生物菌劑防治大櫻桃根癌病田間藥效試驗報告

馬雪莉 徐欽軍 范以香 王燕飛 李長浩

摘要：為明確生物菌劑（ZZ-11）對大櫻桃根癌病的田間防治效果、在大櫻桃上適宜的使用劑量及對作物的影響，進行了本次試驗。從綜合效果來看，菌劑配合腐殖酸肥料與農藥滲劑使用效果好，對根癌病具有治療效果。菌劑使用濃度為商品制劑稀釋200倍液，配合腐殖酸肥500倍液，及農藥增滲劑1000～1500倍液沖施使用，用藥液10～15kg/株。

關鍵詞：大櫻桃根癌病;生物菌劑;治療作用

中圖分類號：S-3

文獻標識碼：A

DOI：10.19754/j.nyyjs.20191215007

根癌病是一種土傳病害，是由根癌土壤桿菌（Agrobacterium fumefaciens）侵染引起[1]，是栽培大櫻桃的主要病害之一，幾乎所有大櫻桃砧木均有不同程度的發生[2]。致病菌為根癌土壤桿菌，主要影響植物細胞分裂，使細胞分裂失控，過度生長，形成根瘤。植物一旦染病，很難治愈，輕則衰弱黃葉，重則死樹。櫻桃根癌病已成為櫻桃高產穩產的嚴重影響因素[3，4]。

櫻桃是山東泰安地區的主栽果樹之一，根癌病對其生長造成嚴重的影響，部分苗圃的發病率接近100%[5，6]。植物根癌病的特殊致病機制主要是由于T-DNA 的轉入植物體，造成細胞的無限增值，形成腫瘤。目前對根癌病還沒有良好的化學防治手段[7]，使用最多的仍然是最早應用于根癌病的生防細菌K84，其防治根癌病的機理是搶先占領果樹傷口位點，在傷口上定殖并產生農桿菌素，阻止其它病菌從傷口侵入，因此其作用是預防而不是治療，一旦植物罹患根癌病，K84的治療效果則表現較差[8]。

利用微生物及其代謝產物防治病蟲害是常見的生物防治手段[9]。生物菌劑ZZ-11主要成分為枯草芽孢桿菌及其代謝產物。枯草芽孢桿菌是目前應用廣泛的益生菌， 其對環境友好、對糧食安全、對人體及動植物無危害，被廣泛應用于動物飼料、凈化水質、醫藥和植物[10]?？莶菅挎邨U菌是一種革蘭氏陽性菌， 菌體桿狀，不含內毒素，嗜熱、好氧會產芽孢，易分離培養，并能產生多種抗菌素和酶，具有抗菌譜廣、活性強和抗逆能力極強的特點[11]?？莶菅挎邨U菌應用于植物病害生物防治的研究已經有多年的歷史，目前在黃瓜、辣椒、水稻、小麥、玉米等農作物病害上顯出較好的防治效果[12]。近1個世紀來，從枯草芽孢桿菌代謝產物中分離純化出多種抗生物質，并明確了一部分抗生物質的組成、結構和生防作用，為枯草芽孢桿菌在植病生防領域的應用奠定了基礎，提供了可行性依據。

枯草芽孢桿菌可以產生環狀、線狀和分支環狀的3種抗菌多肽，對多種植物病原細菌，如水稻紋枯病菌、稻瘟病菌、番茄青枯病等均有強烈抑制作用[13]，但是對大櫻桃根癌病的防治效果未見報道。為明確枯草芽孢桿菌對大櫻桃根癌病的田間防治效果、在大櫻桃上適宜的使用劑量及對作物的安全性，進行了田間藥效試驗。

1材料與方法

1.1試驗對象

試驗對象：大櫻桃根癌病。

試驗田設在山東省泰安市岱岳區崅峪鎮南崅峪村櫻桃園中（N36°，E117°，海拔171m）。試驗地土質棕壤，有機質含量1.32%，堿解氮73mg/kg，pH值6.5，地力均勻。供試大櫻桃為四至五年生嫁接苗，株行距4m×4 m，品種為美早、先鋒、黃蜜、薩米脫，砧木為考特。共選試驗株120株。

1.2試驗設計和安排

1.2.1供試藥劑

供試劑藥劑為枯草芽孢桿菌及其代謝產物（ZZ-11），泰安市樹青有機農業科技有限公司提供;對照藥劑為0.3%梧寧霉素水劑（遼寧微科生物工程股份有司），市場購得;農藥助劑（神展），腐殖酸肥（農家美），均由泰安市樹青有機農業科技有限公司提供。

1.2.2試驗設計和安排

試驗設5個處理：處理1：ZZ-11懸浮劑200倍液;處理2：ZM-11懸浮劑200倍液+儂悅1500倍液;處理3：ZZ-11懸浮劑200倍液+農家美500倍液+儂悅1500倍液;處理4：梧寧霉素200倍液（CK1）+儂悅1500倍液;處理5：清水（CK2）。

每處理4次重復，計20個小區，每6株為1個小區，隨機排列。

試驗共施藥2次，施藥時間分別為2018年 4月18日、 5月4日。第1次施藥為4月18日，大櫻桃處于果實膨大期;隔2周再用藥1次。試驗期間，無惡劣氣候因素影響，適宜試驗進行。

按表1試驗設計要求，各處理藥劑兌水稀釋后灌根。挖開根癌病植株根部周圍土壤，露出根瘤，將藥劑從根部澆下，浸過根瘤，待藥液完全滲入土壤后在覆土。每株用藥液15kg。

1.3調查方法

整個試驗調查2次，第1次調查是在第1次藥后14d（2018年5月4日），每株選東、西、南、北、中 5 個方位進行葉片和新梢的測定，在營養枝上從基部起采集第 6～8 片葉片，實驗室測定葉綠素含量，并用卷尺測定新梢長度;第2次調查是在第2次藥后14d（5月18日），挖土深15～20cm，主要調查根瘤一側新根生長狀況，以及1mm 粗根的數量，2mm 粗根的數量，根瘤有無松動脫落情況。同時觀察各用藥區有無植物生長異?，F象，及對作物產量有無影響。試驗數據采用鄧肯氏新復極差（DMRT）法進行分析和顯著性測定。

2結果與分析

2.1對大櫻桃根癌病的影響

從表2看到，處理1、處理2、處理3、處理4新梢生長長度均比對照要好，4個處理差異顯著性不大，但是處理2、處理3對處理1、處理4、清水對照差異顯著。處理1、處理2、處理3葉綠素含量分別為3.11mg/kg、3.25mg/kg、3.54mg/kg，三者之間差異不顯著，但是顯著高于處理4葉綠素含量 2.22mg/kg及對照2.45mg/kg?？梢姽┰囁巹┛梢栽黾又参锶~綠素含量，提高植物光合速率，并且與氨基酸肥配合使用可以促進植物新梢生長。

處理3數據顯示1mm及2mm粗根數要顯著多于其它處理，處理1和處理2之間 1mm粗根數相差不大，但是也多于處理4與處理5。

根瘤病的發病機理是根瘤土壤桿菌首先附著在創傷部位的細胞壁上，有致病力的及若干無致病力的土壤桿菌，互相競爭植物細胞表面上數量有限的附著位點，競爭中，如果無致病力的土壤桿菌先于有致病力的土壤桿菌搶先占據傷口位點，就不會形成腫瘤，反之則會形成腫瘤。K84 菌株防治根瘤病的機理就是由于它搶先占領了果樹傷口位點，在其上定植并產生農桿菌素，阻止其它病菌從傷口侵入。根據這一發病機理推測，生物菌劑在防治櫻桃根瘤病方面，應該有效果。從表2 可以看到，2次藥后，用菌劑處理過的處理1、處理2、處理3表現出根瘤內部變褐，一些小型根瘤（直徑約2～3cm以內）松動脫落的現象。可見供試菌劑對抑制根瘤生長具有較好的作用。這與煙臺農科院李淑平等的研究結果生物菌肥能有效降低根癌病的發生結果類似[14]。

2.2產品的產量和質量

因為春季遭遇低溫冰凍，正值大櫻桃花期，導致大櫻桃當年絕產，課題組無法采集菌劑對大櫻桃產量與品質影響的數據。但是菌劑能夠提高植物葉片中葉綠素的含量，從理論推測，供試藥劑能夠提高大櫻桃的產量。

3結論

通過本試驗表明，生物菌劑ZZ-11對大櫻桃根癌病具有較好的治療效果。從綜合效果來看，菌劑配合使用腐殖酸肥肥料與農藥滲劑，效果更好。菌劑使用濃度為商品制劑稀釋200倍液，配合農家美500倍液，農藥增透劑1000～1500倍液使用。

參考文獻

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[14]李淑平，張福興.櫻桃根癌病防治試驗[J]. 煙臺果樹，2013（2）：7-9.

作者簡介：

馬雪莉（1975-），女，碩士，講師。研究方向：殺菌劑應用研究及植物保護教學與實踐。