半乳凝素-3在RMPP氣道炎癥中表達及與肺炎支原體載量及中性粒細胞水平相關性

李俊利 朱華 白玉新 馬春艷 張國棟 馮萬禹 劉春麗

肺炎支原體肺炎屬于臨床上常見的急性炎癥，主要是由肺炎支原體造成，其發生率約占社區獲得性肺炎的40%左右，其中RMPP(難治性肺炎支原體肺炎)較為常見，一旦患上RMPP后，患兒病情明顯加重，且肺部病灶范圍擴大，密度升高，甚至可能伴有壞死性肺炎、胸腔積液、肺不張等現象，不僅增加治療難度，同時提升對患兒的傷害，受到醫療界重點關注[1-3]。隨著醫療水平的完善發展，臨床發現支氣管肺泡灌洗在肺炎支原體肺炎中效果顯著，其中灌洗液中細胞學分類以中性粒細胞增加、巨噬細胞降低為主要特征[4-5]。另外有研究發現，急性期患兒的血清中半乳凝素-3明顯升高，因此證明半乳凝素-3與肺炎支原體感染造成的炎癥損傷有關[6-7]。但國內相關報道較少，我院對此展開研究，報告如下。

資料與方法

一、一般資料

選擇我院2018年5月-2019年2月納入的103例RMPP患兒作為研究組，另選擇同一時間接收的30例支氣管異物患兒作為對照組。其中研究組男性患兒59例，女性患兒44例，年齡3～9歲，平均年齡(6.78±1.02)歲，體重17～40kg，平均體重(29.87±1.47)kg，急性期61例，恢復期42例；對照組男性患兒18例，女性患兒12例，年齡3～10歲，平均年齡(6.90±1.13)歲，體重18～40kg，平均體重(30.05±1.59)kg。兩組基本資料相比無差異(P>0.05)(見表1)。

納入標準[8]：(1)研究組患兒均符合《兒童肺炎支原體肺炎診治專家共識(2015年版)》中疾病的診斷標準；(2)患兒家屬均知曉本次研究目的，并自愿加入本次研究中；(3)中途未退出研究者；(4)對照組患兒均存在異物吸入史，病程不超過7d，經過胸片檢查未發現肺部感染。

排除標準[9]：(1)研究前經檢查顯示肺結核、先天性疾病者、病原體混合感染或者肺部基礎疾病者；(2)存在支氣管哮喘史；(3)存在精神方面疾病者，依從性較差，無法配合研究者。

二、方法

所有研究對象實施支氣管肺泡灌洗治療，術前給予常規檢查，選擇0.02～0.03mg/kg阿托品+0.05～0.10ug/kg咪達唑侖進行肌注，儀器選擇纖維支氣管鏡(Olympus BF30c-20)，同時利用利多卡因遵照邊麻邊進方式，依次通過聲門、隆突、氣管、葉支氣管，并將纖維支氣管鏡放在病灶的側葉、段或者亞段支氣管，選擇生理鹽水進行局部灌洗，另外通過負壓回抽液體，保證灌洗液回收率超過40%，保存2mL灌洗液檢測中性粒細胞水平，再保存2mL置于12000rpm低溫條件下離心5min左右，檢測半乳凝素-3與肺炎支原體載量。

表1 兩組患者的基線數據對比

選擇單層紗布過濾灌洗液中黏液，經過離心后細胞沉渣給予蘇木素依紅染色，記錄其中細胞總數、中性粒及巨噬細胞的百分比。嚴格遵照酶聯免疫吸附法檢測灌洗液上清中半乳凝素-3水平，而肺炎支原體載量通過逆轉錄聚合酶鏈反應法檢測。

三、觀察指標

分別記錄兩組的半乳凝素-3、肺炎支原體載量、中性粒細胞及巨噬細胞水平，同時研究組中急性期與恢復期患兒的各項指標水平，最后分析半乳凝素-3與肺炎支原體載量、中性粒細胞及巨噬細胞的相關性。

四、統計學處理

結 果

一、比較兩組半乳凝素-3、肺炎支原體載量、中性粒細胞及巨噬細胞水平

研究組的半乳凝素-3、肺炎支原體載量、中性粒細胞及巨噬細胞水平與對照組相比，差異顯著(P<0.05)(見表2)。

表2 比較兩組半乳凝素-3、肺炎支原體載量、中性粒細胞及巨噬細胞水平

二、比較研究組中不同時期的半乳凝素-3、肺炎支原體載量、中性粒細胞及巨噬細胞水平

研究組中急性期患兒的半乳凝素-3、肺炎支原體載量、中性粒細胞水平與恢復期相比差異顯著(P<0.05)，但不同時期患兒的巨噬細胞水平相比無差異(P>0.05)(見表3)。

表3 比較研究組中不同時期的半乳凝素-3、肺炎支原體載量、中性粒細胞及巨噬細胞水平

三、半乳凝素-3與肺炎支原體載量、中性粒細胞及巨噬細胞的相關性

半乳凝素-3與肺炎支原體載量、中性粒細胞呈現正相關性(P<0.05)，但與巨噬細胞無相關性(P>0.05)(見表4)。

表4 半乳凝素-3與肺炎支原體載量、中性粒細胞及巨噬細胞的相關性

討 論

半乳凝素-3屬于半乳凝素家族中主要成員，在細胞粘附、增殖及凋亡中具有一定的參與價值，另外還可與細胞中糖蛋白、細胞表面分子及細胞外的基質發生作用。研究表明，半乳凝素-3與多種炎癥反應密切相關，尤其是中性粒細胞的粘附與激活、注釋細胞的化學趨化等[10-12]。目前臨床上發現半乳凝素-3在RMPP患兒中呈現高水平，且急性期患兒較恢復期升高，證明半乳凝素-3在RMPP的炎癥反應中具有重要意義[13-15]。

本文對此展開研究，結果顯示：研究組的半乳凝素-3、肺炎支原體載量、中性粒細胞及巨噬細胞水平與對照組相比，差異顯著(P<0.05)；研究組中，急性期患兒的半乳凝素-3、肺炎支原體載量、中性粒細胞水平與恢復期相比差異顯著(P<0.05)，但不同時期患兒的巨噬細胞水平相比無差異(P>0.05)；半乳凝素-3與肺炎支原體載量、中性粒細胞呈現正相關性(P<0.05)，但與巨噬細胞無相關性(P>0.05)，提示半乳凝素-3在RMPP氣道炎癥中具有重要價值，其水平與肺炎支原體載量及中性粒細胞水平密切相關。曾有研究顯示，RMPP患兒的外周血及肺泡內中性粒細胞水平明顯升高，其與胸腔積液、肺損傷等情況息息相關。本文研究結果中急性期患兒的中性粒細胞水平高于恢復期，分析原因可能是中性粒細胞參與了肺炎支原體感染后的免疫炎癥反應。另外半乳凝素-3是由肺部Clara細胞及巨噬細胞產生，屬于常見的促炎因子，加上肺炎支原體傷害患兒下呼吸道，主要取決于巨噬細胞的吞噬作用清除[16-17]。從上述研究中看到半乳凝素-3與肺炎支原體載量正相關，可能是因為肺炎支原體對患兒氣道上皮細胞及巨噬細胞產生刺激，從而分泌出半乳凝素-3，而半乳凝素-3能夠促進巨噬細胞發生活化反應，進一步清除肺炎支原體，但感染過程中可能消耗部分巨噬細胞[18-20]。但本次研究中仍存在一定研究不足與局限性，如樣本選取存在一定局限性，雖然按相應的標準進行了篩選，但所選取的標本是否合理有待商榷。另外樣本選取例數較少，研究時間較短，臨床可進一步擴大研究對象人數，延長研究時間，從而提升研究結果的準確性。

綜上所述，半乳凝素-3參與了RMPP氣道炎癥反應，而肺炎支原體能夠消耗巨噬細胞，另外半乳凝素-3與中性粒細胞及肺炎支原體載量密切相關，因此半乳凝素-3檢測在評估疾病中具有重要作用，值得臨床推廣使用。