子宮內膜癌組織中DNA錯配修復基因表達及意義

徐秀梅 米賢軍 代新珍 陳志強

廣東省中山市博愛醫院病理科 524800

子宮內膜癌是婦科中較為常見的一種惡性腫瘤，近年來在我國的發生率不斷上升[1-2]。Lynch綜合征是一種由于堿基錯配修復基因缺失導致的一種遺傳病，患者很有可能出現結腸癌和子宮內膜癌[3]。錯配修復基因(MMR)的表達缺失會使DNA和遺傳信息的正常運行及傳遞受到影響，從而引起腫瘤的出現和發展[4]。為探究在子宮內膜癌組織中MMR的表達情況及其意義，本文進行研究如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2017年1月—2018年12月本院收治的子宮內膜癌患者50例作為內膜癌組，以同期20例內膜癌非典型增生患者作為增生組和子宮內膜正?；颊?0例作為正常組。內膜癌組包括疑似Lynch 內膜癌患者8例；病理分級：高分化14例，中、低分化36例；≤45歲、45～60歲、≥60歲患者分別為21例、13例、16例。上述患者均知曉本研究，且自愿參與本研究并簽署知情同意書，同時本研究獲得倫理委員會批準。對各組患者的基本資料相應的進行統計學分析發現差異無統計學意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2 方法 首先對標本使用10%的甲醛進行固定，常規進行石蠟包埋工作后將標本做切片處理，厚度為3μm。通過免疫組化SP法對MMR蛋白中常見的突變基因，包括hMLH1、hMSH2、hPMS2以及hMSH6等基因進行檢測，按照1∶100的比例對抗體進行稀釋，進行DBA染色，以正常的間質細胞、子宮內膜和淋巴細胞切片組織為陽性對照，以PBS作為陰性對照。試驗中所用試劑盒均為北京中山金橋生物技術有限公司生產，多克隆抗體為廣東深達生物技術有限公司生產。

1.3 觀察指標 細胞質或細胞核或兩者均呈現棕黃色則為陽性細胞，在患者腫瘤范圍內在高倍鏡觀察下選擇10個視野，如果陽性細胞所占比例>10%則為陽性，如果≤10%則為陰性[5]。hMLH1、hMSH2、hPMS2以及hMSH6四種基因中只要其中一種表現為陰性則說明患者MMR蛋白表達缺失[6]。比較MMR蛋白在各組中的不同表達情況。

2 結果

2.1 各組MMR蛋白表達情況的比較 三組MMR蛋白表達缺失率分別為36.00%、30.00%和0%，內膜癌組和增生組表達缺失率顯著高于正常組(χ2=13.94、10.23，P=0.000 2、0.001 4)，具體見表1。

表1 各組MMR蛋白表達情況的比較[n(%)]

注：*與正常組相比，P<0.05。

2.2 不同內膜癌患者MMR蛋白表達情況的對比 疑似Lynch 內膜癌與其他內膜癌患者相比、≤45歲與≥60歲的患者相比，其MMR蛋白表達的缺失率顯著較高(χ2=10.96、4.37，P=0.000 9、0.036 6)，內膜癌患者的病理分級則與MMR蛋白的表達無明顯相關性(χ2=0.00，P=0.979 1)，具體見表2。

表2 不同內膜癌患者MMR蛋白表達情況的對比[n(%)]

注：*表示疑似Lynch 內膜癌與其他患者相比、≤45歲與≥60歲患者相比，P<0.05。

2.3 內膜癌組hMLH1、hMSH2、hPMS2以及hMSH6的表達缺失率比較 本組 50例內膜癌患者的hMLH1、hMSH2、hPMS2以及hMSH6的表達缺失率分別為24.00%(12/50)、10.00%(5/50)、20.00%(10/50)和8.00%(4/50)。

3 討論

MMR系統可以為人體細胞進行DNA堿基錯配的修復提供安全保障，MMR蛋白是MMR基因表達產生的，包含hMLH1、hMSH2、hPMS2以及hMSH6等[7-9]。如果機體MMR基因出現缺陷或突變都會導致細胞增殖過程中的錯誤摻入和缺失無法進行修復，使機體一系列靶基因出現改變，最終引起腫瘤的產生和進一步發展[10-11]。Lynch綜合征以發病年齡早、常有子宮內膜癌、腸癌等腸外腫瘤伴隨發生[12]，疑似Lynch 內膜癌與其他內膜癌患者相比MMR蛋白表達缺失率更高。有研究顯示，50歲以下子宮內膜癌患者MMR蛋白表達缺失率明顯高于其他年齡段，其中又以hMLH1的缺失率最高[13]。另有研究表明，在51例低齡(≤45歲)子宮內膜癌患者中，有45.1%的患者存在hMLH1、hMSH2、hPMS2或hMSH6的表達缺失情況[14]。以上研究均說明低齡子宮內膜癌患者中MMR基因失活的情況較為顯著。本研究中，≤45歲與≥60歲的患者相比，其MMR蛋白表達的缺失率顯著較高，且內膜癌組患者又以hMLH1的表達缺失為主，這也與相關研究的結果相符。提示MMR基因的表達缺失和腫瘤的發生發展存在一定相關性，臨床上應對年齡較低的子宮內膜癌患者進行更加密切的觀察[15]。

綜上所述，MMR蛋白表達的缺失會導致子宮內膜非典型增生以及內膜癌，特別是低齡內膜癌的出現和進一步發展。