%～4.71%、5.27%～5.67%；經離心法破乳后樣品中DBP、DEHP的RSD的分別為4.03%～6.24%、6.24%～8.35%；經超聲法破乳后樣品中DBP、DEHP的RSD的分別為5.42%～8.46%、8.68%～12.24%。

3 結論

通過對比不同方法對破乳效果的影響，發現冷凍、離心、超聲3種方法可達到破乳目的。其中冷凍法破乳的白酒樣品中DEP加標回收率為93.6%～105.5%，RSD為3.32%～4.71%；DEHP加標回收率為98.1%～114.2%，RSD為5.27%～5.67%，明顯優于離心法及超聲法破乳得到的加標回收率以及重復性，同時具有干擾因素少、操作簡便等優點，可滿足液-液萃取法測定白酒中塑化劑的要求。

表4 白酒中DBP、DEHP經不同破乳方法處理后檢測重復性(n=6)