E6/E7 mRNA表達在陰道鏡檢查陰性女性宮頸上皮內瘤變隨訪評估中的價值分析

黃志偉

【摘要】 目的 分析E6/E7 mRNA表達在陰道鏡檢查陰性女性宮頸上皮內瘤變（CIN）隨訪評估中的價值。方法 選取行陰道鏡檢查陰性的1586例宮頸炎性疾病患者， 其中E6/E7 mRNA陽性886例， E6/E7?mRNA陰性700例， 均隨訪1年后， 比較E6/E7 mRNA陽性、陰性患者的高危型人乳頭瘤病毒（HR-HPV）檢出情況， CINⅡ+ 發生情況， 不同年齡段患者CINⅡ+ 發生情況。結果 隨訪1年后， 886例E6/E7 mRNA陽性患者中檢出HR-HPV416例， 檢出率為46.95%;700例E6/E7 mRNA陰性患者中檢出HR-HPV50例， 檢出率為7.14%;E6/E7 mRNA陽性患者的 HR-HPV檢出率高于E6/E7 mRNA陰性患者， 差異具有統計學意義（P<0.05）。886例E6/E7 mRNA陽性患者發生CINⅡ+ 97例， 發生率為10.95%;700例E6/E7?mRNA陰性患者發生CINⅡ+ 15例， 發生率為2.14%;E6/E7 mRNA陽性患者的CINⅡ+ 發生率高于E6/E7 mRNA陰性患者， 差異具有統計學意義（P<0.05）。將E6/E7 mRNA陽性患者分為<40歲464例， ≥40歲 422例;E6/E7 mRNA陰性患者分為<40歲356例， ≥40歲344例。E6/E7 mRNA陽性患者中<40歲患者的CINⅡ+ 發生率為4.96%， ≥40歲患者發生率為17.54%， 比較差異具有統計學意義（P<0.05）。E6/E7 mRNA陰性患者中<40歲患者的CINⅡ+ 發生率為0， ≥40歲患者發生率為4.36%， 比較差異具有統計學意義（P<0.05）。結論 E6/E7 mRNA表達對CINⅡ+ 發生具有較高的預測價值。

【關鍵詞】 宮頸上皮內瘤變;E6/E7 mRNA;隨訪評估

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2019.30.023

隨著陰道鏡檢查技術的應用， CIN的檢出率明顯提高， 但尚無預后評估的有效指標， 導致患者需要進行多次宮頸細胞學檢查、HPV檢測以及組織病理學檢查， 不僅增加了患者的經濟負擔， 也增加了其心理壓力[1]。研究發現[2]， HR-HPV E6/E7基因編碼的致癌蛋白與CIN發生、發展密切相關， 宮頸癌、癌前病變患者E6/E7 mRNA表達明顯升高， 且其表達與患者預后具有相關性。本文將分析E6/E7 mRNA表達在女性CIN隨訪評估中的價值， 現報告如下。

1 資料與方法

1. 1 一般資料 選取2017年1月～2018年1月到本院進行陰道鏡檢查陰性的1586例宮頸炎性疾病患者， 年齡26～68歲，?平均年齡（44.58±11.92）歲， 存在HR-HPV感染， 既往無CIN病史、子宮全切術史、盆腔放射史等， 已排除妊娠期、哺乳期女性。其中， E6/E7 mRNA陽性886例， 陰性700例。

1. 2 方法

1. 2. 1 宮頸細胞學檢查 在宮頸柱狀上皮與鱗狀上皮交接處旋轉宮頸刷收集脫落細胞， 送實驗室進行檢驗， 利用描述式診斷系統（TBS）診斷。

1. 2. 2 HPV-DNA檢測 使用Hbri Max醫用核酸分子快速雜交儀、美國PE公司PE5700基因擴增儀、HPV擴增分型檢測試劑盒、基因芯片檢測系統等， 根據導流雜交原理， 利用雜交儀及擴增分型試劑盒， 在基因芯片膜上進行基因分型快速檢測， 包括13種高危亞型、5種低危亞型以及3種常見亞型。

1. 2. 3 E6/E7 mRNA檢測 使用河南Kodia生物公司提供的Quanti Virus HPV E6/E7 mRNA試劑盒， 對上述高危HPV亞型進行檢測。

1. 2. 4 病理學檢查 隨訪1年后， 對患者再次進行HPV-DNA檢測、液基薄層細胞（TCT）檢測， 發現HR-HPV持續感染或非典型鱗狀上皮細胞（ASCUS）以上， 進行陰道鏡病理檢查， 將其分為正常/炎癥、CIN Ⅰ～Ⅲ級、宮頸癌等， 以CINⅡ+ 為研究終點[3]。

1. 3 觀察指標 隨訪1年后， 比較E6/E7 mRNA陽性、陰性患者的HR-HPV檢出情況， CINⅡ+ 發生情況， 不同年齡段患者CINⅡ+ 發生情況。

1. 4 統計學方法 采用SPSS21.0統計學軟件對數據進行處理。計數資料以率（%）表示， 采用χ2檢驗。P<0.05表示差異有統計學意義。

2 結果

2. 1 E6/E7 mRNA陽性、陰性患者的HR-HPV檢出情況比較 隨訪1年后， 886例E6/E7 mRNA陽性患者中檢出HR-HPV 416例， 檢出率為46.95%;700例E6/E7 mRNA陰性患者中檢出HR-HPV 50例， 檢出率為7.14%;E6/E7 mRNA陽性患者的 HR-HPV檢出率高于E6/E7 mRNA陰性患者， 差異具有統計學意義（χ2=298.68， P<0.05）。

2. 2 E6/E7 mRNA陽性、陰性患者的CINⅡ+ 發生情況比較隨訪1年后， 886例E6/E7 mRNA陽性患者發生CINⅡ+ 97例，?發生率為10.95%;700例E6/E7 mRNA陰性患者發生CINⅡ+?15例， 發生率為2.14%;E6/E7 mRNA陽性患者的CINⅡ+ 發生率高于E6/E7 mRNA陰性患者， 差異具有統計學意義（χ2=46.20， P<0.05）。

2. 3 不同年齡段E6/E7 mRNA表達患者的CINⅡ+ 發生情況比較 將E6/E7 mRNA陽性患者分為<40歲464例， ≥40歲422例;E6/E7 mRNA陰性患者分為<40歲356例， ≥40歲344例。E6/E7 mRNA陽性患者中<40歲患者的CINⅡ+ 發生率為4.96%， ≥40歲患者發生率為17.54%， 比較差異具有統計學意義（χ2=35.87， P<0.05）。E6/E7 mRNA陰性患者中<40歲患者的CINⅡ+ 發生率為0， ≥40歲患者發生率為4.36%， 比較差異具有統計學意義（χ2=15.86， P<0.05）。見表1。

3 討論

宮頸癌是危及女性生殖健康的常見惡性腫瘤， CIN是一種宮頸病變， 與宮頸浸潤癌關系密切， 早期發現及治療是預防宮頸癌發生的重要環節。2003年食品藥品監督管理局（FDA）批準了在宮頸癌篩查中應用HPV DNA基因分型檢測， 可提高CIN檢出率， 減少宮頸癌發生[4]。自從HPV DNA檢測開展以來， 越來越多的 CINⅠ可被檢測出來， 但其中60%左右的患者可自然消退， 不需要接受治療， 需要進行長期隨訪評估。宮頸TCT是一種常見的宮頸疾病檢測技術， 具有較高的特異性， 對CINⅠ持續或進展均具有預測價值， 但敏感度較低， 且受檢測醫師診斷技術影響較大。HPV DNA基因分型檢測是一種敏感度較高的病因檢測方法， 但特異度不足， 無法判斷HPV的致癌活性。兩種檢測方式均無法了解宮頸病變進展風險， 可能引起過度治療， 尤其是<30歲的年輕女性， 承受了較大的心理及經濟負擔。因此， 迫切需要制定科學、合理、經濟的隨訪方案， 盡量減輕患者的心理負擔及經濟負擔。

研究發現[5]， HPV E6/E7基因與宮頸癌發生密切相關， 其一旦與宿主細胞DNA整合， 可出現HPV E6/E7過度表達， 產生癌蛋白， 誘發癌變。由于RNA模板水平可在一定程度上反映癌基因活性， 因此， 可通過檢測E6/E7 mRNA表達評估HPV感染后進展情況。以往有研究顯示， 61.9%的CINⅠ轉陰患者均為HPV E6/E7 mRNA陽性、表達水平為583.5 copies/ml， 而進展患者或持續感染患者的HPV E6/E7 mRNA陽性率約為81.8%、表達水平約為3738.4 copies/ml， 比較差異具有統計學意義（P<0.05）。也有報道顯示， HPV E6/E7 mRNA檢測 CINⅠ持續感染或進展的敏感度為81.8%， 而TCT檢測敏感度僅為50.0%， HPV E6/E7 mRNA檢測具有明顯優勢。但HPV E6/E7 mRNA檢測的特異度較低， 僅為38.1%， 而TCT檢測的特異度為66.7%。有學者認為， HPV E6/E7 mRNA檢測的最佳臨界值為2724.0 copies/ml， 該時期可獲得較高的特異度， 約為81.0%。對CINⅠ患者進行HPV E6/E7 mRNA檢測降低了漏診率， 并通過定量檢測， 可降低其誤診率。有研究顯示， HPV E6/E7 mRNA檢測準確率與宮頸病變的嚴重程度有關， CINⅠ～Ⅲ患者檢測陽性率分別為7.50%、94.74%、92.00%， 而炎癥患者的檢測陽性率為47.29%， 比較差異具有統計學意義（P<0.05）。80%的HPV感染患者均會在2年內自然消退， 從感染到發生癌變可能需要數年。作為毒癌基因轉錄產物， E6/E7 mRNA可反映癌基因活性， 因此， 與HPV DNA相比， 精準度及特異度更高， 因此， 用于CIN隨訪評估可減輕患者的心理負擔。在本次研究中， 隨訪1年后， E6/E7 mRNA陽性患者中HR-HPV檢出率明顯高于陰性患者， CINⅡ+發生率高于陰性患者， 差異均具有統計學意義（P<0.05）;E6/E7 mRNA陽性患者中≥40歲患者的CINⅡ+ 發生率明顯高于<40歲患者， 差異具有統計學意義（P<0.05）。表明E6/E7 mRNA表達陽性患者的HR-HPV檢出率更高， CINⅡ+ 病變風險更高， 尤其是≥40歲女性， 應作為重點隨訪對象。應注意的是， E6/E7 mRNA陰性患者同樣可發生CINⅡ+ ， 仍需要密切隨訪觀察， 確保能夠盡早發現并治療。建議可適當減少隨訪次數， 延長隨訪時間。對E6/E7 mRNA表達水平高于2724.0 copies/ml的患者， CIN持續或進展可能性更大， 應采取更加積極的隨訪方案， 避免延誤病情， 影響治療效果[6-8]。

綜上所述， E6/E7 mRNA表達對CINⅡ+ 發生具有較高的預測價值， 可應用于宮頸癌篩查， 避免過度檢查及治療。

參考文獻

[1] 桂定清， 張力憶， 青友芬， 等. HPV E6/E7 mRNA檢測對宮頸上皮內瘤變患者的預后價值. 空軍醫學雜志， 2018， 34（6）：408-411.

[2] 桂定清， 張力憶， 青友芬， 等. 高級別宮頸上皮內瘤變術后檢測HPV E6/E7 mRNA的診斷價值. 臨床誤診誤治， 2018， 31（12）：58-61.

[3] 吳雙， 朱月華. 高危型人乳頭瘤病毒E6/E7 mRNA和DNA檢測對2級以上宮頸上皮內瘤變診斷價值的Meta分析. 檢驗醫學與臨床， 2018， 15（22）：3371-3376.

[4] 朱遠航. HPV E6/E7 mRNA檢測對ASCUS患者宮頸高級別上皮內瘤變和宮頸癌的診斷價值. 鄭州大學， 2018.

[5] 邵敏芳， 任瓊珍. E6/E7 mRNA表達在陰道鏡檢查陰性女性宮頸上皮內瘤變隨訪評估中的價值分析. 中國醫療設備， 2017， 32（S1）：62.

[6] 李滿元， 劉文， 王寶， 等. HPV E6/E7 mRNA檢測在年輕女性宮頸癌篩查及宮頸疾病診治中的應用價值. 貴州醫藥， 2019， 43（1）：124-126.

[7] 陳飛， 任琛琛， 楊立， 等. HPV E6/E7 mRNA、p16/Ki67檢測在ASCUS中的診斷價值. 現代婦產科進展， 2019， 28（1）：54-57.

[8] 岳晚俠， 吳利俠， 蒙樹勇. 人乳頭瘤病毒E6/E7 mRNA檢測在年輕女性宮頸癌篩查及宮頸疾病診治中的應用研究. 臨床和實驗醫學雜志， 2019， 18（1）：66-68.

[收稿日期：2019-03-14]