一起家庭食源性疾病事件的病原學及分子生物學調查分析

沈靜 張靜 王姍 金虹飛

（上海市虹口區疾病預防控制中心 上海 200082）

食源性疾病事件在突發公共衛生事件中占有很大的比例，因而明確該事件的致病菌，加強日常食源性疾病的管控就顯得尤為重要。2019年6月14日15時55分我中心急傳科接轄區某醫院電話報告，稱該院腸道門診接診一名腹瀉病人，自述本人及家中其余2名家屬食用醬鴨后均有腹瀉癥狀。隨即，本疾病預防控制中心應急辦派工作人員赴醫院及病例家中開展流行病學調查和處置工作，經調查該家庭3名成員分別出現不同程度的發熱、腹瀉癥狀。于此同時，本單位實驗室也對流調人員采集的現場標本開展系列微生物學檢測。

1.資料與方法

1.1 樣品來源

2019年6 月14 日20 時收到流調人員送檢的病例肛拭標本1件；家屬肛拭樣品2件；食品醬鴨1件。

1.2 檢測方法

1.2.1 檢測標準依據《感染性腹瀉診斷標準》WS 271-2007,《食品安全國家標準 食品微生物學檢驗》GB 4789.4—2016[1]對送檢樣本開展增菌、分離培養、生化鑒定、血清學鑒定等致病菌檢測。

1.2.2 PFGE檢測參照美國CDC提供的PFGE分子分型的標準實驗室規程對腸炎沙門氏菌進行脈沖場凝膠電泳（PFGE）分析[2]。

1.2.3 藥敏檢測依據美國CLSI推薦的微量肉湯稀釋法,購置商品化藥敏板進行藥敏試驗,選用30種抗生素包括：氨芐西林AMP、氨芐西林-舒巴坦AMS、四環素TET、氯霉素CHL、復方新諾明SXT、頭孢唑林CFZ、頭孢噻肟CTX、頭孢他啶CAZ、頭孢西丁CFX、慶大霉素GEN、亞胺培南IMI、萘啶酸NAL、阿奇霉素AZI磺胺異噁唑SUL、環丙沙星CIP、阿莫西林-克拉維酸AMC、頭孢噻肟-克拉維酸CTX-T、頭孢他啶-克拉維酸CAZ-C、多粘菌素E CT、多粘菌素B PB、米諾環素MIN、阿米卡星AMI、氨曲南AZM、頭孢吡肟FEP、美羅培南MEM、左氧氟沙星LEV、多西環素DOX、卡那霉素KAN、鏈霉素STR、吉米沙星GEM。根據CLSIM100-S27(2017)出版的藥敏試驗指南進行耐藥判定,質控菌株為大腸埃希氏菌ATCC25922。

2.結果

2.1 細菌培養及鑒定結果

樣品中分離出4株腸炎沙門氏菌。其中1株來自病例，2株來自其家屬，另一株來自于食品醬鴨（購置于單位食堂）。

2.2 PFGE分型結果

4株腸炎沙門菌依次編號HKSM19007～`HKSM19010基因組DNA經XbaI內切酶酶切后,產生4條條帶數目和分子量大小完全一致的條帶，見下圖1。通過BioNumerics軟件分析形成了聚類圖,可見條帶數目和位置也完全相同，相似度達100%,可見來自同一克隆株,具有同源性，見圖2。

圖1 腸炎沙門菌脈沖場凝膠電泳分型圖

圖2 4株腸炎沙門氏菌的聚類樹狀圖

2.3 藥物敏感性試驗結果

經藥敏試驗4株腸炎沙門氏菌對AMP,NAL,Sul,STR的耐藥率為100%；對CFZ的耐藥率為75%；對AMS的耐藥率為50%，對其余24種抗生素敏感性為100%，可見具有相似的耐藥譜，結果見表。

表 4株腸炎沙門氏菌的耐藥譜

3.討論

此次事件通過對細菌培養及鑒定結果、分子溯源分析以及細菌耐藥譜的分析，可以認為該事件是由于家庭成員食用了被腸炎沙門氏菌污染的醬鴨所導致的一起聚集性食源性疾病事件。此次調查過程中所采集的標本包括了可疑食物和病例，分離到了相同血清型的沙門氏菌，并且經PFGE分子分型獲得了完全一致的條帶為判定腸炎沙門氏菌引起的食源性疾病事件提供了可靠的證據。但是，據流調顯示可疑食物醬鴨購買于患者兒子單位食堂，沒能采集到食物加工的環節是本次事件證據鏈的重要缺失，希望今后遇到此類事件相關部門能協同合作采集到更完整的樣本。

PFGE分型被認為是目前細菌分子流行病學研究的“金標準”[3]。此次事件就是我們實驗室將PFGE 技術在病原菌分子溯源方面一次有效的實踐。然而，我們國家對于腸道致病菌的脈沖場數據庫包含的數據資料還十分有限,因而加快建設國家致病性識別網體系就顯得非常重要。

腸炎沙門菌是沙門菌食物中毒最常見的血清型之一[4]。為了避免此類食源性疾病的發生，我們普通老百姓最好采購新鮮的食材，應避免使用冰箱內久置存放的食品，減少隔夜菜的攝入，本次事件經流行病學調查，正是由于食用了放置于冰箱的隔夜醬鴨所致。當下天氣炎熱，食品極其容易腐敗變質，衛生監督部門，應加大對餐飲業，集體食堂，學校等各類場所的監查力度，著重加強督查食品采購、貯存、加工、銷售中容易造成食源性疾患的重要環節[5]。