血栓彈力圖用于新鮮血小板和冰凍血小板的功能分析

劉一萱

（河南省駐馬店市中心血站 檢驗科，河南 駐馬店 463000）

近年來臨床上成分輸血的應用率越來越高，血小板輸注則作為成分輸血的重點，被廣泛的應用于血小板減少性或血小板功能障礙性疾病的治療中［1］。為了指導臨床合理輸注血小板，通過隨機數字表的方法將2016 年1 月至2017 年8 月中心血站采集供給的經過5%二甲基亞砜（dimethyl sulfoxide，DMSO）制備并儲存于-80°C 的冰凍血小板以及5 d 內的新鮮血小板中分別選取60 例作為研究對象同時通過血栓彈力圖（thromboelastogram，TEG）評估新鮮血小板和冰凍血小板的功能，取得一定的研究結果，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

根據隨機原則要求將2016 年1 月至2017 年8 月中心血站采集供給的經過5%DMSO 制備并儲存于-80°C 的冰凍血小板以及5 d 內的新鮮血小板中分別選取60 例作為研究對象，在臨床輸注前將120 袋血小板進行分組，其中新鮮血小板標本設為A 組，按照2∶1 比例混合的新鮮與冰凍血小板標本設為B 組，按照1∶1 比例混合的新鮮與冰凍血小板標本設為C 組，冰凍血小板標本設為D 組。本次研究方案經院倫理委員會審批，且患者及家屬知情同意。

1.2 儀器與方法

新鮮血小板采集時選用Fenwal Amicus 血細胞分離機和配套的試劑盒以及耗材，整個操作過程嚴格按照說明書的要求進行，全血和抗凝劑按照11∶1 的比例混合，處理總血量控制在4 000 ml 左右，單采時間不得超過120 min，通過Trima Accel血細胞分離機采集到的血小板要在72 h 內震蕩儀保存，溫度控制在22°左右，根據重量計算5%DMSO 所需量，應用20 mL 的空針抽取所需量的5%二甲基亞砜并固定在注射泵上，將血小板袋置于振蕩器上并和血小板延長管相連，將微量注射泵的注射速度調整為60 mL/h，然后按照說明書要求操作微量注射泵并加藥，完成后立即保存于-80°C。臨床在應用冰凍血小板前必須放于40℃的融漿機中水浴解凍，然后取樣配成A、B、C、D 4 組各5 mL 進行血栓彈力圖（TEG）各參數檢測。應用北京樂普公司提供的TEG-5000 進行血栓彈力圖參數測定，具體操作為：取血小板標本1 mL 將其充分混勻后保存于高嶺土促凝管中，將瓶蓋擰緊，反復顛倒多次讓其混勻，然后將混勻后的樣品 340 μL+0.2 mmol/L 的 CaCl220 μL 注入杯中并將杯架升起，打開開關開始檢測。將按照1∶1稀釋后的血小板標本應用全自動血液分析儀進行血小板常規參數測定，整個操作過程嚴格按照說明書要求進行［2-3］。

1.3 統計學方法

研究資料采用SPSS 19.0 統計學軟件包進行處理，計數資料和計量資料分別采用百分率（%）和均數±標準差（）表示，通過χ2和t檢驗或方差分析，P＜0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 4組血小板標本TEG參數檢測結果對比分析

研究數據顯示，A 組和C 組標本反應時間（reaction，R）值較B、D 兩組明顯縮短，比較差異具有統計學意義（P＜0.05）；B、C 兩組標本組間比較凝血時間（K 值）、ɑ 角（Ang）和最大振幅（maximum amplitude，MA）差異無統計學意義（P＞0.05），但和A、D 兩組比較明顯增加，差異具有統計學意義（P＜0.05），見表1。

2.2 4組血小板標本常規參數檢測結果對比分析

血小板計數（platelet，Plt）、平均血小板體積（mean platelet volume，MPV）、血小板分布寬度（platelet distribution width，PDW） 3 方面比較，A、D 兩組比較差異具有統計學意義（P＜0.05）；B、C兩組在血小板計數（Plt）、血小板分布寬度（PDW）兩方面比較差異具有統計學意義（P＜0.05），見表2。

表1 4 組血小板標本TEG 參數檢測結果對比 （）

表1 4 組血小板標本TEG 參數檢測結果對比 （）

組別A組B組C組D組F值P值例數30 30 30 30 R/min 4.6±0.3 6.3±0.3 4.7±0.5 7.8±0.6 11.352 0.000 K/min 1.1±0.2 1.8±0.4 1.8±0.5 1.0±0.5 12.358 0.000 Ang/(°)76.2±2.4 82.3±3.3 81.2±2.5 70.9±2.1 13.241 0.000 MA/mm 67.6±2.6 76.3±2.7 75.7±1.9 68.0±1.7 8.278 0.001

表2 4 組血小板標本常規參數檢測結果對比分析 （）

表2 4 組血小板標本常規參數檢測結果對比分析 （）

組別A組B組C組D組F值P值例數30 30 30 30 Plt/(×1011/L)930.88±1.03 830.74±0.63 8.25±0.55 7.18±0.76 8.365 0.001 MPV/fg 10.25±0.67 11.28±0.83 11.35±0.92 12.17±1.45 9.438 0.000 PDW/%8.87±0.76 10.77±1.02 14.23±1.29 17.25±1.75 10.736 0.000

3 討論

在正常人的血液運行期間，血小板通常是保持靜息狀態，只有血小板膜受到刺激后其才能被激活，獨自或者同時發生變形、黏附、聚集和釋放等反應，而這些反應通常被臨床用來評估血小板功能或者質量［4］。目前我國存在用血量大幅度上升的趨勢，而新鮮血小板由于受來源不足、儲存時間短等問題的影響，經常在急需輸注時發生數量不足情況，因此許多醫院通過冰凍血小板來解決這一問題［5］。評估血小板功能和質量的參考指標很多，但是現階段尚沒有形成統一的標準，因此評估方法和評估結果存在一定的差異，同時受人為因素的影響，導致無法依靠單一指標來評估凝血全過程的實際情況［6］。

TEG 技術是把凝血信號轉變為電信號后由電腦進行處理并制成的TEG 曲線，主要對凝血和纖溶整個過程進行動態監測，同時還可以用來綜合檢測和評估凝血因子、血小板功能［7-8］。TEG 參數很多，以R 值、K 值、MA 值臨床應用最多，被廣泛的應用于凝血功能變化的檢測。R 值主要用來體現凝血因子的功能，K 值和ɑ 角則用來反映凝塊的形成速率；MA 值則用來體現血凝塊的最大輕度和形成的血凝塊的穩定性［9-10］。此次研究中，A組和C 組標本反應時間（R 值）較B、D 兩組明顯縮短，比較差異具有統計學意義（P＜0.05）；B、C兩組標本組間比較凝血時間（K 值）、ɑ 角（Ang）和最大振幅（MA）差異無統計學意義（P＞0.05），但和A、D 兩組比較明顯增加，比較差異具有統計學意義（P＜0.05）。血小板計數（Plt）、平均血小板體積（MPV）、血小板分布寬度（PDW）3 方面比較，A、D 兩組比較差異具有統計學意義（P＜0.05）；B、C 兩組在血小板計數（Plt）、血小板分布寬度（PDW）兩方面比較差異具有統計學意義（P＜0.05）。這說明血小板在制備期間會損害部分的血小板膜，增加血小板激活比率，造成大量的促凝血物質釋放至血液中，和新鮮的血小板進行混合，有利于提高血小板在早期的凝血速度［11-12］。ɑ 角主要用來表現形成血栓的速度，而混合后血小板的ɑ 角明顯增大，和K 時間基本保持一致，這提示混合后的血小板其促凝功能得到加強［13-14］。在4 組中以新鮮血小板的MA 值最高，這提示新采集的血小板具有較前的收縮功能，其形成的血栓穩定性更強［15］。

總之，兩種血小板混合應用，可以互相彌補不足，是臨床比較理想的輸血模式，值得推廣。