馬齒莧對東鄉黑雞產蛋性能及大腸桿菌和乳酸桿菌的影響

馮軒彪， 黃建華 ， 付海玲， 葉逢春， 張水印

（1.江西科技師范大學，江西南昌330013；2.江西省進賢縣畜牧局，江西進賢331700；3.江西省宜豐縣橋西獸醫站，江西宜豐336300）

隨著生物制藥及中草藥的不斷發展， 尋求高效、環保、低毒副作用的藥物已成為畜牧養殖業的熱點問題。 馬齒莧（Portulaca oleraceaL．），又名馬莧菜、五行草等，系馬齒莧科馬齒莧屬一年生草本植物。 馬齒莧含有許多生物活性物質，如黃酮、α-亞麻酸、維生素等，具有抗病毒、抗細菌、抗氧化、抗腫瘤、降血糖、提高機體免疫力、開發腦智力等作用（李鳳林等，2012；夏渝林，2007；余慶皋等，2007；王曉波等，2005）。邱妍等（2012）用中草藥灌服小鼠研究中草藥對大腸桿菌的抑制作用， 結果表明，黃芩、金銀花、馬齒莧、穿心蓮的抑菌作用明顯。周正等（2014）研究表明，馬齒莧多糖可以提高雙歧桿菌和乳酸桿菌數量， 降低外周血內毒素含量，調節腸道微生態平衡，對潰瘍性結腸炎具有一定的治療作用。本試驗旨在探討馬齒莧對蛋雞產蛋期產蛋性能及腸道大腸桿菌和乳酸桿菌的影響，以改善蛋雞腸道菌群環境， 提高蛋雞產蛋期的抗病力，達到部分代替抗生素的作用。

1 材料與方法

1.1 試驗材料 本試驗所用馬齒莧在江西省撫州地區野生采集，用自來水洗凈，自然晾干并磨成粉狀備用。

1.2 試驗動物及日糧 采用單因子試驗設計，選擇48 只產蛋高峰期體況良好的東鄉黑雞， 以體重、產蛋數量基本相同原則分為4 個處理組。分別飼喂添加0%、1%、2%和3%的馬齒莧日糧。 試驗日糧參照蛋雞NRC（1994）和我國地方蛋雞飼養標準（ZBB43005—86），并結合江西地方雞品種具體情況進行配制， 試驗日糧的主要營養指標力求達到一致，所有試驗日糧為粉狀飼料，其配方及營養水平見表1。

1.3 飼養管理 試驗在一個東鄉黑雞種雞場進行，實行單只籠養，產蛋高峰期開始試驗，試驗期間每天上午、 下午各測溫度一次， 雞欄舍溫度為19 ～28 ℃，自然光照和通風，自由采食，每天上午、下午各打掃一次保持欄舍清潔衛生。試驗期為5 月10 日～6 月15 日，共計35 d。

1.4 指標測定與方法

1.4.1 產蛋性能 每天觀察雞群健康狀況和采食、飲水情況，記錄每只雞每天采食量。 從5 月20日開始收集雞蛋直至6 月15 日結束，每天收集雞蛋進行稱重和計數。 計算采食量、產蛋數、蛋重和料蛋比。

表1 產蛋雞日糧組成及營養水平

1.4.2 大腸桿菌和乳酸桿菌的檢測 在試驗第20、35 天8：00 收集雞的糞便立即送到實驗室進行大腸桿菌和乳酸桿菌數量檢測。 （1）樣品稀釋：樣品充分混勻， 精確稱取1 mL 樣品置99 mL 稀釋液（含0.1%瓊脂生理鹽水）中，充分混勻即為原液 （稀釋度為10-2）， 再以10 倍梯度稀釋至第5管，稀釋度分別為10-3、10-4、10-5、10-6。 （2）培養基準備：采用EMB 選擇培養基檢測大腸桿菌（出現黑色有光澤菌落為大腸桿菌菌落）； 采用MRS 選擇培養基檢測乳酸桿菌。 （3）樣品計數：選擇第3、4、5 管（稀釋度分別為10-4、10-5、10-6）樣品，每個稀釋度用微量移液管取20 μL， 小心滴于選擇培養基上，每塊培養基劃為3 小塊，每小塊滴一個樣品一個稀釋度，每個稀釋度做兩次，計數時取其平均值。 加好樣后，將培養基置37 ℃恒溫培養箱培養24 h，取出觀察并記錄結果。 每個樣品有三個稀釋度，選擇菌落數為2 ～20 個的稀釋度為正確試驗結果。 （4）結果計算：計數結果=菌落數×所選擇稀釋度×50（cfu/g）（注：因為每個稀釋度僅取20 μL 計數，折算為1 mL 樣品時，應乘以50 倍）。

1.5 數據處理及統計分析 用SPSS 10.0 統計軟件對可量化生產性能指標數據進行單因素方差分析和兩兩比較的q 檢驗（Newman-Keuls 法） 或t檢驗，結果用“平均值±標準差”表示，各分析指標的差異顯著性以P ＜0.05 表示。

2 結果與分析

2.1 馬齒莧對產蛋雞產蛋性能的影響 由表2可知，與對照組相比，日糧中添加2%和3%馬齒莧組產蛋數分別提高49.5%和67.7%（P ＜0.05），添加1%、2%和3%馬齒莧組產蛋率分別提高15.4%、23.1%、26.9%（P ＜0.05）， 添加1%、2%和3%馬齒莧組料蛋比分別降低16.6%、17.4%、17.6%（P ＜0.05），各組平均蛋重差異不顯著。 飼糧中添加馬齒莧可顯著提高產蛋性能， 但對采食量無顯著影響。

表2 馬齒莧對蛋雞產蛋性能的影響

2.2 馬齒莧對蛋雞大腸桿菌和乳酸桿菌的影響由表3 可知，與對照組相比，添加3%馬齒莧組大腸桿菌數量降低57.8%（P ＜0.05），乳酸桿菌高于對照組一倍，差異顯著（P ＜0.05），且乳酸桿菌與大腸桿菌比值比對照組提高了39%（P ＞0.05）；添加1%馬齒莧組腸道中大腸桿菌數量降低，添加2%馬齒莧組乳酸桿菌的數量增加， 但差異均不顯著（P ＞0.05）。 因此，一定水平的馬齒莧能優化腸道中菌群數量并有效提高蛋雞腸道中的乳酸桿菌數并降低大腸桿菌數。

表3 馬齒莧對蛋雞大腸桿菌和乳酸桿菌的影響

3 討論

近年來，許多研究表明，在飼料中添加馬齒莧及其提取物能改變動物腸道中菌群關系， 增強其抗病力，并顯著改善其生產性能。王瑞云（1999）報道，每天給每只蛋雞添加0.05 kg 鮮馬齒莧，試驗組產蛋率、 種蛋受精率及受精蛋孵化率較對照組均顯著提高（P ＜0.05），試驗組較對照組飼料報酬極顯著提高（P ＜0.01）。陳國妮等（2015）研究表明，馬齒莧黃酮類化合物對大腸桿菌、 金黃色葡萄球菌、酵母菌等均有一定的抑制作用，其濃度越高，抑菌圈直徑越大，抑菌效果越明顯；其中對大腸桿菌和酵母菌有較強的抑制作用， 最低抑菌濃度均為0.313 mg/mL，對金黃色葡萄球菌的抑制作用最強，最低抑菌濃度為0.156 mg/mL。本試驗結果表明，日糧中添加一定水平的馬齒莧能夠顯著提高蛋雞的產蛋性能， 其原因可能是馬齒莧含有豐富的多糖、黃酮、α-亞麻酸和維生素等活性物質，可以改變卵巢的活性，促使更多卵泡的發育，產出更多的雞蛋，從而達到降低料蛋比。

通過檢測糞中乳酸桿菌和大腸桿菌的數量可以間接推斷蛋雞腸道中這兩種菌的數量關系。 馬齒莧能優化蛋雞腸道中菌群， 能使乳酸桿菌占據更多的黏附位點形成更大的優勢菌群， 并通過調節腸道內的微生態平衡從而抑制大腸桿菌生長。

4 結論

本試驗結果表明， 在產蛋雞日糧中添加適宜的馬齒莧能提高產蛋雞的產蛋性能， 并能優化蛋雞腸道中乳酸桿菌和大腸桿菌數量， 提高蛋雞的抗病能力。