豆清液不同超濾組分體外抗氧化活性研究

□ 吳 靜 陳才霞 劉晶晶 胡萌萌 尹樂斌 邵陽學院食品與化學工程學院

豆清液是指點漿工藝中蛋白質變性沉淀時析出的上清液或豆腐倒腦時產生的廢水，據統計，每加工1 t大豆可排放出2～5 t豆清液[1]。豆清液所含營養物質豐富，化學需氧量、生物化學需氧量分別約為1 800～2 400 mg/L、4 000～ 6 000 mg/L，直接排放會造成嚴重的環境問題。大豆多肽具有高營養價值，具有抗氧化、降低膽固醇、抗肥胖和促進免疫功能等[2]，有關豆清液的高值化利用是目前的研究熱點。本文以豆清液為研究對象，將其通過不同濾膜進行超濾，評價不同超濾組分的抗氧化活性，為豆清液的綜合利用提供理論基礎。

1 材料與方法

1.1 樣品與試劑

豆清液：實驗室自制；過硫酸鉀、三水合醋酸鈉：西隴化工股份有限公司；DPPH、TPTZ、ABTS：上海如吉生物科技發展有限公司；其他試劑均為常見分析純。

1.2 儀器設備

MSM2013超濾機組：上海摩速科學器材有限公司；分析光度計：上海舜宇恒平科學儀器有限公司；分析天平：梅特勒托利多儀器有限公司。

1.3 試驗方法

1.3.1 豆清液超濾處理

對已經粗過濾后的豆清液采取分別經過10 kDa、5 kDa、3 kDa、800 Da、300 Da超濾膜截留分離，分別收集滲透液作為樣品液。依次制備分子量為110 kDa、10 kDa、5 kDa、3 kDa、800 Da的不同組分濾液，然后測定各組分溶液的抗氧化活性。

1.3.2 抗氧化活性測定

DPPH自由基清除率測定參考Moyo B[3]等的方法；OH自由基清除率測定參考Smirnoff N[4]等的方法；ABTS自由基清除率測定參考Re R等[5]的方法。

2 結果與分析

2.1 豆清液不同超濾組分對DPPH自由基清除能力的測定結果

豆清液不同超濾組分對DPPH自由基的清除率如下表1，經方差分析可知，按照顯著性水平P＜0.05分成了5個層次（a、b、c、d與e），10 kDa、3 kDa超濾膜處理前所得到的分子量組分之間的差異不顯著，其清除率最高為91.81%±3.43%。5 kDa膜前和膜后得到的分子量清除率差異不顯著。10 kDa膜后與800 Da膜后的組分差異不顯著，但清除率最低，為38.12%±3.12 %?？偟膩碚f，10 kDa、3 kDa、800 Da膜前與膜后的DPPH清除率組分差異顯著（P＜0.05）。

2.2 豆清液不同超濾組分對羥基自由基（OH）清除能力的測定結果

豆清液不同超濾組分對OH自由基清除率見表2，經方差分析，9組樣品液按顯著性水平P＜0.05羥基清除率分成了4個層次（a、b、c、d）。10 kDa膜后、5 kDa膜前、3 kDa膜前與膜后、800 Da膜后這5個樣品組清除率較高，且差異不顯著。分別過膜的超濾方式得到的樣品液在10 kDa膜后的清除率最高，為94.72%±3.36 %。10 kDa、5 kDa、800 Da膜前與膜后組分差異顯著。

2.3 豆清液不同超濾組分對ABTS自由基清除能力的測定結果

豆清液不同超濾組分對ABTS自由基清除率如下表3。

表1 豆清液不同超濾組分對DPPH自由基清除率（單位：%）

表2 豆清液不同超濾組分對OH自由基清除率（單位：%）

表3 豆清液不同超濾組分對ABTS自由基清除率（單位：%）

經方差分析可知，豆清液用分別過膜得到的組分ABTS自由基清除率按顯著性水平P＜0.05呈現出4個層次（a、b、c與 d）。10 kDa、5 kDa與800 Da膜前與膜后的組分清除率差異顯著，10 kDa膜后組分最高，為99.58%±0.08 %；而3 kDa膜前與膜后的組分清除率差異。

3 結論

將豆清液分別過膜通過孔徑110 kDa、10 kDa、5 kDa、3 kDa與800 Da的濾膜，其DPPH自由基、ABTS自由基、OH自由基清除率非常高，說明豆清液原液是一種具有極強抗氧化活性的原料，為其高值化利用提供了理論數據。