微柱凝膠改良技術應用于血型正反定型

李大喜

（懷來縣醫(yī)院，河北 張家口 075400）

0 引言

微柱凝膠技術近幾年在張家口市幾家三甲醫(yī)院應用于血型正反定型，主要是為臨床診療和安全輸血提供可靠保障。無論是手工操作，還是全自動血型分析儀都參照試劑廠家或儀器廠家提供的操作說明作為該法的操作規(guī)范，但是在具體的工作過程中多家醫(yī)院發(fā)現(xiàn)應用試劑廠家或儀器廠家進行操作后，出現(xiàn)諸多檢驗結果難以判定的現(xiàn)象，查閱《全國臨床檢驗操作規(guī)程》《醫(yī)療機構臨床用血管理辦法（試行）》《臨床輸血技術規(guī)范》以及《輸血技術》等多種資料，均未對微柱凝膠技術操作步驟進行詳細闡述，通過與各大醫(yī)院（張家口市第一醫(yī)院、張家口市二五一醫(yī)院、河北北方學院第一附屬醫(yī)院、張家口市中心血站）輸血科學習溝通，究其原因為試劑廠家或儀器廠家提供的試驗操作步驟不詳細、不規(guī)范[1]。鑒于此，我院檢驗科血庫在學習上級醫(yī)院改良經驗的基礎上對微柱凝膠技術進行改良，通過校驗對比后發(fā)現(xiàn)“微柱凝膠改良技術”檢驗結果準確可靠，減少了假陰性及誤診的發(fā)生率。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取我院自2018年6月至2019年6月于我院進行血型檢測的3576例患者，其中男性1965例，女性1611例，年齡18～65歲，平均（45.36±7.66）歲。

納入標準：于我院進行血型檢測的患者；年齡18～65歲患者。

排除標準：患有嚴重血液疾病患者；患有嚴重傳染性疾病患者。

本次研究經過我院倫理委員會慎重研究，最終對本次研究表示同意。同時所有患者及家屬對本次研究過程、研究方法以及研究意義進行充分了解，并在經過深思熟慮后自愿簽署知情同意書參與本次研究。

1.2 儀器與試劑

①ABO、Rh（D）血型定型檢測卡（國械注準20163402230，中山市生科試劑儀器有限公司）；②ABO血型反定試劑盒（4%人血紅細胞，國械注準20163402334，長春博迅生物有限責任公司）；③抗人球蛋白檢測卡（國械注準20153400080，中山市生科試劑儀器有限公司）；④血型分析用稀釋液（低離子介質，粵中械備20140012號，中山市生科試劑儀器有限公司）；⑤不規(guī)則抗體檢測試劑盒（人紅細胞，國械注準20153400424，長春博迅生物有限責任公司）；⑥全自動血型分析儀（型號：煙臺艾德康AISEN170）；⑦卡式離心機。

1.3 方法

抽取患者清晨空腹靜脈血液6 mL，將其分別存放于兩組試管中。首先對患者行微柱凝膠法對患者血型進行檢驗。微柱凝膠技術在血型正反定型先前的主要操作流程：①儀器采用全自動血型分析儀（型號：煙臺艾德康AISEN170），ABO、Rh（D）血型定型檢測卡（國械注準20163402230）和血型分析用稀釋液（低離子介質，粵中械備20140012號）由中山市生科試劑儀器有限公司提供，ABO血型反定試劑盒（4%人血紅細胞，國械注準20163402334）由長春博迅生物有限責任公司提供；②正側鑒定先滴加血漿（抗體），后滴加4%紅細胞懸液（抗原）；③反側鑒定先滴加4%紅細胞懸液（抗原），后滴加血漿（抗體），由于重力原因，紅細胞懸液會有自然沉降現(xiàn)象，反側鑒定就會出現(xiàn)抗原抗體反應不充分，從而出現(xiàn)假陰性、雙群以及拖尾等現(xiàn)象，造成檢驗結果難以判讀。

完成對患者血型檢驗后，對另一組血液樣本行微柱凝膠改良技術對患者血型進行檢驗。“微柱凝膠改良技術”是在原有準備條件基礎上，將主要操作流程更完善，操作步驟具體化。“微柱凝膠改良技術”在血型正反定型主要操作流程：①儀器采用全自動血型分析儀（型號：煙臺艾德康AISEN170），ABO、Rh（D）血型定型檢測卡（國械注準20163402230）和血型分析用稀釋液（低離子介質，粵中械備20140012號）由中山市生科試劑儀器有限公司提供，ABO血型反定試劑盒（4%人血紅細胞，國械注準20163402334）由長春博迅生物有限責任公司提供；②正側鑒定先滴加血漿（抗體），后滴加4%紅細胞懸液（抗原）；③反側鑒定先滴加血漿（抗體），后滴加4%紅細胞懸液（抗原），這是改良試驗的關鍵一步，也是最重要的一個環(huán)節(jié)，使得抗原抗體充分反應，避免因紅細胞懸液自然沉降出現(xiàn)假陰性、雙群以及拖尾等現(xiàn)象；④加樣完成后，進行離心，最后判讀結果[2]。

1.4 觀察指標

對比兩種檢測法對患者血型正反定型檢測準確率。對比兩種檢測法對患者各項指標不符合檢出率。

1.5 統(tǒng)計學方法

采用SPSS 19.0進行統(tǒng)計學分析，計量資料用均數(shù)±標準差（）表示，計數(shù)資料用率（%）表示，采用t和χ2檢驗，以P＜0.05為差異具有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 兩種檢測法對比血型檢測準確率

血型檢測準確率對比，微柱凝膠改良技術對血型檢測準確率顯著優(yōu)于微柱凝膠法（P＜0.05），見表1。

表1 兩種檢測法對比血型檢測準確率（n,%）

2.2 兩種檢測法比較各項指標不符合檢出率

各項指標不符合檢出率對比，微柱凝膠改良技術對各項指標不符合檢出率顯著優(yōu)于微柱凝膠法（P＜0.05），見表2。

表2 兩種檢測法比較各項指標不符合檢出率[n(%)]

3 討論

所謂的血型正反定型不符是指在進行血型定型時的正定型與反定型結果無法進行相互驗證，從而無法對血型進行正確判定。根據(jù)研究表明，紅細胞抗原弱化是血型正反定型不一致的常見因素，而抗原弱化則可能使由于遺傳因素所導致[3-4]。

傳統(tǒng)微柱凝膠法對血型進行正反定型檢測時，會因重力原因，紅細胞懸液會有自然沉降現(xiàn)象，反側鑒定就會出現(xiàn)抗原抗體反應不充分，從而出現(xiàn)假陰性、雙群以及拖尾等現(xiàn)象，造成檢驗結果難以判讀[5-6]。而微柱凝膠改良技術通過滴加血漿（抗體），后滴加4%紅細胞懸液（抗原），使得抗原抗體充分反應，避免因紅細胞懸液自然沉降出現(xiàn)假陰性、雙群以及拖尾等現(xiàn)象[7-8]。

本次研究中通過采用兩種檢測方式對血型正反定型進行比較，取得以下結果：血型檢測準確率對比，微柱凝膠改良技術對血型檢測準確率顯著優(yōu)于微柱凝膠法（P＜0.05）；各項指標不符合檢出率對比，微柱凝膠改良技術對各項指標不符合檢出率顯著優(yōu)于微柱凝膠法（P＜0.05）。因此，我們認為，采用微柱凝膠改良技術能夠更好地對血液正反定型進行檢測，提高對血型檢測的準確率[9-10]。

綜上所述，微柱凝膠改良技術單純通過對凝膠血型卡的理性方式進行改變，從而提高了對檢測的敏感度，提高對血型檢測的準確率，值得廣泛推廣使用。