大鼠心肌缺血/再灌注損傷模型中光纖氧測量系統的應用和評估

宜 全，譚芳慧，張貴平

(廣州醫科大學藥學院藥理學教研室，廣東 廣州 511436)

心肌缺血/再灌注(ischemia-reperfusion，I/R)損傷模型常用開胸結扎冠狀動脈左前降支(left anterior descending artery，LAD)的方法建立[1-3]，而結扎是成模的關鍵，其確定方法以往文獻報道均通過肉眼觀察和心電圖分析，本實驗應用光纖氧測量系統，并在術后用B超和HE染色進行評估。

1 材料與方法

1.1 實驗動物SPF級SD ♂大鼠(250±25) g，購自廣州中醫藥大學實驗動物中心[SCXK(粵)2013-0034]，獲得廣州醫科大學動物倫理委員會的批準(2013-72)。

1.2 儀器光纖氧測量系統OXY-MICRO-AOT(美國World Precision Instruments公司)，小動物實時超聲成像系統(加拿大Visual Sonic公司，Vevo2100高分辨，RMV 250探頭)，15L8高頻探頭超聲儀Acuson Sequoia 512(Siemens 公司)，動物呼吸機HX-100E(成都泰盟科技有限公司)。

1.3 心肌I/R模型建立大鼠麻醉開胸，將小硅膠管墊于冠狀動脈行LAD結扎，1 h后取出硅膠管松解結扎線，分別在結扎前、結扎后和松解后插入光纖氧測量系統的探針于左心室前壁內，測量結扎部位下方心肌氧分壓。

1.4 超聲測量心功能大鼠麻醉仰臥固定于恒溫超聲操作面板上，于乳頭肌水平記錄左心室運動曲線，采圖，測量軟件自動生成心功能各項指標。取10個連續完整心動周期測量值的平均值為測定值。

1.5 心肌組織病理學檢查大鼠開胸取心臟，甲醛固定，酒精梯度脫水、石蠟包埋、切片、脫臘、HE染色，光學顯微鏡下觀察，拍照。

2 結果

2.1 大鼠LAD結扎后，左心室前壁心肌氧分壓下降LAD結扎前氧分壓為60～70mmHg，結扎后氧分壓立刻下降≥50%，松開結扎線后，氧分壓迅速回復至正常水平，說明LAD結扎成功。

2.2 大鼠急性心肌I/R后左心室收縮功能降低在缺血1 h，再灌注3 h和24 h，用B超檢測心功能，結果顯示，與Sham組比較，I/R(3 h)和I/R(24 h)模型組左室收縮末期內徑(LVIDs)增大(P<0.05)，I/R(24 h)模型組左室射血分數(LVEF)和左室短軸縮短率(LVFS)均降低(P<0.05)，說明左心室收縮功能降低，見Tab 1。

2.3 大鼠急性心肌I/R后心肌病理改變在缺血1 h，再灌3 h和24 h，取左心室前壁結扎線下進行HE染色。結果顯示，Sham組著色均勻，心肌細胞排列整齊、結構完整，肌纖維橫紋清晰；I/R模型組局部著色不均勻，染色變淺及發白，I/R(3 h)心肌細胞間隙水腫及心肌細胞周圍炎性細胞浸潤最為明顯；I/R(24 h)肌纖維排列紊亂，局部呈波紋狀改變或部分斷裂，紅細胞滲出增多。

Tab 1 Echocardiography indicators of rats in each group group n = 6，I/R model groups n=8)

3 討論

本研究首次報道，采用光纖氧測量系統監測心肌I/R損傷時心肌氧分壓的變化，判斷LAD結扎成功與否，與用肉眼觀察和心電圖方法比較，在操作上更簡單、直觀和準確，明顯提高了成模率。