蔣正艷
宿遷子淵司法鑒定所,江蘇 宿遷 223800
醫學的不斷進步在各個領域衍生出高技術手段,其中,DNA檢測技術在刑偵案件中得到廣泛的應用,法醫通過靈敏高效的檢測儀器對案發現場物證進行正確的DNA提取檢測與比對,使得公安機關對案件偵破的效率得到極大提高,然而,法醫DNA實驗室的污染將直接影響檢測結果的可靠性,因此,及時排查樣本污染原因,試驗誤差因素,并提出行之有效的解決方案同時建立健全實驗室監管制度對于提升法醫工作效率,有重要意義。
一方面,在案件發生現場往往人員嘈雜,實時物證極易受到破壞,產生外源污染物,這些外援污染物通常指人類或其他生物體DNA物質,法醫在現場進行物證提取時,如果在樣本中混入這些污染物,必然會導致試驗誤差變大,另一方面,法醫個人技術水平的不足或操作失誤在物證提取過程中帶入不相關污染源,也會對試驗造成不良影響。
醫學試驗對人員素質試驗環境要求較高,在試驗過程中有可能因為人員操作不當或操作環境不良導致實驗結果出現較大偏差。第一,操作過程中技術人員可能會因疏忽大意等原因將自身DNA或其他樣品DNA帶入,造成交叉污染。第二,實驗室設備管理不當,實驗設計出現問題也會導致試驗誤差變大,試驗器材維護缺乏使微生物集聚于器皿表面以及試驗試劑保存不良對實驗精度皆有直接影響。
PCR是指聚合鏈式反應,在法醫DNA實驗室中,擴增產物的污染是最常見最主要的PCR污染問題。氣溶膠污染是最可能造成PCR污染的形式,氣溶膠在實驗過程中極其產生,而且可以大量容納污染DNA拷貝,嚴重影響DNA實驗精度。
首先實驗室要規范授權制度,每個人身上都帶有DNA物質,為了防止外源DNA污染實驗室環境,實驗室必須設立門禁系統,只有具備操作資格且擁有身份認證卡的人員才能進入試驗區域。進入試驗區時必行進行正確的防護服穿戴與消毒操作;第二,應當合理隔離DNA實驗室各個功能區,尤其是樣本儲存區不應與試驗區過近,實驗室各個分區的通風通電通水等設施不能共用以防交叉污染;第三,實驗室硬件設施包括試劑,必須妥善保管維護與保存,具體工作應當由專門人員進行操作,操作前必須接受嚴格培訓,達標后方能上崗;第四,每次實驗任務之后要對現場進行仔細清理消毒,重復使用儀器必須特殊處理以防止物證DNA交叉污染,微生物滋生等問題,對于容易殘留DNA的區域,應當用化學試劑反復處理,并進行紫外線消毒操作。實際當中實驗室清潔工作的好壞直接決定了DNA污染發生的概率。主要是因為與物證直接接觸并重復使用的實驗物品之間極易產生交叉污染,DNA會以這些物件作為載體跨區轉移。
人為因素始終占據主導地位,要想做好法醫DNA實驗室污染防治的工作,技術人員必須提升自我綜合技術水平。1.技術人員在進行DNA檢測操作時應當始終保持專注,無論什么時候都應當謹記操作規范,將防止污染時刻擺在第一位,即使在條件較好的實驗室,也不能在相同時刻進行物證提取,DNA比對等操作,每次試驗后需要處理剩余材料時都要將不同樣本源的材料分開擺放,每次在進行不同的操作步驟時都要更換手套,尤其是需要直接接觸物證的操作切記不可重復使用。2.在進行DNA擴增,產物檢測操作時一定要注意避免PCR污染,進行擴增過程時,要防止加錯樣品混淆樣品。試驗過程中用到的物品盡量不要跨區帶入以防止交叉污染。3.法醫DNA實驗室所使用的試劑及消耗品的質量一定要得到保證,技術人員應當定期進行檢查,一旦發現不合格的產品應當立即更換。技術人員的操作能力在很大程度上決定了檢測結果的準確性,因此建立健全對技術人員的能力考核制度,考核方法,培訓制度非常重要。相關部門應當定期對技術人員進行技能測試,可以包括理論層面與操作層面,理論層面通過筆試以及面試的方式對其工作能力進行全面考查,出題內容應當涵蓋DNA實驗室防止污染措施,物證提取方法,實驗過程注意事項等內容,以卷面分數對參加考試人員進行排名,排名靠后著必須給予專業指導與培訓。在實際操作層面,采用模擬實驗對技術人員進行能力測試,成績不合格者必須進行專業機構再培訓,只有這樣才從最大程度上避免由主觀因素引起的DNA實驗室污染事件發生。
DNA鑒定質量的好壞,對案件偵破的實用價值直接受到DNA污染程度的影響,結論的錯誤后果嚴重,甚至導致錯案發生。在實際工作中DNA實驗室的污染問題或多或少都會存在,因此它是不可能完全避免的,因此技術人員在盡量做到避免人為因素造成DNA污染的情況下也要具備及時發現錯誤并及時糾正錯誤的能力。在實際操作中實驗人員一旦發現存在DNA污染問題,就要立刻進行污染源排查工作,結合實際情況分析污染原因,提出切實有效的解決方案。同時,為了保證結果的準確性,必須對相同時期獲取的數據進行反復核對,做到不遺漏任何污染源。技術人員在進行污染因素排查時,應當根據DNA實際情況設計出合理的比對實驗,對實驗過程中的每個環節進行逐一測試。在發現問題之后,要進行以下操作:1.對于造成污染的實驗品或存在已污染物證必須處理后丟棄;2.如果發現存在試劑原因,應當在核查無誤后丟棄處理,并對實驗用到的試劑進行重新配置或購買;3.對于污染發生的工作區,一定要進行仔細清理工作臺面,并對實驗器材,儀器進行反復消毒處理,以確保二次實驗的安全性;4.當污染源檢測出現困難以致于無法做出正確判斷時,應當停止實驗,正確保存剩余物證資料,將實際情況上報領導,組織開展工作技術會議,進行技術討論以確保結論的準確性;5.DNA實驗室極易發生PCR污染,而且PCR污染很難清除,在實際實驗過程中,技術人員在發生PCR污染后往往不能準確判斷導致原因,進而使工作進度受到影響,面對這種情況,法醫DNA實驗室應當健全備份制度,在實驗室出現難以排查的DNA污染問題時,為了使得案件偵查工作正常進行,在必要時候選擇備份實驗室進行操作,以配合刑偵部門工作。
法醫DNA實驗室污染是產生DNA檢測結果發生錯誤的主要因素,包括了主觀因素和客觀因素,技術人員在實際工作當中要積極探討尋求避免這種情況發生的合理方案。實際上,物證DNA污染發生的環節有很多種,既可能是DNA實驗室實驗過程也可能是法醫在現場進行物證提取的過程,甚至存在人為破壞因素,現代刑偵案件的偵破過程充滿了各種高技術手段,DNA檢測在其中起到了最為關鍵的作用,因此,對于廣大法醫工作者來說探究如何防止DNA污染提高DNA檢測準確率提升物證價值,以配合公安機關順利破案,維護社會和諧,有重要意義,相關技術人員應當對此抱以足夠重視的心態,高質量完成工作。