腦梗死患者血漿晚期糖基化終產物、一氧化氮水平與頸動脈粥樣硬化的關系研究

翟 云，楊 柳，任薇薇，吳金萍

腦梗死是指多種原因引起局部腦組織缺血、缺氧，腦細胞出現壞死，神經功能受損的神經科疾病，好發于中老年人，發病基礎為動脈粥樣硬化(atherosclerosis， AS)，而AS發生與血管內皮損傷及炎癥反應等密切相關[1]。晚期糖基化終產物(advanced glycation end products， AGEs)是非酶糖基化反應的終末產物，可通過在細胞外基質沉積、免疫炎癥反應及氧化應激反應等損傷血管[2]。一氧化氮(nitric oxide， NO)是參與血管功能調節的氣體信號分子，可平衡血管舒縮、炎癥反應，是內皮功能評估的重要指標之一[3]。目前，國內關于腦梗死患者AGEs、NO水平與AS發生關系的研究較少，而頸動脈是反映AS的窗口，所以本研究通過檢測腦梗死患者血漿AGEs、NO水平及頸動脈粥樣硬化(carotid atherosclerosis， CAS)程度，分析腦梗死患者血漿AGEs、NO水平與CAS的關系，初步探討血漿AGEs、NO水平在CAS發展及腦梗死程度中的作用，現報告如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2018年1月—2019年1月西安工會醫院收治的符合納入及排除標準的112例腦梗死作為腦梗死組；另選取同期來該院體檢，且性別和年齡與腦梗死組匹配的健康體檢者50例作為對照組。腦梗死組男61例，女51例；年齡52～80(64.83±7.93)歲。體質量指數(body mass index, BMI)21.21～29.78(25.32±2.62)kg/m2。對照組男28例，女22例；年齡51～78(63.10±7.23)歲；BMI 20.58～29.41(25.01±2.85)kg/m2。兩組性別、年齡及BMI比較差異無統計學意義(P>0.05)，具有可比性。

根據美國國立衛生研究院卒中評定量表(NIH stroke scale, NIHSS)[4]評分評價病情程度，腦梗死112例中輕度44例(NIHSS 0～15分)，中度38例(NIHSS 15～30分)，重度30例(NIHSS 30～45分)。輕度男23例，女21例；年齡53～76(64.50±7.62)歲；BMI 21.21～28.56(25.41±2.67)kg/m2。中度男22例，女16例；年齡52～80(64.76±8.02)歲；BMI 20.96～29.78(25.22±2.43)kg/m2。重度男16例，女14例；年齡55～78(65.37±7.58)歲；BMI 22.39～29.35(25.33±2.61)kg/m2。不同病情程度腦梗死患者性別、年齡及BMI比較差異無統計學意義(P>0.05)，具有可比性。超聲檢查結果顯示腦梗死112例中粥樣斑塊形成76例，非粥樣斑塊形成36例。粥樣斑塊形成男40例，女36例；年齡52～76(64.25±7.36)歲；BMI 21.21～29.78(25.46±2.42)kg/m2。非粥樣斑塊形成男21例，女15例；年齡55～78(65.03±8.12)歲；BMI 21.35～29.54(25.20±2.81)kg/m2。粥樣斑塊形成與非粥樣斑塊形成腦梗死患者性別、年齡及BMI比較差異無統計學意義(P>0.05)，具有可比性。本研究經醫院醫學倫理委員會批準同意執行。

1.2納入及排除標準 納入標準：①符合腦梗死診斷標準[5]，并經影像學檢查證實診斷；②年齡<80周歲。排除標準：①合并嚴重系統性疾病者；②近期有手術史、心肌梗死史及創傷史者；③合并惡性腫瘤者。

1.3檢查方法

1.3.1血漿AGEs及NO水平檢測：采集所有受試者空腹靜脈血3～5 ml，并進行抗凝處理，3000 r/min離心10 min，收集上清液，待檢測。采用酶聯免疫吸附試驗法檢測血漿AGEs水平，試劑盒購自上海一研生物科技有限公司。采用硝酸還原酶法檢測血漿NO水平，試劑盒購自南京建成生物工程研究所。

1.3.2超聲檢查：患者取仰臥位，肩下用枕頭墊高使頸部維持仰伸狀態，頭部偏向檢查對側，采用彩色多普勒超聲診斷儀(日本ALOCKA公司)進行經頸動脈超聲檢查，雙側均查，探頭頻率7～10 MHz，測量頸總動脈分叉處內中膜厚度(intima-medium thickness， IMT)。頸總動脈分叉處IMT≥1.2 mm視為粥樣斑塊形成[6]。

1.4觀察指標 比較腦梗死組和對照組、不同病情程度腦梗死患者血漿AGEs、NO水平和頸總動脈分叉處IMT，粥樣斑塊形成與非粥樣斑塊形成腦梗死患者血漿AGEs和NO水平，并采用Spearman等級相關分析對血漿AGEs、NO水平和頸總動脈分叉處IMT與腦梗死病情程度關系以及血漿AGEs、NO水平與腦梗死患者粥樣斑塊形成關系進行分析。

2 結果

2.1腦梗死組和對照組血漿AGEs、NO水平和頸總動脈分叉處IMT比較 腦梗死組血漿AGEs水平及頸總動脈分叉處IMT高于對照組，血漿NO水平低于對照組，差異有統計學意義(P<0.01)，見表1。

表1 腦梗死患者和健康體檢者血漿AGEs、NO水平和頸總動脈分叉處IMT比較

注：AGEs為晚期糖基化終產物，NO為一氧化氮，IMT為內中膜厚度

2.2不同病情程度腦梗死患者血漿AGEs、NO水平和頸總動脈分叉處IMT比較 不同病情程度腦梗死患者間血漿AGEs、NO水平和頸總動脈分叉處IMT總體比較差異有統計學意義(P<0.01)。輕度腦梗死患者血漿AGEs水平和頸總動脈分叉處IMT低于中度和重度腦梗死患者，血漿NO水平高于中度和重度腦梗死患者，差異均有統計學意義(輕度vs中度：q=3.563、P=0.001，q=4.777、P<0.001，q=2.466,P=0.016；輕度vs重度：q=7.569、P<0.001，q=10.444、P<0.001，q=5.081、P<0.001)；中度腦梗死患者血漿AGEs水平和頸總動脈分叉處IMT低于重度腦梗死患者，血漿NO水平高于重度腦梗死患者，差異有統計學意義(q=4.316、P<0.001，q=5.855、P<0.001，q=2.117、P=0.038)。見表2。

表2 不同病情程度腦梗死患者血漿AGEs、NO水平和頸總動脈分叉處IMT比較

注：AGEs為晚期糖基化終產物，NO為一氧化氮，IMT為內中膜厚度；與輕度比較，aP<0.05，bP<0.01；與中度比較，cP<0.05，dP<0.01

2.3血漿AGEs、NO水平和頸總動脈分叉處IMT與腦梗死病情程度關系 Spearman等級相關分析結果顯示，血漿AGEs水平與腦梗死病情程度呈正相關(r=0.616，P<0.001)，血漿NO水平與腦梗死病情程度呈負相關(r=-0.667，P<0.001)，頸總動脈分叉處IMT與腦梗死病情程度呈正相關(r=0.401，P=0.008)，見圖1～圖3。

圖1 血漿晚期糖基化終產物與腦梗死病情程度Spearman等級相關分析

圖2 血漿一氧化氮與腦梗死病情程度Spearman等級相關分析

圖3 頸總動脈分叉處內中膜厚度與腦梗死病情程度Spearman等級相關分析

2.4粥樣斑塊形成與非粥樣斑塊形成腦梗死患者血漿AGEs和NO水平比較 粥樣斑塊形成腦梗死患者血漿AGEs水平高于非粥樣斑塊形成腦梗死患者，血漿NO水平低于非粥樣斑塊形成腦梗死患者，差異均有統計學意義(P<0.01)，見表3。

表3 粥樣斑塊形成與非粥樣斑塊形成腦梗死患者血漿AGEs和NO水平比較

注：AGEs為晚期糖基化終產物，NO為一氧化氮

2.5血漿AGEs、NO水平與腦梗死患者粥樣斑塊形成關系 Spearman等級相關分析結果顯示，血漿AGEs水平與腦梗死粥樣斑塊形成呈正相關(r=0.695，P<0.001)，血漿NO水平與腦梗死粥樣斑塊形成呈負相關(r=-0.697，P<0.001)，見圖4和圖5。

圖4 血漿晚期糖基化終產物與腦梗死粥樣斑塊形成Spearman等級相關分析

圖5 血漿一氧化氮與腦梗死粥樣斑塊形成Spearman等級相關分析

3 討論

AGEs是指無酶條件下，脂肪、核酸、蛋白質羰基與還原糖醛糖經一系列反應產生的穩定化合物，AGEs與其相應受體作用后，可介導多種病理過程[7]。有研究顯示，腦梗死患者AGEs水平明顯升高，且AGEs水平升高是腦梗死患者短期預后不良的危險因素[8]。NO屬于一種舒血管因子，由內皮細胞分泌，能通過使鳥苷酸環化酶激活，抑制血管平滑肌細胞增殖，起到舒張血管作用；另外，NO還可通過抑制內皮細胞與中性粒細胞作用、抑制血小板凝集，阻止血栓形成[9]。有研究顯示，腦梗死患者NO水平明顯低于健康者，認為NO水平異常與腦梗死發生可能存在一定關系[10]。本研究結果顯示，腦梗死組血漿AGEs水平高于對照組，血漿NO水平低于對照組，差異有統計學意義。不同病情程度腦梗死患者間血漿AGEs和NO水平總體比較差異有統計學意義。輕度腦梗死患者血漿AGEs水平低于中度和重度腦梗死患者，血漿NO水平高于中度和重度腦梗死患者；中度腦梗死患者血漿AGEs水平低于重度腦梗死患者，血漿NO水平高于重度腦梗死患者，差異有統計學意義。提示血漿AGEs和NO水平可能與腦梗死發生和發展相關。Spearman等級相關分析結果顯示，血漿AGEs水平與腦梗死病情程度呈正相關，血漿NO水平與腦梗死病情程度呈負相關。進一步證實血漿AGEs和NO參與腦梗死發生、發展。

IMT是早期AS監測的常用指標，對于心腦血管事件發生的預測具有重要價值。本研究結果顯示，腦梗死組頸總動脈分叉處IMT高于對照組，差異有統計學意義；不同病情程度腦梗死患者間頸總動脈分叉處IMT總體比較差異有統計學意義；輕度腦梗死患者頸總動脈分叉處IMT低于中度和重度腦梗死患者，中度腦梗死患者頸總動脈分叉處IMT低于重度腦梗死患者，差異有統計學意義，與既往大多數研究結果一致[11-12]。

CAS是腦梗死發病基礎，超過70%的腦梗死患者由CAS引起，若能早期檢測并發現CAS，有助于腦梗死的預防及治療[13]。本研究超聲檢查結果顯示腦梗死112例中粥樣斑塊形成76例，非粥樣斑塊形成36例，粥樣斑塊形成腦梗死患者血漿AGEs水平高于非粥樣斑塊形成腦梗死患者，血漿NO水平低于非粥樣斑塊形成腦梗死患者。提示血漿AGEs和NO水平可能與粥樣斑塊形成、AS進展有關。Spearman等級相關分析結果顯示，血漿AGEs水平與腦梗死粥樣斑塊形成呈正相關，血漿NO水平與腦梗死粥樣斑塊形成呈負相關。提示血漿AGEs水平可促進AS進展，而血漿NO水平與其作用相反，能延緩AS進展。分析AGEs促進AS的可能原因：①AGEs在血管基底膜細胞外基質積聚，并形成交聯，促進微血管及大血管并發癥發生；②AGEs通過修飾脂質，減少NO合成，誘導細胞凋亡，削弱血管反應性；③AGEs通過與相應受體結合，增加內皮素1表達，減少依前列醇表達，使內皮細胞平衡受到破壞，并可激活免疫炎癥反應，促使AS發生[14-15]。分析NO延緩AS進展的可能原因：①NO作為內源性血管舒張劑，能對血管緊張度及局部血流量進行調節，使血管維持穩態；②NO具有抗血栓作用，能影響血小板聚集功能，促進已聚集血小板解體，減少纖溶酶原激活劑抑制物1等促血栓因子產生；③NO可通過抑制NF-κB激活及轉移，降低血管壁炎癥反應；④NO具有清除自由基、抗氧化及血管重塑作用，對血管內皮功能具有保護作用[16-19]。

總之，血漿AGEs水平升高、NO水平降低與腦梗死的發生和發展密切相關，其機制可能是通過血漿AGEs水平升高、NO水平降低促進CAS進展而實現。血漿AGEs、NO水平檢測可了解CAS進展情況，且對評估腦梗死患者病情程度具有重要意義。