乳腺癌動態(tài)增強(qiáng)磁共振成像特征與分子預(yù)后標(biāo)志物的關(guān)系

石 琴，付志明，張 文，盧曉娟，王曉野，貝金玲

廣東省珠海市中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院影像科，廣東 珠海519000

乳腺癌發(fā)病率居于中國女性惡性腫瘤的首位，研究證實雌激素受體（estrogen receptor，ER）、孕激素受體（progesterone receptor，P R）、人類表皮生長因子受體-2（h u m a n epidermal growth factor receptor-2，HER2）及Ki-67標(biāo)記指數(shù)是乳腺癌重要的預(yù)后預(yù)測因子，而由此產(chǎn)生的luminal A、luminal B、HER2過表達(dá)及三陰性4種分子亞型可以更全面地評估乳腺癌預(yù)后的異質(zhì)性［1-2］。動態(tài)增強(qiáng)磁共振成像（dynamic contrast enhanced magnetic resonance imaging，DCE-MRI）融合了腫瘤病灶的形態(tài)學(xué)與血流動力學(xué)特征，現(xiàn)已廣泛應(yīng)用于乳腺疾病的診斷和鑒別診斷，是一種較為成熟的影像學(xué)檢查技術(shù)，但其與乳腺癌的分子預(yù)后標(biāo)志物之間的相關(guān)性研究仍缺乏足夠證據(jù)［3-4］。筆者擬對乳腺癌患者DCE-MRI圖像變化進(jìn)行回顧性分析，旨在探討其與分子生物學(xué)預(yù)后標(biāo)志物的相關(guān)性，從而為術(shù)前預(yù)測分型及術(shù)后臨床個體化治療提供依據(jù)。

1 資料和方法

1.1 一般資料

選擇2013年1月—2015年12月廣東省珠海市中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院影像科收治的68例乳腺癌患者。入組標(biāo)準(zhǔn)：① 均經(jīng)手術(shù)后病理學(xué)檢查證實為乳腺癌；② 術(shù)前1周內(nèi)行乳腺M(fèi)RI檢查，檢查前未行穿刺活檢、新輔助化療及內(nèi)分泌等治療；③ 病灶最大徑≥1 cm；④ MRI圖像質(zhì)量良好可供分析。患者年齡34～72歲，平均（48.5±4.7）歲；病灶直徑0.9～10.4 cm，平均（4.4±1.2）cm。所有患者檢查前均已簽署知情同意書。

1.2 儀器與方法

1.2.1 MRI掃描

使用美國GE公司的1.5T Signa HDx磁共振檢查儀，雙時相8通道乳腺表面專用線圈。患者取俯臥位，雙乳自然懸垂于線圈。對于月經(jīng)期的患者適當(dāng)推遲檢查時間，于月經(jīng)過后的第2周進(jìn)行。DCE-MRI：采用容積內(nèi)插體部檢查序列軸面掃描，重復(fù)時間（repetition time，TR）6.53 ms，回波時間（echo time，TE）3.2 ms，層厚2 mm，翻轉(zhuǎn)角為15°，視野為320 mm×320 mm，矩陣410×320。對比劑使用釓噴酸葡胺，劑量為0.1 mmol/kg，注射流率為2 mL/s，團(tuán)注結(jié)束后以相同速率注入20 mL的0.9% NaCl溶液沖管。

1.2.2 圖像分析與數(shù)據(jù)采集

掃描結(jié)束后，采用GE ADW 4.4自帶軟件對圖像進(jìn)行后處理。根據(jù)乳腺影像報告和數(shù)據(jù)系統(tǒng)（Breast Imaging Reporting and Data System，BIRADS）分析DCE-MRI特征，主要包括腫瘤直徑、邊緣輪廓（光整、毛刺和不規(guī)則形）、腫瘤內(nèi)部強(qiáng)化（均勻、不均勻、環(huán)形強(qiáng)化），以及早期強(qiáng)化率、達(dá)峰時間等。

1.3 免疫組織化學(xué)檢查方法及結(jié)果判定

術(shù)后腫瘤組織經(jīng)4%中性緩沖甲醛溶液固定，組織脫水、二甲苯透明、石蠟包埋后，4 μm連續(xù)切片，按常規(guī)免疫組織化學(xué)SP法進(jìn)行ER、PR、HER2和Ki-67檢測。

（1）ER和PR：ER、PR陽性產(chǎn)物定位于細(xì)胞核，陽性細(xì)胞為細(xì)胞核內(nèi)出現(xiàn)棕黃色顆粒。陽性細(xì)胞＜1%為陰性，陽性細(xì)胞≥1%為陽性。

（2）HER2：HER2陽性產(chǎn)物為棕黃色顆粒，定位于細(xì)胞膜。無染色或≤10%腫瘤細(xì)胞呈現(xiàn)弱的、不完整的胞膜染色為陰性（-），＞10%的腫瘤細(xì)胞有不完整細(xì)胞膜染色為弱陽性（+），＞10%的腫瘤細(xì)胞有較弱但完整的細(xì)胞膜染色或者≤10%的腫瘤細(xì)胞呈現(xiàn)強(qiáng)且完整的胞膜染色為中度陽性（++），＞10%的腫瘤細(xì)胞較強(qiáng)的完整細(xì)胞膜染色為強(qiáng)陽性（+++）。將（-）和（+）記為HER2陰性，（+++）記為HER2陽性。HER2為（++）的患者，需進(jìn)一步通過熒光原位雜交技術(shù)進(jìn)行基因檢測，擴(kuò)增者定義為HER2陽性，反之為陰性。

（3）Ki-67：細(xì)胞核內(nèi)出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽性反應(yīng)，高倍鏡下計數(shù)1 000個細(xì)胞，其中陽性細(xì)胞≤14%為陰性，＞14%為陽性。

1.4 統(tǒng)計學(xué)處理

采用SPSS 17.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計分析，組間計數(shù)資料的比較采用χ2檢驗，相關(guān)分析采用Spearman等級相關(guān)分析，檢驗水準(zhǔn)α=0.05。

2 結(jié) 果

2.1 乳腺癌患者的臨床病理學(xué)資料

6 8 例乳腺癌患者的病理學(xué)檢查結(jié)果：浸潤性導(dǎo)管癌6 0 例（8 8.2 4%），導(dǎo)管原位癌5例（7.35%），黏液癌3例（4.41%）。組織學(xué)分級：I 級11 例（1 6.1 8%），Ⅱ級28例（41.18%），Ⅲ級29例（42.65%）。TNM分期：I期19例（27.94%），Ⅱ期30例（44.12%），Ⅲ期14例（20.59%）。

2.2 不同增強(qiáng)特征與分子預(yù)后標(biāo)志物的相關(guān)性

與ER陽性者比較，ER陰性者大腫塊病灶（≥2 cm）、病灶邊緣光整的比例明顯升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；與PR陽性者比較，PR陰性者病灶邊緣光整的比例明顯升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；與HER2陽性者比較，HER2陰性者大腫塊病灶的比例明顯降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；與Ki-67陽性者比較，Ki-67陰性者大腫塊病灶、病灶邊緣光整的比例明顯降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。各分子預(yù)后標(biāo)志物的內(nèi)部強(qiáng)化特征比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05，表1）。

表1 不同增強(qiáng)特征與分子預(yù)后標(biāo)志物的相關(guān)性（n）

2.3 乳腺癌血流動力學(xué)參數(shù)與生物學(xué)標(biāo)志物的相關(guān)性

6 8 例乳腺癌患者M(jìn) R I 達(dá)峰時間為（2 0 3.1 5±1 5.4 6）s，早期強(qiáng)化率為（125.17±18.24）%。達(dá)峰時間與ER、PR陽性表達(dá)呈正相關(guān)（P＜0.05，圖1～2），與HER2表達(dá)、Ki-67標(biāo)記指數(shù)均無顯著相關(guān)性（P＞0.05）。早期強(qiáng)化率與各分子生物學(xué)標(biāo)志物均無顯著相關(guān)性（P＞0.05，表2）。

表2 乳腺癌血流動力學(xué)參數(shù)與生物學(xué)標(biāo)志物的相關(guān)性

圖1 腫塊型乳腺癌影像學(xué)及病理學(xué)檢查結(jié)果圖像

圖2 非腫塊型乳腺癌影像學(xué)及病理學(xué)檢查結(jié)果圖像

3 討 論

乳腺癌是一類高度異質(zhì)性的惡性腫瘤，基于組織學(xué)形態(tài)的傳統(tǒng)乳腺癌分型方式無法全面系統(tǒng)地反映腫瘤發(fā)生的分子機(jī)制，與臨床病理及預(yù)后的關(guān)系不強(qiáng)［5］。隨著分子生物學(xué)的研究深入，ER、PR、HER2、Ki-67等標(biāo)志物被證實在乳腺癌生物學(xué)行為的判斷及預(yù)后評估中具有應(yīng)用價值［6-7］。ER、PR主要分布于乳腺上皮細(xì)胞，陽性表達(dá)的癌細(xì)胞呈激素依賴性生長，分化程度高，惡性程度低。HER2、Ki-67則與細(xì)胞增殖有關(guān)，陽性率越低，說明細(xì)胞增殖程度低，預(yù)后越好。近年來多項研究顯示，影像學(xué)表現(xiàn)是以分子生物學(xué)標(biāo)志物的表達(dá)為基礎(chǔ)，特異性分子預(yù)后標(biāo)志物的陽性表達(dá)可導(dǎo)致組織病理學(xué)的改變，分析分子預(yù)后標(biāo)志物的特異性DCE-MRI表現(xiàn)，對病情及預(yù)后評估具有較大臨床意義［8-9］。

毛刺征是從腫瘤邊緣向乳腺周圍組織呈放射狀擴(kuò)散的細(xì)線條影，由乳腺小管及周圍纖維結(jié)締組織構(gòu)成，被視為惡性腫瘤的典型征象，但其與腫瘤的惡性程度相關(guān)性尚存在爭議［10］。本研究結(jié)果顯示，ER和PR陽性者、Ki-67陰性者中病灶邊緣光整的比例明顯降低，毛刺征明顯增加（P＜0.05），說明毛刺征可能預(yù)示著腫瘤侵襲力更低，預(yù)后較好，可作為一個重要鑒別點。王巍巍［11］的研究也表明，MRI表現(xiàn)出毛刺的乳腺癌多見于組織學(xué)級別較低者，侵襲行為較低，可能是由于其病灶周圍纖維結(jié)締組織的反應(yīng)性增生在一定程度限制了癌細(xì)胞擴(kuò)散，但是否可視為一種保護(hù)性機(jī)制仍需進(jìn)一步驗證。此外，在病灶大小方面，本研究發(fā)現(xiàn)大腫塊病灶（直徑≥2 cm）患者ER多呈陰性表達(dá)，HER2、Ki-67檢測結(jié)果多為陽性，往往預(yù)示著不良預(yù)后，與諶力群等［12］的研究結(jié)果一致。Ki-67免疫染色可反映癌細(xì)胞的增殖情況，Ki-67標(biāo)記指數(shù)高提示癌細(xì)胞生長過快，一方面導(dǎo)致腫瘤膨脹性邊緣，另一方面極大增加了復(fù)發(fā)的風(fēng)險。有研究［13］顯示，環(huán)形強(qiáng)化的乳腺腫瘤呈高滲透性，可能與瘤內(nèi)細(xì)胞壞死有關(guān)，侵襲力高，預(yù)后較差，但本研究未發(fā)現(xiàn)內(nèi)部強(qiáng)化特征與分子預(yù)后標(biāo)志物的相關(guān)性，其原因有待進(jìn)一步研究。

DCE-MRI的圖像特征可反映腫瘤病灶的血供及微血管密度，但目前其與ER、PR、HER2、Ki-67等分子預(yù)后因子間的相關(guān)性尚未完全明確。羅云輝等［14］研究認(rèn)為，早期強(qiáng)化與ER陰性具有相關(guān)性，達(dá)峰時間與ER陰性、較高組織學(xué)分級相關(guān)。但亦有研究［15］結(jié)果顯示達(dá)峰時間與ER陽性相關(guān)。達(dá)峰時間是指從注入對比劑至首次出現(xiàn)強(qiáng)化峰值的時間，高度惡性的腫瘤具有快灌注性、高滲透性，達(dá)峰時間通常較短。本研究顯示，達(dá)峰時間與ER、PR陽性表達(dá)呈正相關(guān)（P＜0.05），達(dá)峰時間越短，ER、PR表達(dá)水平越低，乳腺癌的惡性程度越高，侵襲力強(qiáng)，預(yù)后差。

綜上所述，乳腺癌DCE-MRI圖像特征尤其是腫瘤大小、邊緣狀態(tài)，及血流動力學(xué)與PR、ER、HER2表達(dá)及Ki-67標(biāo)記指數(shù)具有良好相關(guān)性，可為乳腺癌患者術(shù)前預(yù)測、治療方案的制定及預(yù)后評估提供參考依據(jù)。