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民族藥材火炭母的研究進展△

2020-01-10 18:08:16韋安達朱華謝鳳鳳李鵬
中國現代中藥 2020年9期
關鍵詞:研究

韋安達,朱華*,謝鳳鳳,李鵬

1.廣西中醫藥大學 科學實驗中心,廣西 南寧 530000;2.商洛市藥品檢驗所 中藥室,陜西 商洛 726000

火炭母是蓼科(Polygonaceae)蓼屬(Polygonum)植物火炭母PolygonumchinenseL.的干燥全草,其味辛、苦,性涼,歸肝、脾經,具有清熱除濕、涼血解毒、利肝明目、舒經活血的功效,主治泄瀉、痢疾、肺熱咳嗽、咽喉腫痛、肝炎、濕疹、中耳炎等,主要分布于福建、廣西、廣東等地[1]。火炭母易生長于潮濕、陰暗的環境,山谷、水邊多見[2]。

火炭母作為民間常用藥,特別是嶺南地區普遍使用,療效得到好評,在養生保健和臨床治療方面具有開發價值[2]。筆者通過查閱整理國內外火炭母研究的文獻,發現在生藥學、化學成分方面研究較多,藥理作用以及臨床療效方面研究較深入,但產品開發方面罕見報道。本文對其歷年研究進行綜述,為挖掘火炭母潛在價值和經濟效益,深入研究和產品開發提供參考。

火炭母又名赤地利,始載于《雷公炮炙論》,其在歷代的本草著作都有記載,如《新修本草》《本草綱目》《本草圖經》《植物名實圖考》等[3]。火炭母在我國民間作為藥用歷史悠久,也曾收載于1977年版《中華人民共和國藥典》,2004年《廣東省藥材地方標準》也有收載[4]。火炭母于2014年在《廣西壯族自治區瑤藥材質量標準·第一卷》中收錄[5],在2008年版《廣西壯族自治區壯藥質量標準·第一卷》中也制定了火炭母的質量標準[6]。由此可見,火炭母在我國醫藥領域發揮了重要的作用,特別是在壯族及瑤族地區貢獻巨大。將其納入地方用藥標準,對進一步開發民族藥材火炭母具有重要意義。

1 鑒定

自然界植物種類繁多,廖科植物外觀、形狀上較相似,火炭母的偽品多,易產生混淆[7],其真偽鑒定是關鍵。目前火炭母的鑒定研究主要包括性狀、理化、薄層、顯微、光譜以及DNA條形碼鑒定等,不同鑒定方法各有特點和優勢,單用或者聯合應用均能有效鑒別。鑒定方法的不斷完善,確保了火炭母藥材來源的準確性,為其進一步研究和開發奠定基礎。

1.1 性狀鑒定

性狀鑒定方法主要考察中藥的外觀形態、顏色、質地、斷面、氣味還有水試、火燒情況等。該方法直觀、簡捷、快速、有效,是中藥鑒定常用的方法[8-9]。

火炭母莖扁,類似圓柱形,分支明顯,外表棕褐色或淡綠色,節稍膨大,下部節上多須根。植株質脆,容易折斷,斷面灰黃[1]。葉片多皺縮或破碎,展平后的葉片呈長卵形或卵形,頂端悄尖,基部稍圓,全緣,上表面深綠色,下表面色較淺,兩面近無毛;托葉鞘筒狀,膜質,先端有裂紋。花序頭狀,多數是白色或淡紅色,苞內有花,花被分裂,雄蕊多數8枚,基部腺體呈黃綠色[10-11]。

對莖、葉片、花序等外觀性狀作了全面的描述,取樣來自不同的地區、不同的季節,具有代表性、可靠性,為火炭母的鑒定提供了比較直觀、簡單的途徑,同時保持了準確性。

1.2 顯微鑒定

顯微鑒定技術在植物結構研究中具有重要作用,觀察到的細胞可作為鑒定的依據,具有準確性高的特點,已經成為中藥鑒定的常用方法,作為鑒定植物的方法得到廣泛認可[12-13]。火炭母的顯微鑒定技術成熟,研究內容全面,相關的研究報道較多,研究內容包括根、莖、葉、表皮等。

1.2.1根的鑒定 張可峰等[10]顯微觀察廣西南寧火炭母藥材的根,對木栓細胞、韌皮、形成層、木質部、細胞壁等進行描述:根呈類圓形;木栓細胞呈紅棕色,韌皮成環以及細胞壁木化明顯,多年生的年輪明顯可見;薄壁細胞和木纖維細胞中散布豐富的淀粉粒。火炭母根的顯微特征明顯,可作為鑒定火炭母的依據,但顯微觀察到的細胞形態存在相似之處,確保鑒定的精確度需與其他鑒定手段相結合。

1.2.2葉的鑒定 火炭母葉片的顯微特征明顯[14]。上表皮細胞中具有類分泌細胞,細胞內含無色分泌物,可見腺毛;海綿組織松散排列;薄壁細胞內含草酸鈣簇晶;腺鱗結構獨特,頭部13~17個細胞,2個細胞并生于柄部;氣孔不規則排列。火炭母葉上下表皮細胞、海綿組織結合薄壁細胞、氣孔等特征可作為葉片鑒別點,為了使鑒定特征更具代表性,還需在取樣環節更完善,采樣地點更廣更多,采樣也需在不同的季節進行[10-11]。

1.2.3莖的鑒定 不同季節的火炭母莖的顯微特征結構大致相同。表皮偶見紅棕色物。中柱鞘纖維多為1~4列,偶有5列,大多成環,少數斷續成環;細胞壁木化。外韌型維管束40個左右,環狀排列。髓部較大,顯而易見,間隙處含草酸鈣簇晶[10-11]。火炭母莖的顯微特征與根、葉相似,薄壁細胞含草酸鈣簇晶,且存在大量的淀粉粒以及少數棕色物[14]。火炭母莖的形狀特征受季節影響較小,顯微特征較穩定,差異性較小,可作為顯微鑒定火炭母的指標。

1.2.4粉末的鑒定 張可鋒等[10]顯微觀察南寧產的火炭母藥材粉末:呈褐綠色或棕褐色;分泌細胞大多呈橢圓形,細胞內部含無色分泌物及大量草酸鈣簇晶;纖維外側薄壁細胞可見晶鞘纖維。花粉粒散孔狀,淀粉粒形狀規則不一,方形或者是類圓形居多。薄壁細胞中具條狀物或棕色塊狀物。黃棕色膜質托葉鞘碎片散布,細胞扁平,橫向角質層紋理占多,含有草酸鈣簇晶。火炭母粉末顯微特征,可見豐富多樣的結構特征,相對于單個部位,火炭母藥材粉末的顯微鑒定更具代表性。

1.3 薄層鑒定

薄層色譜法(TLC)是常用的中藥鑒定方法,該方法快速、簡捷、高效、成本低,目前在藥物、食品、環境分析等方面得到廣泛應用,在定性鑒定以及作為測定物鑒定指標方面扮演著重要角色[15-16]。

林志云等[14]對采自廣東城區的火炭母進行薄層鑒定,火炭母藥材粉末用甲醇、鹽酸回流提取,經乙酸乙酯萃取,合并濾液,制成供試品。以槲皮素作為對照品,兩者點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上,以甲苯(水飽和)-甲酸-乙酸 (5∶4∶1)展開。在可見光下觀察發現,供試樣品在與槲皮素對照品相應的位置上顯相同的黃色斑點,薄層清晰。

程建國等[17]對產自廣西、廣東的火炭母進行薄層研究,方法借鑒廣東省中藥材標準(第一冊)的火炭母薄層鑒定方法。以火炭母槲皮素為參考物,斑點分離明顯、清晰、圓潤,整個板面沒有拖尾現象。在相應的對照藥材及對照品色譜位置上,顯示相同顏色的熒光斑點。火炭母藥材采自不同的地點、時間,在相同展開劑、溫度、濕度的條件下實驗結果差別較小,這是鑒定火炭母藥材的有效、可靠的方法,同時也是質量控制的可行手段。

1.4 理化鑒定

中藥理化鑒定法借助物理、化學手段來鑒別藥材主要化學成分以及測定其他成分的含量,是評價藥材質量的有效方法。隨著科學技術的快速發展,理化鑒定方法逐漸多樣化,比如顯色反應、熒光法、分光光度法等,已經成分中藥鑒定的重要內容[18-19]。

1.4.1顯色反應 取火炭母粗粉,經乙醇回流提取、濃縮,得到干膏,取少量于試管中,加鎂粉少量與鹽酸數滴,水浴中加熱30 min,顯橙色或橙紅色。取上述濾液過濾紙,晾干,置紫外光下觀察,顯黃色熒光,再噴以1%三氯化鋁的乙醇溶液,熒光加強[2]。理化鑒定的實驗現象可做初步判斷,但不能作為鑒定的決定性依據。

1.4.2光譜鑒定 張可鋒等[10]運用紫外-可見光譜法對火炭母進行鑒定,其石油醚提取液在668、408、268 nm 波長處出現特征峰;其三氯甲烷提取液在 667、609、537、503、414、327 nm 波長處出現特征峰;火炭母的乙酸乙酯提取液在665、607、533、504、408、310、271 nm 波長出現特征峰;正丁醇、無水乙醇提取液也相應出現特征峰。光譜鑒定火炭母,三氯甲烷和乙酸乙酯提取液特征峰信息豐富,可提供火炭母藥材的紫外-可見光譜鑒別。

1.5 DNA條形碼鑒定

DNA條形碼自提出以來備受關注,在物種進化、近種種源鑒定等方面發面發揮了不可取代的作用[20-21]。陳士林[22]提出DNA條形碼分子鑒定法在藥材鑒定方面具有操作簡單、準確性高、迅速的獨特優勢,是區別藥材真偽快速、高效、可行的方法。

候典云等[23]對產自廣東、廣西、安徽、河北、河南的火炭母進行DNA條形碼鑒別,以區別其混偽品,發現火炭母與混偽品兩者的K2P差值較大,能較好區分開來。比較兩者NJ鄰接法構建的系統聚類樹,明顯看出火炭母藥材單獨聚為一大支,與混偽品差異顯著。火炭母與混淆品的ITS2二級結構方面也存在較大差異。表明ITS2 條形碼序列是一種有效、可行鑒別火炭母的方法。

2 化學成分

研究火炭母的化學成分多以乙醇、乙酸乙酯、三氯甲烷、石油醚等提取物為主。目前對火炭母的化學成分研究較全面、深入,化學成分主要含黃酮類[24]、酚酸類[25-26]、甾體類[27]以及揮發油[28]等。

2.1 黃酮類

火炭母富含黃酮類成分[29-30],主要有槲皮苷、異槲皮苷[31]、柚皮素[26],還存在異鼠李素(isorhamnetin)、芹菜素(apigenin)、槲皮素[31-32](quercetin)、山柰酚(kaempferol)、廣寄生苷(avicularin)、木犀草素(luteolin)[33-34],含有巴達薇甘菊素(batatifolin)[35],山柰酚-7-O-葡萄糖苷(kaempferol-7-O-glucoside)、山柰酚-3-O-葡萄糖醛酸(kaempferol-3-O-glucuronide)[36-37]。

2.2 甾體類

目前從火炭母藥材中提取出甾體類成分有β-谷甾醇(β-sitosterol)[28];研究發現,從火炭母的根及莖中分離得到 3,6-二酮-4-烯豆甾烷(stigmastane-3,6-dione)、3,6-二酮豆甾烷(stigmast-4-ene-3,6-dione)、番麻皂素(hecogenin)和3,6-二酮-4-烯海柯吉寧(25R-spirost-4-ene-3,6-dione)4種甾體化合物[38]。

2.3 酚酸類

從火炭母中分離純化得到酚酸類成分有沒食子酸(gallic acid)、咖啡酸(caffeic acid)、3,3′-二甲基鞣花酸(3,3′-di-O-methylellagic acid)、原兒茶酸(protocatechuic acid)、丁香酸(syringic acid)、3-甲氧基-4-鼠李糖鞣花酸[26-27]、沒食子酸甲酯(gallicin),鞣質類有鞣花酸(ellagic acid)[39]。

2.4 揮發油類及其他類

楊先會等[28]用石油醚提取得到火炭母全草的揮發性成分,主要以飽和烴及其衍生物為主,含量較大的成分為正十六烷酸(相對質量分數高達 52.88%)、葉綠醇(質量分數為4.19%)等。林敬明等[40]采用氣相質譜聯用(GC-MS)對火炭母超臨界CO2萃取物進行分析,發現含量較高的有鄰苯二甲酸、鄰苯二甲酸二異丙基酯、6,10,14-三甲基-2-十五烷酮。有研究報道,從火炭母的根莖中分離純化得到1個酰胺類化合物(aurantiamide acetate)。此外還存在L-鼠李糖、D-半乳糖 (D-galactose)、棕 櫚 酸 (palmiticacid)、亞麻酸(linolenic acid) 等多種氨基酸[1]。目前研究發現,火炭母中Fe、Mg、Ca、K、Zn、Mn 6種微量元素含量較高,而 Cu、Pb、Cr、Cd、Ni 5種微量元素含量較少[41]。

3 藥理作用

火炭母主要含有黃酮類及黃酮苷類、酚酸類、甾體類等化學成分,這些是發揮藥理作用的物質基礎,目前對火炭母藥理學的研究表明,火炭母具有抗炎止痛、抗氧化、抗乙肝病毒、抗菌等藥理作用,同時具有對平滑肌和骨骼肌的松弛作用以及清除自由基、抗肝癌、抑制EB病毒殼抗原表達、抗細胞毒性、抗腹瀉等藥理作用[42-43]。

3.1 抗炎止痛作用

蔡家駒等[44]探究火炭母水提取物的抗炎止痛作用,結果表明,火炭母水提物可抑制醋酸所致的實驗小鼠毛細血管通透性增加,并可緩解小鼠耳廓腫脹,減輕由熱板法和醋酸所致的疼痛,其發揮作用的成分可能是黃酮類化合物。劉圓等[45]研究發現,木犀草素的抗炎、鎮痛效果均比乙酰水楊酸好。山柰酚、槲皮素也均有不同程度的抗炎止痛的藥理作用[46-47]。Tao等[48]從火炭母正丁醇提取物中提取黃酮類化合物,對脂多糖誘導的炎癥反應進行體內外抗炎作用的研究,研究發現,其提取物在體內的抗炎活性可促進抗氧化能力的增強,其抑制作用可能是通過抑制MAPKs信號通路中相關物質的磷酸化而實現。

3.2 抗氧化作用

王呈文等[49]探究火炭母95%乙醇提取物的抗氧化活性,實驗發現其乙醇提取物對1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)的清除能力以及對羥基自由基、總抗氧化能力、超氧陰離子的半數抑制能力均比VC強,火炭母的乙醇提取物具有較強的抗氧化能力。黃國霞等[50]采用H2O2/Fe2+體系法和鄰苯三酚體系法對火炭母甲醇-水混合提取物進行抗氧化研究,實驗發現,其提取液對羥自由基、超氧陰離子的清除能力較強。

3.3 抗菌作用

歐陽蒲月等[51]探究火炭母的不同部位、不同提取劑、不同提取方法的抑菌效果,結果發現火炭母的葉和莖都具有良好的抑菌效果,莖的抑菌能力較強。65%乙醇提取物、超聲提取物抑菌效果較佳。火炭母提取物對金黃色葡萄球菌、痢疾桿菌、枯草桿菌、藤黃球菌、白色念珠菌的最小抑菌濃度(MIC)均低于0.6 g·mL-1。有報道火炭母洗劑治療霉菌性陰道炎具有良好效果,臨床上值得推廣[52]。火炭母合劑能有效抑制皮膚念珠菌,用于該病菌引起的皮膚病具有良好效果[53]。

3.4 保肝作用

火炭母醇提取物具有良好的護肝作用。高雅等[54]發現,火炭母醇提物對四氯化碳致急性肝損大鼠產生保護作用,其提物各劑量組都能抑制急性肝損傷大鼠血清中谷丙轉氨酶(ALT)、谷草轉氨酶(AST)的活性,提升超氧化物歧化酶(SOD)的活性,降低丙二醛(MDA)的水平。黃思茂等[55]利用D-氨基半乳糖(D-GalN)制備急性肝損傷小鼠模型,火炭母總黃酮劑量組小鼠血清或肝組織中各項指標:ALT、AST、總膽紅素(TBIL)、MDA等水平都呈現不同程度的下降,谷胱甘肽過氧物酶(GSH-Px)、總超氧化物歧化酶(T-SOD)、白細胞介素-10(IL-10)和白細胞介素-4(IL-4)水平明顯升高,表明火炭母總黃酮能夠顯著緩解肝損傷病態。其作用機制可能是抗氧化及調節肝組織 Th1/Th2 細胞平衡有關。Xu等[56]探究火炭母提取的黃酮類化合物護肝作用,實驗發現黃酮類能使肝臟功能酶(ALT和AST)的血液水平降低,能降低實驗小鼠腫瘤壞死因子(TNF-α)、白細胞介素6等,能增加整合素β1、5核苷酸酶、抗原ki-67陽性細胞數量,其機制可能是通過抑制炎癥應激和凋亡、滅活肝內Hsp90生物活性、提高脾臟免疫功能實現的,表明從火炭母提取的黃酮類化合物對小鼠化學性肝損傷具有潛在的保護作用。

3.5 抗EB病毒及細胞毒性作用

火炭母是兩廣地區常用的清熱解毒藥,現代研究表明,火炭母具有抗EB病毒和細胞毒性作用。梅全喜等[57]探究廣東常用12種清熱解毒中藥抗EB病毒及細胞毒性的作用,其中就含有火炭母。研究發現,12種廣東地產清熱解毒藥能顯著抑制皰疹病毒(EBV)殼抗原表達,并且對B95-8細胞具有細胞毒作用,同時觀察到了劑量依賴性。黃橋華等[58]發現,火炭母乙酸乙酯供試液能顯著抑制HCT-116 的細胞增殖和誘導HCT-116 細胞凋亡,均呈劑量和時間依賴關系。火炭母乙酸乙酯提取液能抑制HCT-116細胞增殖并誘導細胞凋亡。

3.6 其他藥理作用

火炭母化學成分復雜多樣,富含生物活性較強的黃酮類及酚酸類等成分,因此其藥理作用廣泛。比如對平滑肌和骨骼肌的松弛[59-60]、對心血管的保護[61-62]、抗瘧疾、肝癌[63-64]、抗輻射[65-66]、保護腎臟作[67-68]、降壓[69]、對胃出血的保護作用[70]等。

4 臨床應用

火炭母藥材作為藥用歷史悠久,可單獨使用也可作為復方劑使用,作為復方劑使用居多,比如火炭母保和湯可治療急性闌尾炎[71],以火炭母為君藥的腸激胺膠囊具可治療腸激綜合征[72]等,火炭母復方劑主要以院內制劑為主。臨床上火炭母復方治療小兒急性細菌性痢疾[73],火炭母合劑治療皮膚念珠菌病,火炭母洗劑治療霉菌性陰道炎,火炭母治療角膜豁[74]、結膜炎[75]、乳腺增生[76-77]、腹瀉[78]、風濕皮疹[79]、黃疸[80]、肝炎[81]等。綜合火炭母的臨床使用情況,其主要是用于胃腸道疾病、婦科炎癥以及黃疸性肝炎等方面,并且在治療肝炎以及胃腸道疾病方面效果顯著[82]。

5 展望

縱觀國內外對火炭母的研究,其生藥學方面研究較廣泛全面,從分子層面到外觀形狀的鑒定都細致深入,對其化學成分和藥理作用的研究也相對成熟。火炭母主要含有黃酮類、酚酸類、甾體類以及揮發性成分,其中黃酮類是發揮藥理作用的主要成分,比如其具有抗炎、抗病毒、抗肝炎等藥理作用,而且抗肝炎效果顯著,為治療乙肝病毒提供新的可能。然而關于其有效部位方面的研究還需要進一步加強,且體外實驗方法(細胞實驗)及體內實驗(動物模型)要相互結合,更具說服力。

火炭母易于種植,作為藥用歷史悠久,其臨床應用較廣泛,使用方法有單用也有復合使用,劑型也多樣化,但多數是中藥傳統制劑,在臨床上使用存在局限性,且火炭母對各具體疾病的作用機制還尚未闡明,因此,火炭母在臨床療效及開發新劑型方面仍需更多的研究,這將是今后研究的主要任務。而且廣西、廣東兩地都制定了其質量標準,這為進一步開發火炭母提供了安全可靠的依據。

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