原發性肝癌患者血清25-羥基維生素D3水平與免疫抑制因子IL-10的關系

邢時龍 淦勤

摘要：目的? 探究原發性肝癌患者血清25-羥基維生素D3[25-（OH）D3]的變化及其與免疫抑制因子IL-10的關系。方法? 選取2014年2月～2019年7月于我院就診的60例原發性肝癌患者作為疾病組，另外選擇同期60名健康體檢人群作為健康對照組，采用電化學發光法測定兩組血清25-（OH）D3濃度，酶聯免疫吸附試驗測定血清IL-10濃度。Spearman法分析25-（OH）D3與IL-10間的相關性。結果? 疾病組血清25-（OH）D3濃度低于健康對照組[（13.65±7.92）ng/ml vs （26.15±8.33）ng/ml]，差異有統計學意義（P<0.05）;疾病組IL-10濃度高于健康對照組[（89.71±26.59）ng/ml vs （26.18±8.15）ng/ml]，差異有統計學意義（P<0.05）。血清25-（OH）D3可能與淋巴結轉移和腫瘤分期密切相關，與IL-10濃度呈負相關（r=-0.568，P<0.05）。結論? 原發性肝癌患者存在25-（OH）D3缺乏現象，且與腫瘤進展和免疫抑制密切相關。

關鍵詞：原發性肝癌;25-（OH）D3;IL-10

中圖分類號：R735.7? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 文獻標識碼：A? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? DOI：10.3969/j.issn.1006-1959.2020.01.030

文章編號：1006-1959（2020）01-00101-03

Relationship Between Serum 25-hydroxyvitamin D3 Level and Immunosuppressive Factor IL-10

in Patients with Primary Liver Cancer

XING Shi-long，GAN Qin

（Department of Hepatobiliary Surgery，Jiujiang First People's Hospital，Jiujiang 332000，Jiangxi，China）

Abstract：Objective? To investigate the changes of serum 25-hydroxyvitamin D3[25-（OH）D3] in patients with primary liver cancer and its relationship with the immunosuppressive factor IL-10.Methods? 60 patients with primary liver cancer who were treated in our hospital from February 2014 to July 2019 were selected as the disease group， and another 60 healthy people were selected as the healthy control group during the same period，the serum 25-（OH）D3 concentration was measured by electrochemical luminescence method， and the serum IL-10 concentration was determined by ELISA. Spearman's method was used to analyze the correlation between 25-（OH）D3 and IL-10.Results? The serum 25-（OH）D3 concentration in the disease group was（13.65±7.92） ng/ml， which was lower than that in the healthy control group（26.15±8.33） ng/ml， the difference was statistically significant （P<0.05）; the IL-10 in the disease group the concentration was higher than that in the healthy control group [（89.71±26.59） ng/ml vs （26.18±8.15） ng/ml]，the difference was statistically significant（P<0.05）. Serum 25-（OH）D3 may be closely related to lymph node metastasis and tumor stage， and negatively correlated with IL-10 concentration（r=-0.568，P<0.05）. Conclusion? 25-（OH）D3 deficiency exists in patients with primary liver cancer， and is closely related to tumor progression and immunosuppression.

Key words：Primary liver cancer;25- （OH） D3;IL-10

原發性肝癌（primary liver cancer）在全球腫瘤導致死亡病例中占據第5位，約80%以上的原發性肝癌均伴隨慢性乙肝或丙肝感染[1]。在中國，多數患者由慢性乙肝患者演變而來[2]。近年來原發性肝癌早期篩查技術、外科手術技術以及綜合療法取得較大進展。但我國原發性肝癌逐漸年輕化，且在早期階段并無明顯臨床癥狀，隱匿性強，發現時常處于晚期階 段[3]，患者預后較差。目前對原發性肝癌的具體機制尚未完全明確，靶向治療效果并不理想[4]。探索原發性肝癌的發病機制，尋找新的診斷和治療靶點，具有重要的臨床意義。在眾多機制學說中，病原體與肝臟的免疫斗爭占據重要地位[5]。研究發現[6]，25-羥基維生素D3[25-（OH）D3]可調控機體固有免疫和適應性免疫反應，在多種腫瘤中也發現存在25-（OH）D3缺乏現象。Said E等[7]發現未經治療的慢性乙肝患者中血清25-（OH）D3顯著低于健康對照組，且與乙肝病毒載量存在顯著負相關，提示25-（OH）D3可參與抗病毒免疫反應過程，推測其同樣參與了原發性肝癌的致病過程。但目前關于原發性肝癌患者血清25-（OH）D3水平的研究尚無統一定論。因此，本研究選擇我院60例原發性肝癌患者，探討其血清25-（OH）D3水平及與腫瘤分期、IL-10的關系，現報道如下。

1資料與方法

1.1一般資料? 選取2014年2月～2019年7月于九江市第一人民醫院就診的原發性肝癌患者60例作為疾病組，所有患者均經病理組織學或臨床明確診斷，其中男38例，女22例，年齡39～78歲，平均年齡（58.28±19.18）歲。另選取同期于我院體檢中心健康體檢的60例健康人作為健康對照組，其中男37例，女23例，年齡38～76歲，平均年齡（58.90±18.31）歲。兩組年齡、性別比較，差異無統計學意義（P>0.05），具有可比性。

1.2方法? 采集兩組晨起空腹靜脈血6 ml，于干燥管中靜置20 min，3500 r/min離心10 min，分離血清，分裝2管，1管隨即送檢，用于檢測血清25-（OH）D3濃度;另一管于-80℃冰箱凍存備用，測定血清IL-10濃度。血清25-（OH）D3濃度采用深圳新產業公司SNIBE全自動化學發光免疫分析儀MAGLUMI 2000及其配套儀器測定;血清IL-10水平采用美國R&D公司的人IL-10測定ELISA試劑盒測定，所有步驟嚴格依據說明書執行。測定前保證儀器正常，室內質量控制合格。

1.3觀察指標? 比較兩組血清25-（OH）D3和IL-10水平及不同年齡、淋巴結轉移與否以及不同TNM分期的原發性肝癌患者血清25-（OH）D3濃度差異，原發性肝癌腫瘤分期依據美國癌癥聯合委員會制定的分期標準進行[8]。

1.4統計學方法? 采用SPSS 19.0統計學軟件處理實驗數據。計量資料采用（x±s）表示，兩組間比較采用獨立樣本t檢驗，多組間比較采用單因素方差分析;計數資料采用（%）表示，組間比較采用？字2檢驗;相關性分析采用Spearman法分析。以P<0.05表示差異有統計學意義。

2結果

2.1兩組血清25-（OH）D3和IL-10水平比較? 疾病組血清25-（OH）D3濃度低于健康對照組，IL-10水平高于健康對照組，差異均有統計學意義（P<0.05），見表1。

2.2原發性肝癌患者血清25-（OH）D3與臨床參數間的關系? 不同年齡、性別的原發性肝癌患者血清25-（OH）D3水平比較，差異無統計學意義（P>0.05）;淋巴結轉移患者血清25-（OH）D3水平低于未轉移患者，差異有統計學意義（P<0.05）; TNM分期Ⅲ+Ⅳ患者血清25-（OH）D3水平低于Ⅰ+Ⅱ期患者，差異有統計學意義（P<0.05），見表2。

2.3原發性肝癌患者血清25-（OH）D3和IL-10的相關性? Spearman相關性分析顯示，原發性肝癌患者血清25-（OH）D3與IL-10呈負相關（r=-0.568，P<0.05），見圖1。

3討論

探究原發性肝癌潛在的病因學機理對于開發新的治療靶點尤為關鍵[9]。25-（OH）D3在包括慢性乙肝的慢性肝病中存在普遍缺乏，且和疾病嚴重程度密切相關。既往報道證實其在多種腫瘤患者中缺乏[10]，然而目前關于25-（OH）D3與原發性肝癌患者的臨床報道較少，25-（OH）D3在局部組織的代謝活性可能在調控多種基因中扮演重要角色，這些基因涉及增殖、凋亡、分化、炎癥、侵襲、轉移以及血管生成和微小RNA轉換過程，其異常直接或間接介導了腫瘤發生和進展[11]。最新研究顯示25-（OH）D3缺乏或不足與肝癌發病風險增加密切相關，其血清濃度與肝癌風險呈負相關關系[12]。本研究發現，與健康對照組相比，原發性肝癌患者血清25-（OH）D3濃度下降，進一步分析患者血清25-（OH）D3濃度與臨床指標間的關系，發現不同年齡、性別的原發性肝癌患者血清25-（OH）D3水平基本一致，而在淋巴結轉移患者中血清25-（OH）D3濃度則低于未轉移患者，且處于腫瘤TNM分期Ⅲ+Ⅳ期患者的25-（OH）D3水平亦低于Ⅰ+Ⅱ期患者。以上結果提示血清25-（OH）D3可能與原發性肝癌進展存在密切關聯，處于進展期的患者通常血清25-（OH）D3濃度較低，但兩者之間的因果關系并不清楚，有待于進一步研究。既往研究證實25-（OH）D3可通過抑制組蛋白去乙?；?2的表達并增強P21表達，進而抑制HCC腫瘤細胞的增殖，發揮抗腫瘤效應。而本研究發現的原發性肝癌患者低水平25-（OH）D3，可能是腫瘤進展的表現亦或者由于25-（OH）D3濃度降低而導致機體抗腫瘤效應不足，這有待于進一步利用動物實驗加以驗證。此外，Finkelmeier F等[12]發現25-（OH）D3與原發性肝癌患者較差的生存預后情況密切相關，這些結果均提示25-（OH）D3參與了肝癌的進展，并可能作為潛在的生物標志物。

25-（OH）D3可調控機體免疫系統，祁曉平等[13]研究顯示，25-（OH）D3能夠有效保護大鼠抵抗致死劑量的LPS，這種保護作用可能與25-（OH）D3調控Treg細胞有關。在肝癌患者中，已經證實代表Treg細胞的IL-10存在異常上調現象，即肝癌患者存在嚴重的免疫抑制現象[14，15]。本研究結果也間接證實了該結論，即原發性肝癌患者血清25-（OH）D3與IL-10濃度呈負相關，提示肝癌中25-（OH）D3可能通過調控Treg細胞參與腫瘤的發生發展。

總之，本研究初步證實原發性肝癌患者血清25-（OH）D3異常下調，其與免疫抑制性細胞因子IL-10存在負相關性，且低水平的25-（OH）D3與肝癌患者腫瘤分期和淋巴結轉移可能有關。

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收稿日期：2019-08-21;修回日期：2019-08-30

編輯/王朵梅