41.7%氟吡菌酰胺懸浮劑對栝樓根結(jié)線蟲病的防治效果

遲元凱 汪濤 趙偉 葉夢迪 Farman Ali 戚仁德

摘要?[目的]探究41.7%氟吡菌酰胺懸浮劑防治栝樓根結(jié)線蟲病的使用方法和使用劑量。[方法]采集、鑒定并室內(nèi)繁殖安徽省潛山市供試田中栝樓根結(jié)線蟲;在室內(nèi)接種試驗和大田試驗條件下，評價41.7%氟吡菌酰胺懸浮劑對栝樓根結(jié)線蟲病的防治效果。[結(jié)果]安徽省潛山市供試田塊栝樓根結(jié)線蟲病病原為南方根結(jié)線蟲（Meloidogyne incognita）;分別在栝樓出苗后第10和70天，使用41.7%氟吡菌酰胺懸浮劑80 ～100μL/株，對水1 000 mL后灌根，田間栝樓根部病情指數(shù)分別降低79.3%和91.4%。[結(jié)論]41.7%氟吡菌酰胺懸浮劑灌根可以有效防治栝樓根結(jié)線蟲病。

關(guān)鍵詞?栝樓;根結(jié)線蟲病;41.7%氟吡菌酰胺懸浮劑;防治效果

中圖分類號?S?432.4+5文獻標識碼?A

文章編號?0517-6611（2019）23-0150-03

doi：10.3969/j.issn.0517-6611.2019.23.043

開放科學(xué)（資源服務(wù)）標識碼（OSID）：

Control Effect of 41.7% Fluopyram SCagainst Trichosanthes kirilowii Root?knot Nematode

CHI Yuan?kai，WANG Tao， ZHAO Wei et al

（Institute of Plant Protection and Agricultural Product Quality and Safety，Anhui Academyof Agricultural Sciences，Hefei， Anhui 230031）

Abstract?[Objective] To investigate the usage method and dosage of 41.7% fluopyram SC to control Trichosanthes kirilowii root?knot nematode. [Method] The root?knot nematode on T. kirilowii collected from Qianshan City， Anhui Province， was identified and cultured in artificial greenhouse;and then the dosage and effect of 41.7% Fluopyram SC was assessed under indoor inoculation and field conditions. [Result] The root?knot nematode on T. kirilowii was identified as Meloidogyne incognita. Drenching each T. kirilowii plant with 80 - 100 μL of 41.7% Fluopyram SC per plant at 10th d and 70th d after seedling emergence， the disease index was reduced by 79.3% - 91.4% in the field. [Conclusion] Drenching T. kirilowii with 41.7% fluopyram SC could control the M. incognita effectively.

Key words?Trichosanthes kirilowii Maxim;Root?knot nematode;41.7% fluopyram SC;Control effect

栝樓（Trichosanthes kirilowii Maxim）為葫蘆科栝樓屬多年生藤本植物，其果實、根均可入藥[1]，尤其栝樓根可加工成天花粉，有較高的藥用價值和經(jīng)濟價值。目前，栝樓在安徽、山東、江蘇等地均有大規(guī)模種植。根結(jié)線蟲（Meloidogyne spp.）是一種重要的植物內(nèi)寄生線蟲，能侵染并危害植物根系。近年來，隨著高毒、劇毒殺線劑的禁用，高效殺線劑較少，加上缺少抗病品種等原因，根結(jié)線蟲病危害不斷加重，并已成為栝樓上危害最重的病害之一[2-4]。受害栝樓根系形成巨大根結(jié)，根系發(fā)育和功能受阻，地上部分葉色發(fā)黃，栝樓籽產(chǎn)量下降，栝樓根品質(zhì)受到極大影響，同時根結(jié)線蟲侵染造成的傷口也為其他病原真菌的侵染創(chuàng)造了機會，容易加重其他根部病害的發(fā)生[5]。

氟吡菌酰胺是一種吡啶乙基苯甲酰胺類高效殺菌殺線劑，其作用于病原物線粒體復(fù)合體Ⅱ，通過阻斷呼吸鏈使病原物體內(nèi)能量耗盡而實現(xiàn)防病[6]，對多種植物根結(jié)線蟲病均有較好的防效[7-9]。筆者通過田間調(diào)查取樣和室內(nèi)分離鑒定，首先明確了安徽省潛山市栝樓根結(jié)線蟲病的病原為南方根結(jié)線蟲（Meloidogyne incognita），進一步結(jié)合栝樓根結(jié)線蟲病田間發(fā)生規(guī)律，探究了41.7%氟吡菌酰胺懸浮劑在栝樓根結(jié)線蟲防治上的應(yīng)用方法與防治效果，旨在為該藥劑防治栝樓根結(jié)線蟲病的科學(xué)合理使用提供理論依據(jù)。

1?材料與方法

1.1?試驗地概況

試驗地位于安徽省潛山市傳文瓜子有限公司的栝樓標準化示范基地，為多年栝樓連作田，田間根結(jié)線蟲病發(fā)生分布相對均勻。栝樓高壟栽培，壟高20～30 cm，壟面寬1.5～2.0 m，壟間距1.0～1.5 m，株距0.8～1.0 m，栽培密度為2 700株/hm2。

1.2?試驗材料

供試栝樓品種為皖簍7號。

供試藥劑：417%氟吡菌酰胺懸浮劑（路富達），拜耳作物科學(xué)（中國）有限公司生產(chǎn);10%噻唑膦顆粒劑（福氣多），日本石原產(chǎn)業(yè)株式會社生產(chǎn)。

1.3?試驗方法

1.3.1?田間病原分子鑒定與室內(nèi)保存。從試驗田內(nèi)采集栝樓根系帶回實驗室洗凈后，在體視鏡下挑取根中發(fā)育成熟的雌蟲，使用常見4種根結(jié)線蟲（M.incognita、M.arenaria、M.javanica、M.hapla）的特異性引物對田間樣本進行PCR鑒定，引物序列及PCR方法參考Xu等[10]。

體視鏡下挑取根部單卵塊，再接種于感病番茄根系（品種為皖雜15）。接種后60 d，洗凈番茄根系，挑取根部卵塊，使用1% NaClO渦旋處理1 min，收集蟲卵，制備成密度為200個/mL的卵懸浮液備用。

1.3.2?室內(nèi)接種。剪取幼嫩的栝樓藤蔓15 cm，扦插入含有100 mL細沙的育苗盆中，培養(yǎng)15～20 d，待栝樓生根后，用于室內(nèi)接種。將400 cm3滅菌土壤內(nèi)加入根結(jié)線蟲卵懸浮液2 mL，混合均勻后，裝入盆中，移栽生根后的栝樓。然后，分別使用41.7%氟吡菌酰胺懸浮劑4.00、2.00、1.00、0.50、0.25 μL/株，對水40 mL進行灌根處理，以清水作為空白對照，每個處理重復(fù)4盆。灌根后15 d，統(tǒng)計根部根結(jié)產(chǎn)生情況，使用酸性品紅染色法進行染色，觀察線蟲侵染情況，計算防治效果，確定田間試驗用藥劑量。

1.3.3?田間試驗。根據(jù)室內(nèi)試驗結(jié)果，設(shè)計田間施藥濃度和劑量。施藥1次的處理，在出苗后10 d施藥，施藥前，在莖基部開環(huán)狀溝，直徑約50 cm、深10 cm，用41.7%氟吡菌酰胺懸浮劑60 μL/株，對水1 000 mL攪拌均勻后灌根，待藥液滲透完成后立刻覆土。施藥2次的處理，分別于栝樓出苗后10和70 d各使用藥劑灌根1次，施藥劑量分別為60、80、100 μL/株，對水1 000 mL攪拌均勻后灌根。每個處理10株，重復(fù)3次。對照藥劑10%噻唑膦用量為100 g/株，均勻撒在環(huán)狀溝內(nèi)并覆土蓋實，在出苗后10 d進行1次施藥。第2次施藥后60和120 d，調(diào)查栝樓根系根結(jié)產(chǎn)生情況，病株分級和根結(jié)指數(shù)計算參考芮凱等[6]的方法，計算防治效果。

1.4?數(shù)據(jù)分析?試驗數(shù)據(jù)使用SPSS 20.0進行統(tǒng)計分析。

2?結(jié)果與分析

2.1?田間根結(jié)線蟲種類鑒定

挑取田間病樣根內(nèi)的根結(jié)線蟲雌蟲，使用根結(jié)線蟲特異性引物進行分子檢測。由圖1可知，挑取的17個雌蟲樣本使用南方根結(jié)線蟲特異性引物可擴增出大小為920 bp的單一條帶，使用其他根結(jié)線蟲種的特異性引物均無條帶。PCR結(jié)果表明，采集自安徽省潛山市栝樓試驗田內(nèi)的根結(jié)線蟲為南方根結(jié)線蟲（M.incognita）。

2.2?室內(nèi)接種

使用41.7%氟吡菌酰胺懸浮劑灌根10 d后，栝樓根系根結(jié)產(chǎn)生情況和根內(nèi)線蟲數(shù)量見表1。由表1可知，對照根系有較多根結(jié)產(chǎn)生，平均為36.7個/株，染色后觀察發(fā)現(xiàn)，根系內(nèi)部有大量根結(jié)線蟲侵入，平均51.3條/株;施藥劑量為0.25～1.00 μL 的處理根系有少量根結(jié)產(chǎn)生，相比對照，根結(jié)數(shù)量減少55.8% ～85.6%，根結(jié)線蟲數(shù)量減少45.0% ～82.4%;施藥量為2.00 ～4.00 μL的處理，根部無根結(jié)產(chǎn)生，且根內(nèi)僅有極少量線蟲侵染，相比空白對照減少901%～95.3%。這表明在土壤量為400 mL的盆砵內(nèi)，使用41.7%氟吡菌酰胺懸浮劑2.00～4.00 μL/株，對水40 mL灌根，可有效控制栝樓根部線蟲的侵入和根結(jié)的產(chǎn)生。

根據(jù)室內(nèi)試驗結(jié)果，結(jié)合田間施藥情況，推算田間灌藥1 000 mL/株時，藥劑用量應(yīng)為50～100 μL/株。因此，在田間試驗中將41.7%氟吡菌酰胺懸浮劑使用量設(shè)定為60、80、100 μL/株3個劑量。

2.3?田間試驗

分別在第2次施藥后60和120 d調(diào)查栝樓根系根結(jié)產(chǎn)生情況。由表2可知，對照根結(jié)線蟲病發(fā)生較重，2次調(diào)查病情指數(shù)分別為64.2和71.1;僅在出苗后10 d施用41.7%氟吡菌酰胺懸浮劑60 μL/株1次的處理防治效果較差，2次調(diào)查的病情指數(shù)分別為22.22和47.41，防治效果分別為65.4%和33.3%，而使用相同施藥量施藥2次，防治效果分別為74.8%和64.6%，防治效果顯著增加;在施藥2次的處理中，用藥量為80和100 μL/株的處理根部產(chǎn)生根結(jié)數(shù)量明顯減少，第2次施藥后120 d防效達79.3%和91.4%，表明在該劑量內(nèi)，41.7%氟吡菌酰胺懸浮劑在栝樓出苗后施藥2次，對根結(jié)線蟲病有良好的防治效果。使用對照藥劑10%噻唑膦顆粒劑處理后，2次調(diào)查防治效果分別為90.4%和58.3%，第2次調(diào)查防治效果相比第1次顯著下降，表明短期內(nèi)噻唑膦對栝樓根結(jié)線蟲病有良好的防治效果，但該藥劑持效期較短。

3?結(jié)論與討論

根結(jié)線蟲是目前農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中危害最嚴重的植物寄生線蟲，每年在全球范圍內(nèi)造成數(shù)百億美元的經(jīng)濟損失[9]。常見的根結(jié)線蟲有4種，分別為南方根結(jié)線蟲（M.incognita）、花生根結(jié)線蟲（M.arenaria）、爪哇根結(jié)線蟲（M.javanica）和北方根結(jié)線蟲（M.hapla），在我國均有分布，其中在安徽省中藥材上發(fā)現(xiàn)花生根結(jié)線蟲和南方根結(jié)線蟲均有危害[11]。研究表明，安徽省潛山市試驗田中采集的栝樓根結(jié)線蟲病病原經(jīng)分子鑒定為南方根結(jié)線蟲，這與安徽、江蘇已報道的病原一致[2-3]。

生產(chǎn)上主要使用阿維菌素、噻唑膦、辛硫磷等藥劑防治栝樓根結(jié)線蟲病[2-4]，氟吡菌酰胺作為一種新型低毒高效殺線劑，其在栝樓根結(jié)線蟲病防治上具有廣闊的應(yīng)用前景。41.7%氟吡菌酰胺懸浮劑用于番茄和黃瓜根結(jié)線蟲病的推薦用量為20 ～30 μL/株，但栝樓根系較番茄和黃瓜發(fā)達，同時，由于栝樓根具有重要的經(jīng)濟價值，降低田間根結(jié)指數(shù)十分重要。因此，需要探究41.7%氟吡菌酰胺懸浮劑在栝樓上的用法和用量。該研究結(jié)果表明，分別在出苗后10和70 d，使用41.7%氟吡菌酰胺80～100 μL/株，對水1 000 mL后，在栝樓根部開環(huán)狀溝灌根，可以有效降低栝樓根部根結(jié)指數(shù)，防治根結(jié)線蟲病效果較好。

參考文獻

[1] 滕勇榮，王連俠，張永清.瓜蔞藥理研究進展[J].齊魯藥事，2010，29（7）：417-419.

[2] 趙雷，張紅艷，萬景旺，等.江蘇省瓜蔞根結(jié)線蟲種類鑒定[J].西南農(nóng)業(yè)學(xué)報，2012，25（2）：517-520.

[3] 徐勁峰，吳彩玲，朱松濤.瓜蔞根結(jié)線蟲病發(fā)生危害及綜合控制[J].農(nóng)業(yè)與技術(shù)，2012，32（6）：88，90.

[4] 馬沖，馬士仲，劉震，等.栝樓根結(jié)線蟲病的發(fā)生規(guī)律及綜合防治技術(shù)[J].安徽農(nóng)學(xué)通報，2011，17（20）：64-65.

[5] ABAD?FUENTES A，CEBALLOS?ALCANTARILLA E，MERCADER J V，et al.Determination of succinate?dehydrogenase?inhibitor fungicide residues in fruits and vegetables by liquid chromatography?tandem mass spectrometry[J].Anal Bioanal Chem，2015，407（14）：4207-4211.

[6] 芮凱，王會芳，符美英，等.新型藥劑氟吡菌酰胺對香蕉根結(jié)線蟲病的防效[J].中國熱帶農(nóng)業(yè)，2016（4）：35-37.

[7] 周建宇，袁濤，葉姍，等.氟吡菌酰胺不同施藥方式對水稻擬禾本科根結(jié)線蟲的防治效果[J].植物保護學(xué)報，2018，45（6）：1412-1418.

[8] 劉曉宇，陳立杰，姚美玲，等.新型農(nóng)藥氟吡菌酰胺對番茄根結(jié)線蟲的田間防效[J].中國植保導(dǎo)刊，2018，38（8）：75-77.

[9] ADAM M A M，PHILLIPS M S，BLOK V C.Molecular diagnostic key for identification of single juveniles of seven common and economically important species of root?knot nematode（Meloidogyne spp.）[J].Plant Pathol，2007，56（1）：190-197.

[10] XU J H，LIU P L，MENG Q P，et al.Characterization of Meloidogyne species from China using isozyme phenotypes and amplified mitochondrial DNA restriction fragment length polymorphism[J].European journal of plant pathology，2004，110：309-315.

[11] 王曦茁，馬建偉，汪來發(fā)，等.安徽省3種中草藥植物的根結(jié)線蟲種類鑒定[J].安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報，2013，40（5）：758-764.