成人連續(xù)彩色水平斷層樹脂包埋標(biāo)本的研制

張中軍，牛小艷，崔顏宏，秦萬生

（洛陽職業(yè)技術(shù)學(xué)院，河南 洛陽 471000）

人體解剖學(xué)標(biāo)本在經(jīng)過我國科研工作者的長期實驗研究以后，探索出透明、塑化、斷層、鑄型標(biāo)本的制作方法，制成了一大批新型的人體解剖學(xué)標(biāo)本，為教學(xué)、科研、臨床提供了直觀新穎的形態(tài)學(xué)依據(jù)[1-2]。斷層解剖學(xué)作為人體解剖學(xué)的一個分支，主要是研究正常人體器官在各種斷面上的位置、毗鄰、形態(tài)和大小的關(guān)系。現(xiàn)在的人體斷層標(biāo)本依然采用傳統(tǒng)的低溫凍切，防腐液固定的方法進(jìn)行保存展示，各組織和器官間的位置關(guān)系、毗鄰結(jié)構(gòu)都沒有特別的顏色區(qū)別，既不能很好地區(qū)分各層面動脈、靜脈和神經(jīng)的走形變化，也不易分辨肌肉和筋膜的層次結(jié)構(gòu)，在一定程度上限制了對斷層標(biāo)本的利用和研究[3]。在生物學(xué)領(lǐng)域常用有機(jī)玻璃、脲醛樹脂等材料包埋昆蟲標(biāo)本，但利用上述材料制作個體較小的包埋標(biāo)本成功率較高，大型標(biāo)本的成功率較低[4-5]。受此啟發(fā)，通過長期試驗，我們選用合適的染料和樹脂材料染色包埋制作成人連續(xù)彩色水平斷層樹脂包埋標(biāo)本，克服了傳統(tǒng)生物學(xué)包埋技術(shù)只能制作小型標(biāo)本、長期保存樹脂材料發(fā)黃、標(biāo)本變色的不足，對保存人體斷層標(biāo)本具有重要意義，現(xiàn)將彩色水平斷層樹脂包埋標(biāo)本制作技術(shù)報道如下。

1 材料和方法

1.1 材料

庫存尸體、10%甲醛（化學(xué)純）、生理鹽水、丙酮溶液（化學(xué)純）、無水酒精（化學(xué)純）、雙氧水（化學(xué)純）、二氯甲烷（化學(xué)純）、樹脂、染料、拋光蠟。

1.2 方法

1.2.1 尸體的選取 選擇體態(tài)勻稱，外觀沒有手術(shù)創(chuàng)傷缺損的中青年尸體標(biāo)本，測量尸體兩耳、兩肩部、上下肢的對稱性[6]，以對稱性無差別的尸體標(biāo)本為佳。剔除毛發(fā)，刷洗干凈尸體的外表面，并對尸體標(biāo)本進(jìn)行頭部、胸部、盆部的放射線檢查。

1.2.2 定型 用生理鹽水經(jīng)股動脈循環(huán)灌注，從靜脈系流出，直到流出的液體呈無色透明為止，按照解剖學(xué)姿勢平放在木板上，用直角規(guī)測量兩耳郭和外耳道的高度，并用繩子調(diào)整和固定頭部姿勢使其兩側(cè)耳郭和外耳道的高度一致。用繩子和繃帶將頭、軀干和四肢固定在木板上使之左右對稱，并用直角規(guī)和卷尺逐一測量上下肢與正中矢狀線的對稱距離，確保兩側(cè)距離一致。

1.2.3 冷凍鋸片 將定型好的尸體標(biāo)本放置在200 cm×70 cm×50 cm，板厚5 cm的木箱內(nèi)，-35℃冷凍1天，測量尸體標(biāo)本對稱性無變化后，將溫度調(diào)至-70℃冷凍1周。用電動斷層帶鋸將冷凍好的尸體標(biāo)本從上往下水平鋸切，做成連續(xù)水平切面，片厚5 mm，鋸耗1 mm，冷水沖洗逐漸復(fù)溫至5℃。

1.2.4 漂白、脫水、脫脂 把切好的水平斷層標(biāo)本浸泡在2%～3%的雙氧水中漂白1周，然后用流水沖洗干凈。將漂白后的水平斷層標(biāo)本迅速置于-25℃的70%、85%、90%、95%、100%的丙酮中逐級脫水，各級濃度的丙酮脫水時間為1周，每次6天。脫水后的水平斷層標(biāo)本放入二氯甲烷中脫脂2～3天，標(biāo)本脫脂后能更清楚地顯示組織內(nèi)的血管和神經(jīng)的走行[7]。

1.2.5 染色 將脫水、脫脂后的水平斷層標(biāo)本緩慢抽真空去除二氯甲烷后，選用不同的染料給肌肉、血管、神經(jīng)等器官組織染色，將染色后的水平斷層標(biāo)本放置在30℃的包埋盒中靜置3小時，使染料和各組織器官緊密結(jié)合。

1.2.6 真空滲透 將樹脂緩慢倒入裝有染色的水平斷層標(biāo)本的包埋盒中，緩慢抽真空，壓力控制在2 mmHg以下，空氣在真空狀態(tài)下以氣泡形式排出，樹脂逐漸進(jìn)入水平斷層標(biāo)本，維持該壓力1～2天，當(dāng)樹脂中不再有氣泡出現(xiàn)為止。

1.2.7 聚合硬化 待包埋盒內(nèi)的氣泡完全排除后，將包埋盒移入30℃的恒溫箱內(nèi)2～3天，待樹脂硬化后去掉包埋盒，取出與樹脂融合為一體的彩色水平斷層標(biāo)本。

1.2.8 修潔標(biāo)本 標(biāo)本聚合硬化后，切除水平斷層標(biāo)本邊緣多余的樹脂，然后用羊毛輪打磨拋光標(biāo)本邊緣，整個過程基本完成。

2 結(jié)果

采用彩色水平斷層樹脂包埋技術(shù)制作的水平斷層標(biāo)本厚度在5 mm以下，硬度較高，標(biāo)本顏色均勻自然，透明度好，各斷層上的器官和組織之間的走形及位置關(guān)系更加清晰明了。

3 討論

樹脂包埋標(biāo)本具有高透明度、高亮度等特點，改良后的彩色水平斷層樹脂包埋技術(shù)制作的人體斷層解剖標(biāo)本，不但能顯示清晰的解剖結(jié)構(gòu)，而且能長久保持染色效果，達(dá)到長久保存的目的，既滿足教學(xué)、科研、臨床的需要，同時也解決了大型珍貴標(biāo)本的保存問題。彩色水平斷層樹脂包埋技術(shù)作為一門新型實用的解剖學(xué)標(biāo)本制作技術(shù)，為制作更高質(zhì)量的人體標(biāo)本，解決水平斷層標(biāo)本的保存難題、攻克長期保存顏色不變成為可能，應(yīng)用前景十分廣闊。