Twist過表達與正常宮頸組織向宮頸癌病變發展關系的Meta分析

秦恩杰，孟沙，熊敏涵，成瑩，姚運紅，胡新榮

調查與研究

Twist過表達與正常宮頸組織向宮頸癌病變發展關系的Meta分析

秦恩杰，孟沙，熊敏涵，成瑩，姚運紅，胡新榮

523808 東莞，廣東醫科大學基礎醫學院

宮頸癌是臨床常見的婦科惡性腫瘤之一，在全球發病率中僅次于乳腺癌，嚴重威脅著女性的生命健康[1]。宮頸癌的發生發展是一個漸進的演變過程，從宮頸上皮內瘤變（cervical intraepithelial neoplasia，CIN）發展到宮頸癌可經歷數年至數十年。因此，通過有效的篩查方法早期發現并及時進行干預，可使宮頸癌的發病率和病死率降低 80%[2]。Twist 是一種堿性的螺旋-環-螺旋轉錄因子，在多種類型腫瘤中過度表達，并發揮關鍵作用，且在乳腺癌、肝細胞癌、卵巢癌和肝細胞癌等的侵襲和轉移中起重要作用[3-4]。

Twist 在 CIN 和宮頸癌中表達的相關性分析已有文獻報道，但尚未見對其差異表達的系統評價。我們通過檢索和篩選公開發表的相關期刊文獻，系統評價了正常宮頸、CIN 和宮頸癌組織中 Twist 表達的陽性率，以期闡明 Twist 與 CIN 及宮頸癌發生發展的關系，為早期診斷 CIN 從而預測宮頸癌的發生提供分子標志。

1 資料與方法

1.1 納入與排除標準

1.1.1 Twist 蛋白檢測方法 采用鏈霉菌抗生物素蛋白-過氧化物酶免疫組織化學（SP）法檢測 Twist 蛋白。

1.1.2 研究類型 Twist 蛋白在 CIN 和宮頸癌中表達差異的病例-對照研究，對應文獻需見刊。文種限中文和英文。

1.1.3 研究對象 ①全部受試者取材前都未經特殊治療；②研究方法相似，且為病例-對照研究；③全部受試者不界定種族和國籍。

1.1.4 排除標準 ①無相應對照組；②非 SP 法或非蛋白質水平陽性（如以 mRNA 相對表達量等判定）；③相同作者相似內容重復報道。

1.2 檢索策略

計算機檢索 Cochrane Library、PubMed、Embase、Medline、CBM、知網、維普及萬方等數據庫，時間范圍為自建庫起，止于 2019 年 7 月。中文檢索詞包括Twist、宮頸上皮內瘤變、宮頸癌、病例對照研究，英文檢索詞包括 Twist、cervical intraepithelial neoplasias、cervical cancer、case-control study。檢索詞的邏輯關系為“或”和“OR”。根據論文所附參考文獻進一步擴大檢索范圍。

1.3 文獻篩選與信息提取

文獻檢索由兩位研究人員獨立進行，異議之處經討論決定或由第三方判定。提取信息包括文題、作者姓名、發表年限、納入病例年齡范圍、CIN 和宮頸癌中 Twist 表達陽性例數等。

1.4 統計學處理

采用 RevMan 5.3 軟件進行 Meta 分析，以比值比（odds ratio，OR）及 95% 可信區間（95% confidence interval，95% CI）為效應量表示結果。< 0.05 為差異有統計學意義。χ2檢驗對提取的研究結果進行異質性檢驗（α = 0.1）：當≥ 0.1，2 ≤ 50%，采用固定效應模型；當< 0.1 且2 < 50%，說明各研究結果間存在異質性，但在可接受范圍內，采用固定效應模型進行 Meta 分析；若< 0.1 且2> 50%，說明各研究結果間存在異質性，分析其異質性來源，若無明顯臨床異質性，采用隨機效應模型進行 Meta 分析，若異質性過大，則采用描述性分析。對比兩種效應模型分析結果進行敏感性分析，若結果一致，表明敏感性可接受。

2 結果

2.1 文獻檢索結果

初步檢索 583 篇相關文獻，經嚴格按納入標準篩選后，共納入 18 篇文獻，均為中文文獻（查找到的 5 篇英文文獻，與部分中文文獻為相同作者和相似內容，屬重復報道，故排除），共含 2359 例受試者，包含正常宮頸 416 例、CIN 946 例和宮頸癌 997 例。篩選流程見圖 1。

2.2 納入研究的基本特征和方法學質量評價

18 篇文獻[5-22]研究報道了正常宮頸、CIN 和宮頸癌組織中 Twist 的蛋白表達情況，其中對 Twist 表達的強弱，多依靠經驗判定。納入研究相關信息見表 1。

2.3 Meta 分析結果

2.3.1 宮頸癌組與正常宮頸組間比較 18 篇文獻報道了宮頸癌組 997 例與正常宮頸組 416 例中 Twist 蛋白表達情況。森林圖顯示= 23%，= 0.08，符合固定效應模型條件，分析 Twist 表達陽性率顯示，宮頸癌組大于正常宮頸組[OR = 22.22，95% CI（15.68，31.49）]（圖 2），差異有統計學意義（< 0.00001）。

圖 1 文獻檢索和篩選流程

表 1 納入研究的基本特征分析

2.3.2 宮頸癌組與 CIN 組間比較 18 篇文獻報道了宮頸癌組 997 例與 CIN 組 946 例中 Twist 蛋白表達情況。森林圖顯示2 = 55%，= 0.002，各項研究結果之間統計有中度異質性，采用隨機效應模型，分析 Twist 表達陽性率顯示，宮頸癌組大于 CIN 組[OR = 4.26，95% CI（3.49，5.19）]（圖 3），差異有統計學意義（< 0.00001）。

2.3.3 CIN 組與正常宮頸組比較 18 篇文獻報道了 CIN 組 946 例與正常宮頸組 416 例中 Twist 蛋白表達情況。森林圖顯示2= 44%，= 0.02，符合固定效應模型條件，分析 Twist 表達陽性率顯示，CIN 組大于正常宮頸組[OR = 4.82，95% CI（3.47，6.69）]（圖 4），差異有統計學意義（< 0.00001）。

圖 2 宮頸癌組與正常宮頸組 Twist 表達的比較

圖 3 宮頸癌組與 CIN 組 Twist 表達的比較

2.3.4 敏感性分析 對各個評價指標行敏感性分析，對納入的 18 個研究進行漏斗圖分析，漏斗圖未見明顯不對稱（圖 5），兩種效應模型分析結果均一致，表明敏感性可接受。

3 討論

據統計，我國宮頸癌每年的新發病例約有 13.5 萬，約占世界新發病例的 1/4，且每年以 2% ~ 3% 的速度增長，近幾年，宮頸癌在歐美發達國家的發病率出現明顯下降，與宮頸癌有效的早期診斷及治療密切相關[23]。宮頸上皮內瘤樣病變是一組癌前病變，與宮頸浸潤癌密切相關，反映了宮頸癌發生發展中的連續性。由此可見，宮頸癌防治的關鍵在于其早期病變診斷和治療[24]。1995 年國際癌癥研究中心（IARC）專題討論會明確提出：宮頸癌的主要病因為 HPV 感染，但 HPV 感染并非宮頸癌發生的唯一因素。HPV 感染在一定程度上能導致 CIN 的發生，故是宮頸癌發生的病因之一[25]。

Twist 是一種轉錄因子，由常染色體上基因編碼，其蛋白具有堿性螺旋-環-螺旋結構。在生理條件下，Twist 能夠調節組織重建，細胞遷移，參與胚胎發育和新生血管生成。Twist 基因的過度表達能夠促進細胞惡性表型的轉化，在特定的情況下，可以促進上皮細胞向間充質細胞轉化、增強細胞運動和遷移能力，與腫瘤發生、發展和浸潤及轉移密切相關[26]。因此，Twist具有癌基因特點，其在惡性腫瘤中高表達，通過調控EMT 促進腫瘤的侵襲和轉移[27]。

圖 4 CIN 組與正常宮頸組 Twist 表達的比較

圖 5 18 個納入研究的漏斗圖分析

本研究分析顯示，與正常宮頸組織相比較，Twist 在 CIN 和宮頸癌組織中表達均明顯上調，與前期報道[6-22]的結果相符，支持Twist 過表達可以作為宮頸癌的預后因素之一。而與 CIN 組織相比較，Twist 在宮頸癌組織中的表達進一步升高，也與多數報道[5-7, 9-22]的研究結果一致，提示 Twist 過表達可能與正常宮頸組織通過 CIN 向宮頸癌發展有關。然而，在以往的相關報道中，并非完全支持 Twist 過表達增加正常宮頸組織向 CIN 發展的風險。常蕾[5]發現，Twist 在正常宮頸組織中的表達高于 CIN 組織；范瓊等[8]認為，Twist 表達在 CIN 和宮頸癌組織間無顯著差異。本研究通過 Meta 分析，在較大樣本量的層面上，支持 Twist 蛋白表達在正常宮頸、CIN 與宮頸癌組織中的表達逐步升高，兩兩比較均具有顯著的統計學意義，故支持 Twist 表達增加與正常宮頸組織通過 CIN 向宮頸癌發展有關，且檢測 Twist 的表達可能有助于癌前病變及宮頸癌的預測。

本次研究不排除有以下局限性：①只納入了公開發表的相關文獻，不排除有偏倚和遺漏；②納入的各項研究中使用的組織標本處理方法、免疫組化染色操作及評價方法、抗體穩定性等因素可能會影響數據的一致性。

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國家自然科學基金（81572566）

胡新榮，Email：huxinrong @163.com

2019-07-30

10.3969/j.issn.1673-713X.2020.01.015