膀胱癌相關腫瘤標志物的研究進展與臨床應用

謝 平 張世昌 鄭 江

長江大學附屬第一醫院，湖北省荊州市 434000

膀胱癌(Bladder cancer，BC)在惡性腫瘤中處于第11位[1]，是泌尿系統常見的惡性腫瘤之一，我國膀胱癌發病率較高，近年有上升趨向,嚴重威脅著人們健康。目前臨床對BC的檢測主要行膀胱鏡檢及病理組織活檢，但膀胱鏡檢是一種有創性檢查，痛苦較大，并且有出血、感染的風險，在診斷微小癌時，敏感性較低，容易漏診[2]。因此需要尋找一些敏感性、特異性較高的檢查方法，探尋更理想的膀胱癌初期診斷標志物，輔助膀胱鏡檢及病理活組織檢查,使膀胱癌的早期診斷更加準確、簡易、低創傷、經濟。

1 蛋白類腫瘤標志物

1.1 膀胱腫瘤抗原(Bladdder cancer antigen，BTA) BTA是由尿路上皮腫瘤細胞和巨噬細胞產生的，主要成分是補體因子H。補體因子H的產生使腫瘤細胞生長出現相對優勢，通過打斷補體級聯反應，可逃脫人體免疫監視及調控系統，使腫瘤細胞免以凋亡[3]。當其水平較高時，機體有發生腫瘤的可能。有研究表明BTA比尿脫落細胞學檢查的靈敏度稍高，在癌癥早期或腫瘤低級時，可檢出尿脫落細胞學和膀胱鏡檢查漏診的BC患者[4]，但BTA易受血尿、感染、炎性、結石及膀胱癌灌注史等因素的影響，使其敏感度降低。可對BC進行早期篩查和跟蹤。

1.2 透明質酸(Hyaluronic acid，HA)與透明質酸酶(Hyaluronidase，HAase) HA是一種酸性黏多糖，主要有調控組織血管通透性、調控蛋白質、電解質平衡等作用[5]。HAase是一種能使HA產生低分子化作用的酶，可使機體HA的活性降低，從而提高組織滲透性質的酶。在BC患者的尿液中，HA的尿蛋白水平在500ng/mg左右，對各級別BC的敏感性相似[6]。而HAase水平僅在較高級別BC才出現增高，約為正常的6倍。由此可見，HAase可檢測低級別BC，透明質酸酶則表明BC為中度或高度惡性的可能。為臨床提供一個可靠、無創的檢測方法。

1.3 核基質蛋白22(Nuclear matrix protein 22，NMP22) NMP22是新型腫瘤標志物，細胞核內部支架的主要蛋白是由NMP22構成。相關研究證實NMP22參與BC基因表達的調節[7]。NMP22中的主要成分為核有絲分裂器蛋白，癌細胞的結構和形態改變可引起核有絲分裂器蛋白水平的升高，核有絲分裂器蛋白是由BC細胞內裂解釋放，因此利用特定的識別抗體，可對BC細胞釋出的核分裂器蛋白進行檢測，一般正常人體NMP22含量不會超過10U/ml，但膀胱細胞癌變過程中，會迅速釋放NMP22，可達到正常水平的二十多倍，NMP22可以作為BC的診斷方法[8]，在臨床有良好的參考價值。

1.4 細胞角蛋白(Cytokeratin，CK) CK主要分布在上皮細胞，構成細胞骨架，維持上皮組織結構的穩定性。研究顯示上皮細胞的增殖分化與CK有一定關系。CK有二十多種異構體[9]。CK19在正常人體內含量較低，但在BC患者的體液中，大量CK19片段可被檢測出。在BC細胞中，CK20只存在于淺表尿路上皮細胞中。有研究表明，BC的病理分級和臨床分期與CK19、CK20的mRNA 表達正相關。CK19、CK20特異性以及敏感性在BC細胞中較高[10]。表明CK19、CK20與BC有關，作為一種無創的BC診斷檢測，與膀胱鏡聯合檢查可為膀胱腫瘤的早期診斷和改善預后提供指導。

1.5 生存素(Survivin) 生存素是一種可抑制細胞凋亡、促進細胞增殖分化的蛋白質，與腫瘤的形成與發展有密切關系[11]。有研究顯示，生物素在BC細胞中大量表達，并與BC的發生存在關聯性。BC血管的生成依賴于內皮細胞的活性，抑制生物素活性，有利于BC血管的凋亡，間接抑制BC細胞的生長[12]，以生物素為靶基因的研究方向已經初步形成[13]，可能為BC早期診斷的特異性標志物，以及BC治療的新靶點。

1.6 纖維蛋白降解產物(Fibrin degradation products，FDP) BC組織內微血管通透性高，纖維蛋白原可滲出血管外進入組織內，在纖維蛋白與纖溶酶結合后，并通過尿激酶作用形成FDP[14]。成人體內FDP含量很少，纖維蛋白被BC細胞所激活，導致FDP含量相對升高。若檢測尿液FDP含量，可對BC患者進行早期篩查。有研究表明，尿FDP的濃度越高，BC預后越差，測定尿FDP可用于BC的診斷和預后判斷[15]，所以FDP對晚期BC檢測價值更有意義。

2 癌基因類相關腫瘤標志物

2.1 熒光原位雜交(Fluorescence in situ hybridization，FISH) UroVysion 是一種多靶點FISH，可以從尿液中檢測出最常見的尿路上皮癌細胞。迄今為止，還沒有 UroVysion 試驗陽性的統一標準，若檢測時25個異常細胞中>4個染色體改變或>12 個細胞出現 9p21 位點的缺失時，一般被認為檢測結果為陽性[16]。該測試已被 FDA 批準用于對有BC病史的患者進行監測。在一項包含 2 477 項 FISH檢測的 Meta 分析中，UroVysion 檢測膀胱癌的靈敏度為 72%，優于尿液脫落細胞學檢查，但特異度較低，僅有 83%。UroVysion 試驗在膀胱癌的早期診斷和預后評估中具有無創、靈敏度和特異度高等優點，是早期診斷及監測UCB較為理想的手段[17]，UroVysion試驗診斷BC的陽性率與檢查的染色體數量相關，數量越多，陽性率越高，且不受泌尿系結石、感染等因素的影響。在中國人群中診斷膀胱癌同樣具有較高的應用價值。

2.2 K-ras基因 K-ras是人12號染色體上一種原癌基因，長約35kb，K-ras 主要通過基因擴增和染色體易位而激活，已在多種人類腫瘤表現K-ras基因的擴增[18]。P21是其編碼蛋白，具有 GTP酶的活性,與其他同源G蛋白P21，可起信號轉導的作用，當K-ras激活后，可使P21蛋白高表達，并與腫瘤的生成、增殖、遷移、擴散以及血管生成均有關系，是人類腫瘤中最常見的癌基因。有研究表明，正常膀胱組織和腫瘤旁組織P21蛋白表達為陰性，且低分化腫瘤中P21陽性表達率明顯高于中、高分化腫瘤，中、晚期患者的 P21 陽性表達率顯著高于早期患者，表達陽性率隨BC分期分級上升而明顯下降，與預后呈負相關[19]，可作為BC惡性程度判別和預后評價的指標。

2.3 miRNA-21 miRNAs是核苷酸的內源性非編碼小 RNA，通過特定的mRNA 進行翻譯、轉錄，從而調控蛋白質的表達，使機體細胞發揮生物學活性[20]。miRNA-21 是miRNAs 中的一種可在多種腫瘤細胞中呈現高表達，有研究顯示miRNA-21 與BC細胞的增殖、低凋亡及轉移有關[21]，在BC組織中 miRNA-21 的表達顯著高于非BC組織[22]，在BC的發生和發展中起重要調節作用，在BC的診斷、治療及預后中存在應用潛力。

3 總結與展望

目前BC相關的腫瘤標記物因受多種因素的影響，陽性率底，使臨床應用受限，探索新型的腫瘤標志物應考慮其敏感性、特異性、無創性、簡易性，且受不良因素影響較小，多方向研究、聯合檢測可互相彌補不足之處，并提高診斷正確率，但成本太高，尋找新的BC腫瘤標志物已成為新的發展方向。隨著科研的不斷拓展，將會有更多適宜BC的腫瘤標志物發現，對BC的早期診斷及預后評價具有重要意義。