痰真菌培養及涂片鏡檢查在下呼吸道感染中的價值分析

陳贏

【摘要】 目的 探討痰真菌培養及涂片鏡檢查在下呼吸道感染中的價值。方法 收集418份臨床送檢呼吸道標本， 生理鹽水漱口后自然咳痰至無菌容器中， 30 min內送檢， 進行革蘭染色涂片鏡檢與培養鑒定。結果 418份標本中真菌培養陰性349份（83.5%）， 陽性69份（16.5%）。陽性標本中白色念珠菌32份

（46.4%）， 熱帶念珠菌19份（27.5%）， 克柔念珠菌11份（15.9%）， 光滑念珠菌5份（7.2%）， 曲霉菌2份（2.9%）;來源科室：呼吸內科38份（55.1%）， 神經外科13份（18.8%）， 血液內科9份（13.0%）， 腎移植科9份

（13.0%）。418份標本中痰真菌片鏡檢結果陰性320份（76.6%）， 陽性98份（23.4%）。陽性標本中查見真菌孢子47份（11.2%）， 查見菌絲7份（1.7%）， 查見真菌孢子及菌絲44份（10.5%）。結論 痰真菌培養及涂片鏡檢查是診斷下呼吸道真菌感染的有效手段， 二者聯合進行具有重要意義。

【關鍵詞】 痰真菌培養;涂片鏡檢查;下呼吸道感染

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2019.34.104

雖然現代醫學的快速發展使各種治療手段越來越強， 重癥死亡率降低， 卻也增加了各種并發癥和繼發癥的風險， 機會性真菌感染便是其中之一。據WHO曾做過的數據統計顯示， 醫院感染的發生率達到8.7%， 急性腦卒中患者的真菌感染占到27.9%[1]。還有報道顯示， 廣譜青霉素類、第3代頭孢菌素等抗菌藥物的使用會增加曲霉菌感染的風險[2]。

總之， 由于多方面因素的因素， 臨床深部真菌感染變得越來越復雜， 并且成為患者生命的終末感染。研究表明， 由以白色假絲酵母菌感染為典型的真菌感染是導致醫院感染死亡的一個重要原因[3]。在發生的全部內臟真菌感染中， 肺部真菌感染最多， 并且呈逐年增加的趨勢[4]， 早期診斷鑒別肺部真菌感染具有重要的臨床意義。本研究旨在探討痰真菌培養及涂片鏡檢查在下呼吸道感染中的價值， 報告如下。

1 材料與方法

1. 1 材料來源 收集2018年7月～2019年2月本院418份臨床送檢痰液標本， 來源科室：呼吸內科309份（73.9%）， 神經外科58份（13.9%）， 血液內科33份（7.9%）， 腎移植科13份（3.1%）， 腫瘤科5份（1.2%）。所有痰液標本在采集前均未使用過抗菌藥物， 以清晨第一口痰為宜， 生理鹽水漱口后自然咳痰至無菌容器中， 或者對于干咳無痰的患者可采用雙管保護的標本毛刷采集下呼吸道分泌物， 30 min內送檢。

1. 2 檢測方法 痰液標本以無菌接種環， 取干酪樣或膿性部分的痰涂成均勻薄片， 進行革蘭染色涂片鏡檢， 根據《全國臨床操作規程》配置革蘭染色液， 儀器為PREVIColorGram12自動革蘭染色儀。同時將痰標本在沙保氏培養基（廣州迪景微生物科技有限公司）上連續劃線涂抹， 置于35℃的孵育箱中培養48 h， 挑取沙保氏培養基上的真菌菌落， 革蘭染色后在顯微鏡（日產尼康）下觀察， 確定為真菌后， 用WalkAway40系統（美國）鑒定。

1. 3 觀察指標 統計418份標本中真菌培養及鑒定結果;統計418份標本真菌片鏡檢結果。

2 結果

2. 1 418份標本中真菌培養及鑒定結果 418份標本中真菌培養陰性349份（83.5%）， 陽性69份（16.5%）。陽性標本中白色念珠菌32份（46.4%）， 熱帶念珠菌19份（27.5%）， 克柔念珠菌11份（15.9%）， 光滑念珠菌5份（7.2%）， 曲霉菌2份（2.9%）;來源科室：呼吸內科38份（55.1%）， 神經外科13份（18.8%）， 血液內科9份（13.0%）， 腎移植科9份（13.0%）。

2. 2 418份標本真菌片鏡檢結果 418份標本中痰真菌片鏡檢結果陰性320份（76.6%）， 陽性98份（23.4%）。陽性標本中查見真菌孢子47份（11.2%）， 查見菌絲7份（1.7%）， 查見真菌孢子及菌絲44份（10.5%）。

3 討論

近些年， 真菌感染的發生率逐年升高， 假絲酵母菌、酵母菌、曲霉菌是引起深部真菌感染的主要致病菌。真菌感染的易患因素眾多， 主要包括以下幾個方面：①老年及高齡患者， 主要與此年齡階段的人群吸道清除功能減退有關;②廣譜抗菌藥的廣泛使用， 相關研究表明， 在假絲酵母菌感染的患者中， 有>80%使用過廣譜抗生素治療[5];③骨髓移植， 研究報道， 侵入性的真菌感染是導致白血病患者死亡的重要原因， 特別是白細胞嚴重減少的患者[6];④顱內感染， 一旦血腦屏障破壞， 加上患者年齡大、侵入性操作、使用抗生素、激素等各種原因， 易發生真菌感染;⑤化療、激素的使用可削弱機體的抗感染能力。有研究表明， 化療過程中出現的中性粒細胞減少癥是真菌感染的重要危險因素[7];⑥中心靜脈導管置管， 研究表明， 導管真菌敗血癥是常見的醫院感染類型， 其中16.7%為假絲酵母菌所引起。

目前基本一致認同， 真菌鏡檢及培養是診斷真菌感染的兩種重要手段， 一旦懷疑為真菌感染， 應積極采集標本進行真菌鏡檢與培養， 并且必要時還要進行痰液、胸腹水、尿液、心包積液、腦脊液等多途徑的培養， 以防出現假陰性， 如果發現有同一致病菌生長， 應警惕敗血癥。但目前對于痰標本的臨床價值仍存在一定的爭議， 一是有些患者干咳無痰， 無法通過自然咳痰來獲取痰標本， 并且因個體差異， 咳痰量也有多有少;再者， 咳出的痰液容易受到上呼吸道定植真菌的污染， 從而影響結果等。但目前除了自然咳痰外， 還有痰誘導的方法， 成功率約可達到76.0%～100%， 不過對于基礎肺功能的患者應謹慎使用， 以防加重病情。為了消除口腔寄生菌的干擾， 應重視漱口和消化痰液的過程。