辣椒籽抗菌肽提取條件優化及分離純化

韓玉竹，李平蘭，何 琴，趙展展，劉雪文，楊葉梅,3,*

（1.莫南大學動物科學學院，重慶 402460；2.中國農業大學食品科學與營養工程學院，北京食品營養與人類健康高精尖創新中心，北京 100083；3.重慶市畜牧科學院，重慶 402460）

抗菌肽是生物體自身產生的防御病原體入侵的小分子肽（通常分子質量小于10 kDa），是生物體先天免疫重要組成部分，可拮抗細菌、病毒、原生動物、絲狀真菌和酵母等[1-2]。植物和其他生物組織一樣，也會連續不斷地受到致病微生物的威脅，在致病微生物和自身的協同進化下，推動了植物自身防御機制的形成[3-4]。其中植物種子因含有豐富的營養物質，更容易協同進化產生抗菌類物質，抗菌肽就是其中的一類[5]。由于抗菌肽自身的蛋白質特性、無污染性、發全性及抗菌特性，其在食品防腐保鮮、防腐劑替代研究和畜牧養殖業中作為飼料添加劑的應用研究具有優勢，其科研和應用潛力引起國內外相關科學研究者和企業研發部的廣泛關注。

辣椒（Capsicum annuum L.）作為一種常用的調味品，在世界廣泛栽培。我國辣椒的種植面積約占所有蔬菜面積的10%，年產量高達2 800萬 t。但占其干果質量30%～60%的辣椒籽，在加工過程中卻未被充分利用，造成資源浪費[6]。據報道，辣椒籽中主要含膳食纖維、蛋白質和脂肪，其中蛋白質占其質量分數的17.30%左右，包含9 種必須氨基酸[7-8]。但是，我國辣椒種子蛋白的加工利用還有待開發。

近年來，網絡技術發展也非常的迅速，而在智能電網中的繼電保護裝置，其實本質上也是一個計算機裝置，作用就是對系統進行全面的監控工作，對整個網絡的運行進行指導，讓智能電網的系統運行能夠高效和安全。同時，繼電保護裝置在對電力信息的數據和故障信息進行獲取的時候，會及時反饋信息到系統的網絡控制中心。另外，隨著我國智能電網的發展越來越迅速，在自動化程度方面，電力系統也做得越來越好，這樣就能夠保障了電力系統的安全和高效。

實驗室前期開展植物源抗菌肽篩選時，發現辣椒籽抗菌肽具有廣譜抑制真菌的效果，尤其對谷類產品常見腐敗菌黃曲霉具有強烈的抑制作用。本研究在此基礎上優化了辣椒籽抗菌肽的提取條件，并結合超濾離心、葡聚糖凝膠層析等步驟，以期得到純度較高的目標產物，為辣椒籽以及植物源抗菌肽的開發利用提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

辣椒籽品種分別為天鷹小椒、石竹紅、新化、子彈頭、印度椒和貴州燈籠椒，購于重慶市牧榮農產品銷售有限公司。

供試菌株：前期從玉米中分離篩選獲得的黃曲霉（Aspergillus flavus）為莫南大學動物科學學院微生物學實驗室保藏菌種。

1.2 儀器與設備

BSY-200T直立式多功能粉碎機 永康市鉑歐五金制品有限公司；MYP11-2恒溫磁力攪拌器 上海梅穎浦儀器儀表制造有限公司；EL104電子天平 賽多利斯科學儀器（北京）有限公司；2RH-250恒溫培養箱 中國雪柜實業有限公司；IKA漩渦振蕩器 廣州儀科實驗室技術有限公司；高速離心機 艾本德中國有限公司；立式壓力蒸汽滅菌鍋 上海博訊實業有限公司醫療設備廠；冷凍干燥器 上海蘭儀實業有限公司；凝膠層析柱、DHL-1恒流泵、自動部分回集器 上海青浦瀘莫儀器廠；垂直板電泳儀 北京百晶生物技術有限公司；凝膠成像分析系統 上海勤翔科學儀器有限公司。

1.3 方法

2.2.4 硫酸銨飽和度對辣椒籽抗菌肽抑菌活性的影響

1.3.4 響應面優化

1.3.2 抑菌活性的測定

夏津縣北城水系生態水土保持工程的實施，使項目區的林木覆蓋率提高到15%，沙化和荒漠化情況得到了顯著改善，田園小氣候得到較大改善，農副產品商品率提高，經濟效益和生態效益、社會效益收益顯著，為沙化、荒漠化防治提供了成功經驗。

以黃曲霉為指示菌，采用牛津杯平板擴散法測定辣椒籽蛋白提取物的抑菌活性[9]。將黃曲霉在PDA斜面上活化，待孢子長成后加入滅菌水，制成濃度為106個/mL的孢子懸浮液。移取1 mL孢子懸浮液到培養皿（直徑90 mm）中，倒入冷卻至45 ℃的PDA培養基20 mL，搖勻制備含菌平板。在含菌平板上放置滅菌的牛津杯，每個牛津杯里加入150 μL無菌蛋白提取液，28 ℃培養48 h后，測量抑菌圈直徑。

1.3.3 辣椒籽抗菌肽提取條件優化

1.3.3.1 浸提液的選擇

參考植物種子抗菌肽提取的相關文獻，選用5 種浸提液：去離子水[10]、磷酸鹽緩沖液（phosphate buffer saline，PBS，0.02 mol/L，pH 7.4）、EDTA緩沖液（10 mmol/L Na2HPO4，15 mmol/L NaH2PO4，100 mmol/L KCl，1.5% EDTA，pH 5.4）[11-13]、Tris-HCl緩沖液（20 mmol/L Tris-HCl，pH 7.6）[14-15]、75%乙醇溶液。其他提取條件分別為：料液比1∶5（g/mL），4 ℃浸提12 h，硫酸銨飽和度70%。

1.3.3.2 料液比的選擇

分別選用1∶3、1∶5、1∶7、1∶9（g/mL）的料液比，在EDTA緩沖液中添加脫脂辣椒籽粉，4 ℃放置過夜后，飽和度70%硫酸銨沉淀，比較料液比對抗菌肽提取的影響。

1.3.3.3 浸提時間的選擇

6 種辣椒籽品種（天鷹小椒、石竹花、新化、子彈頭、印度椒和燈籠椒）的蛋白提取物均對黃曲霉生長具有抑制作用（表3）。不同品種辣椒籽的抑菌活性有差異，其中貴州燈籠椒和印度椒所含抗菌肽的抑菌效果顯著高于其他4 個品種。結合辣椒籽的獲取及經濟成本，選擇燈籠椒辣椒籽作為研究材料，進行后續研究。

1.3.3.4 硫酸銨最佳飽和度的確定

參加捐款的干部職工紛紛表示，災區群眾不會孤獨，水利系統的干部職工永遠與災區人民心連心，繼續為受災地區群眾提供更多的支持和幫助。

結合上述最佳條件，對過濾后的辣椒籽浸提液分別加入不同飽和度（40%、50%、60%、70%、80%、90%）的硫酸銨，測定沉淀產物等量溶液復溶后的抑菌圈直徑，以確定硫酸銨沉淀最適飽和度。

10 g辣椒籽粉碎后，用無水乙醚浸提過夜，去除粗脂肪。按料液比1∶5（g/mL）添加至乙二胺四乙酸（ethylenediaminetetraacetic acid，EDTA）緩沖液中，4 ℃條件下浸提過夜。將浸出溶液用8 層紗布過濾，8 000 r/min離心15 min，取上清液按70%飽和度計量所需的固體硫酸銨量，研磨粉碎后緩慢加入，均勻攪拌至充分溶解，4 ℃靜止4 h，10 000 r/min離心15 min，沉淀用等體積（10 mL）去離子水復溶，過濾除菌，進行后續抑菌活性的檢測。

2.2.2 料液比對辣椒籽抗菌肽抑菌活性的影響

表1 響應面試驗因素與水平Table 1 Factors and levels used for central composite design

1.3.5 模型的驗證

對于 A 井，FB＝8·4m，GH＝153·9m，所以AB＝0·4m。A井長興組分層頂面為-5 140·4m，故氣水外邊界為-5 140.8m，選-5 140m；氣水內邊界為-5 132.4m，選-5 130m。

采用響應面法優化辣椒籽抗菌物質的提取工藝，并根據優化后的條件參數進行驗證實驗。

1.3.6.2 凝膠色譜層析

1.3.6 抗菌肽的分離純化

1.3.6.1 抗菌肽脫鹽及粗分離

人脫離不了社會團體而存在，猶如人類無法避開自然規律的限制，人是自然的產物同樣也是社會的構成，人不可能脫離外在世界而獨自存在。“每個人的自由發展是一切人自由發展的條件”[21]，反之只有在集體自由之中才能體驗自我的自由。人若獨立于社會集體之外，反而獲得的是一種茫然失據的孤獨與空虛。自由何為？人類的生存、自由與發展在集體中的共同交涉下才能夠把握與實現，把外界屏蔽于自我之外的個體，只是將自由與自我割裂。社會文明給人類帶來的是狹小的空間與拘束感，體育則是給予人類歡騰的場域與無束縛感。體育讓人類在公共空間中集體釋放天性、呈現自我。

對辣椒籽抗菌肽粗提物復溶后，1 kDa透析袋4 ℃透析24 h，期間換液3～4 次，除去小分子糖、鹽等。將透析后的提取液加入10 kDa超濾管，5 000 r/min離心1 h，分別回集超濾管上面的截流液和下面的管底液，檢測其抑菌活性，真空冷凍干燥保存備用。

1.1.4 結局指標 ①上消化道出血發生率；②病死率；③血鈣濃度；④血磷濃度；⑤血鎂濃度；⑥甲狀旁腺激素（PTH）水平；⑦堿性磷酸酶（AKP）水平；⑧血肌酐水平；⑨腎小球濾過率。

新課標對課堂教學的要求就是教學活動的有效性和高效性，而創新思維的培養是實施高效課堂的根本。我們的任務首先就是培養學生的創新思維，努力提升學生的領悟水平。培養學生的創新意識和創新能力，就要培養學生敏銳的觀察力、高效持久的記憶力、創造性的思維能力、操作能力、頑強的毅力、豐富的想象力等。我們要不斷引導學生領悟問題，在常規方法行不通時，也有特殊方法讓我們解決問題，培養意志品質和信心決心。課堂教學中教學方式和教學內容的革新，是當今教學改革的必需。教師要積極指導學生運用已有知識，運用已有能力去進行創造性思維活動，通過不斷歷練，達到學會學習的境地，為他們的思維發展插上飛翔的翅膀。

采用填料葡聚糖凝膠G-50進行凝膠層析，用去離子水對柱子進行平衡，直到檢測洗脫液pH值恒定時為止。將超濾離心后回集到的抑菌效果好的目標產物配制成10 mg/mL溶液，濾膜（0.45 μm）過濾后按5 mL的加樣體積進行上樣。用去離子水洗脫樣品，恒流泵設定恒速為20 r/min，50 min/管，每管約4 mL，洗脫時間為250 min。

將緩沖器軸向力減去阻尼力，獲得氣彈力和摩擦力；繪制“緩沖系統行程—氣彈力和摩擦力”曲線，與靜壓曲線進行對比，根據兩條曲線的差異情況確定起落架緩沖功能是否異常，如果異常，根據異常出現的起始點確認異常時的緩沖器行程，并記錄起落架載荷。

1.3.6.3 樣品回集

紫外檢測波長為280 nm，逐管檢測蛋白質含量，根據檢測值，分別回集出現波峰時所對應的組分，冷凍干燥。用去離子水制備適當濃度進行抑菌實驗，以確定目標樣品。

1.3.6.4 Tricine-十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳（Tricine-sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis，Tricine-SDS-PAGE）檢測抗菌肽分子質量

表2 電泳膠配方Table 2 Compositions of separating and stacking gels

將通過Sephadex G-50色譜柱分離純化獲得的目標樣品用去離子水復溶，配制合適的濃度。取20 μL目標樣品與5 μL上樣緩沖液混合，在水浴中煮沸5 min，然后置冰浴中快速冷卻。根據表2的配方制備濃縮膠（15.5%）、夾層膠（10%）和分離膠（4%），3 種膠的制膠體積比為4∶1.5∶1。

取超低分子質量蛋白Marker 10 μL、待測樣品20 μL分別上樣，電泳時，先設定30 V電壓，待樣品進入分離膠上沿時，電壓調至100 V，直至溴酚藍距離膠底部1 cm左右時停止電泳，整個電泳時間大約需要4～5 h。電泳結束后，將凝膠浸入5%戊二醛固定液中固定20 min，然后用考馬斯亮藍G-250染色液搖床染色40～60 min，用蒸餾水洗滌凝膠，脫色液脫色后，凝膠成像儀照相保存。

1.4 數據的統計與分析

數據采用Excel處理并運用SPSS 20.0進行統計和分析。

2 結果與分析

2.1 不同品種辣椒籽蛋白提取物對黃曲霉的抑菌活性

將脫脂后的辣椒籽粉以1∶5（g/mL）的料液比與EDTA緩沖液混合后，于4 ℃分別浸提4、8、12、16、20、24 h，比較浸提時間對辣椒籽抗菌物質提取的影響。

表3 不同品種辣椒籽抗菌肽對黃曲霉的抑菌活性Table 3 Antifungal activities of antimicrobial peptides from seeds of different varieties of hot pepper against A. fl avus

2.2 抗菌肽提取條件的優化

2.2.1 緩沖液的選擇對抗菌肽提取的影響

如圖1所示，幾種浸提液浸提后獲得的抗菌肽均對黃曲霉生長具有抑制作用。其中EDTA緩沖液浸提后的抑菌圈直徑顯著大于其他幾組（P＜0.05），因此后續試驗選用EDTA緩沖液進行。

圖1 不同緩沖液對抗菌肽抑菌活性的影響Fig. 1 Effect of different extraction buffers on the activity of antifungal peptides from hot pepper seeds

根據單因素試驗結果，選取影響抗菌物質產量的3 個因素（料液比、浸提時間、硫酸銨飽和度）為自變量，抑菌圈直徑為響應值，采用Box-Behnken設計方法，設置3因素3水平響應面試驗，試驗因素與水平見表1。

圖2 料液比對抗菌肽抑菌活性的影響Fig. 2 Effect of solid-to-solvent ratio on the activity of antifungal peptides from hot pepper seeds

由圖2可知，當料液比為1∶5（g/mL）時，提取物的抑菌圈直徑顯著大于其他幾組（P＜0.05），效果最好，因此，后期響應面優化試驗選用1∶5（g/mL）料液比作為中心試驗點。

2.2.3 浸提時間對辣椒籽抗菌肽抑菌活性的影響

圖3 浸提時間對抗菌肽抑菌活性的影響Fig. 3 Effects of extraction time on the activity of antifungal peptides from hot pepper seeds

如圖3所示，隨著浸提時間的延長，抗菌產物的得率增加，當浸提時間為16 h時，提取率最大，當浸提時間大于16 h，抑菌圈直徑略有減小，但差異不顯著（P＞0.05）。因此，確定抗菌肽最適浸提時間應控制在16 h左右，并選擇其為下一步響應面試驗的中心試驗點。

1.3.1 辣椒籽蛋白提取物的制備

由圖4可知，隨著硫酸銨飽和度的升高，其沉淀所得物對黃曲霉菌的抑菌圈直徑越大，但當硫酸銨飽和度達到80%時，沉淀出的抑菌產物與90%飽和度硫酸銨的抑菌效果無顯著差異（P＞0.05），綜合考慮得率和硫酸銨用量，選擇80%飽和度的硫酸銨為后續響應面試驗的中心試驗點。

圖4 硫酸銨飽和度對抗菌肽抑菌活性的影響Fig. 4 Effects of ammonium sulfate saturation on the activity of antifungal peptides from hot pepper seeds

2.3 辣椒籽抗菌肽提取條件的響應面優化

2.3.1 回歸模型的建立

表4 中心組合試驗設計及結果Table 4 Central composite design with experimental results

響應面試驗設計和結果如表4所示，使用Design Expert 8.0.6軟件對數據進行多元回歸擬合，獲得辣椒籽抗菌肽的抑菌圈直徑（Y）對料液比（A）、浸提時間（B）、硫酸銨飽和度（C）的多項回歸方程：

2.3.2 回歸模型方差分析

將以上回歸模型進行方差分析，結果如表5所示。模型回歸極顯著（P=0.001 0），失擬檢驗不顯著（P=0.428 79），說明未知因素對試驗結果干擾較小。另外，模型的決定系數R2為0.949 3，表明方程與實際的測試數據吻合良好，較好反映了抗菌肽抑菌圈直徑與料液比、浸提時間、硫酸銨飽和度的關系，因此，該模型可用于分析和預測辣椒籽抗菌肽的提取條件。通過F檢驗確定回歸方程中每個變量對響應值影響的顯著性，模型一次項A、B、C不顯著；二次項A2、B2、C2均處于極顯著水平；交互項AB、AC、BC均不顯著。

表5 擬合二次多項式模型的方差分析Table 5 Analysis of variance (ANOVA) for the fitted quadratic polynomial model

2.3.3 響應面分析

1.4 統計學分析 運用SPSS 21.0統計軟件對數據進行統計學分析。計數資料以[例(%)]表示，數據比較采用χ2檢驗和描述性分析，P<0.05為差異有統計學意義。對差異有統計學意義的變量采用Logistic多因素進行逐步回歸分析。重復測量的計量資料采用方差分析，兩兩比較采用LSD-t檢驗。

根據回歸方程制作的響應面立體分析圖和等高線圖如圖5所示，分別反映了3 個因素（料液比、浸提時間、硫酸銨飽和度）兩兩交互作用對響應值的影響。從方程可以看出，二次項的系數都是負數，以它為特征的拋物面開口方下，具有極大值點。通過Design Expert 8.0.6.1軟件分析，辣椒籽抗菌肽最佳提取條件為料液比1∶5.05（g/mL）、浸提時間16.13 h、硫酸銨飽和度81.15%，在此條件下抗菌肽的抑菌圈直徑為23.77 mm。

圖5 各因素對辣椒籽抗菌肽抑菌活性影響的響應面及等高線圖Fig. 5 Response surface and contour plots showing the interactive effect of various factors on the activity of antifungal peptides from hot pepper seeds

2.3.4 回歸模型的驗證

為進一步驗證預測值，將優化確定的提取條件進行驗證，重復6 次，結果顯示抗菌肽的抑菌圈直徑平均值為23.89 mm，與預測值擬合率為99.49%，表明預測值和實際值吻合良好，優化模型可靠。優化后抗菌肽活性比優化前（12.34 mm）提高了93.60%，表明本實驗所確定的優化方案的設計合理有效，獲得的提取條件可以顯著提高抗菌肽的得率。

2.4 抗菌肽的分離純化

2.4.1 抗菌肽脫鹽及粗分離

3）主控芯片發送AT+NSOST指令，BC95模組發送數據至云服務器，指令中需填入云服務器的IP地址、端口號、待發送的數據長度和數據。

目前，國家對于區域創新的體制較為成熟，建立了較為健全的機制，但是在區域創新能力比較優勢的研究上較為薄弱，尚未有遼寧地區獨特的指標體系。朱玉春、付輝輝利用專利授權量描述區域創新能力，以我國八區域劃分理論為基礎，通過1996年-2005年的相關數據分析認為我國區域創新能力差異呈擴大趨勢。甄峰曾在2000年提出以知識創新能力和技術創新能力為基礎和核心的評價體系，具體指標如表：

將辣椒籽抗菌肽用透析袋脫鹽處理后，再使用10 kDa的超濾管超濾離心，使辣椒籽抗菌肽達到粗分離目的，分別檢測小于10 kDa組分和大于10 kDa組分的抑菌效果，選擇具有良好抑菌效果的組分（＜10 kDa）進行下一步分離純化。

2.4.2 葡聚糖凝膠柱層析

將10 kDa超濾管超濾后抑菌效果好的組分用葡聚糖凝膠G-50柱層析，以實現分離純化的目的。通過上樣量5 mL；流速20 r/min；洗脫時間250 min，在波長280 nm測定吸光度。如圖6所示，分別回集3 組分峰，以黃曲霉為指示菌，分別檢測各組分的抑菌活性。結果顯示組分3的抑菌效果最好，確定組分3為目標樣品。因組分2和組分3的峰有少部分重疊，為保障目標樣品的純度，通過不回集與組分2重疊的回集管，并對目標抗菌肽樣品進行二次柱層析純化，冷凍干燥后進行后續分子特性檢測。

圖6 凝膠層析結果Fig. 6 Gel chromatography of antifungal peptides from hot pepper seeds

2.4.3 目標樣品的分子質量測定

將葡聚糖凝膠柱-G50柱層析分離得到目標樣品使用Tricine-SDS-PAGE檢測其純度和分子質量大小。如圖7所示，抗菌肽只有一條清晰條帶，說明純化效果較好，通過和超低分子質量蛋白質Marker對比可估計其分子大小在7.8 kDa左右。

圖7 Tricine-SDS-PAGE檢測結果Fig. 7 Results of Tricine-SDS-PAGE

3 討 論

發全、高效天然生物防腐劑的開發逐漸成為農產品防腐保鮮領域的研究熱點[16-17]。植物抗菌肽是植物屏障防御系統的重要組成部分[18-19]。目前已從許多植物種類的種子、花、根和葉中分離出對農產品腐敗菌、植物病原菌以及人類致病菌有活性的抗菌肽[20-24]。因此，植物抗菌肽被認為是具有重要應用前景的抗菌類化合物。

韓玉竹等[9]通過對解淀粉芽孢桿菌H15所產抗菌肽的提取條件進行優化，獲得了比優化前高53.48%的優化條件。胡欣蕾等[25]以花臉香蘑菌絲體為原料，在單因素試驗的基礎上結合正交試驗優化花臉香蘑菌絲體多糖提取條件，使花臉香蘑菌絲體多糖的提取率由最低的3%左右提高到15.79%。天然抗菌肽的提取方法目前有硫酸銨沉淀法、堿溶酸沉法和有機溶劑提取等。其中最常用于植物源抗菌肽的是硫酸銨沉淀法[8,26-27]，因為硫酸銨溶解性好，能形成高鹽環境，有利于蛋白沉淀，同時在純化過程中不會影響蛋白活性。然而，由于原料理化特性差異，提取工藝也不同。目前還鮮有辣椒籽抗菌肽提取工藝的報道。因此，本研究依據前人的工作基礎，考察不同浸提液、料液比、浸提時間、硫酸銨飽和度對辣椒籽抗菌肽提取的影響。首先應用單因素試驗，初步評價各因素對辣椒籽抗菌肽的提取效果，然后進一步在單因素試驗基礎上，通過響應面法對主要影響因素（料液比、浸提時間、硫酸銨飽和度）進行優化和評價，建立辣椒籽抗菌肽提取條件的二次多項式回歸模型，并利用統計學方法對該模型進行顯著性檢驗。通過對該模型進行求導和解矩陣可知，脫脂辣椒籽粉按料液比1∶5.05（g/mL）加入到EDTA緩沖液中浸提16.13 h后取上清液，添加81.15%飽和度的硫酸銨可以獲得較大的得率，預測值為23.77 mm。在此條件下再進行驗證實驗，得到抗菌物質抑菌抑菌圈直徑23.89 mm/150 μL，與預測值擬合率達99.49%，比優化前（12.34 mm）提高了93.60%。說明本研究所確定的優化方案的設計合理有效，獲得的提取條件能夠明顯提高抗菌肽產量。

抗菌肽的分離純化主要是基于原料的物理化學性質，通常包括超濾、凝膠過濾層析、離子交換層析等分離步驟。在實際操作中，為達初步或精確分離的目的，一般會選擇2 種或更多種純化方法[28]。姜太玲[29]將花椒籽抗菌肽經過10 kDa和5 kDa的超濾管進行分段分離后再選擇抑菌效果最好的組分過葡聚糖凝膠柱層析，獲得達到電泳純的目的樣品。王戰勇等[30]發現使用葡聚糖凝膠-G50和葡聚糖凝膠G-25串聯凝膠層析的效果明顯比只使用葡聚糖凝膠G-50的效果好。本研究通過10 kDa超濾粗分離后，選擇抑菌效果好的組分過葡聚糖凝膠G-50柱層析，純化后的抗菌肽經Tricine-SDSPAGE檢測已達到電泳純，分子質量在7.8 kDa左右，說明辣椒籽蛋白提取物的主要抑菌成分為抗菌肽。研究結果可為后續辣椒籽抗菌肽基本特性研究及抗菌肽的產業化應用提供參考依據。

10.為加快浦東新區建設，提供開發、投資的必要基礎設施，浦東新區新增財政收入，將用于新區的進一步開發。

（1）社會團體財產權。社會團體法人財產觀認為行業協會商會、工會、宗教組織等社會團體應對合法所得享有財產權，政府或個人等投入社會團體的資源不應視為投資行為而享有任何財產權利。如賈西津（2016）認為“將行政支持誤當成行政投資……易形成國有資產的不當擴大化”，建議采用“行業協會資產”這一政策性概念。沈永東、宋曉清（2016）提出，行業協會商會脫鉤改革要確保行業協會商會真正擁有獨立自主權，擁有獨立的社團法人地位，政府不應干涉行業協會商會獨立自主開展活動。