帶狀皰疹患者外周血T淋巴細胞亞群的表達及其與病情嚴重程度的相關性

靳艷茹，楊 帆，劉孝兵，李雅琴，宋印娥，李 鋒，馮 倩，惠海英

帶狀皰疹是由帶狀皰疹病毒引起的感染性皮膚疾病，初次感染多在少兒時代，可引起水痘，之后長期潛伏于人體脊髓神經(jīng)后根神經(jīng)節(jié)的神經(jīng)細胞內(nèi)，若成年后病毒被再次激活，將侵犯患者皮膚和外周神經(jīng)使其產(chǎn)生炎癥反應，導致帶狀皰疹發(fā)生，部分患者可伴有持續(xù)數(shù)月甚至數(shù)年的后遺神經(jīng)痛，嚴重影響日常生活質(zhì)量[1-3]。目前，有學者認為機體免疫功能下降，與T淋巴細胞亞群數(shù)量異常尤其是CD4+T淋巴細胞數(shù)目減少密切相關[4]。為進一步了解帶狀皰疹患者外周血T淋巴細胞亞群的表達及其與病情嚴重程度的關系，本研究對帶狀皰疹100例外周血T淋巴細胞亞群CD3+、CD4+及CD8+水平進行了檢測，現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2014年7月—2016年2月安康市中心醫(yī)院皮膚科收治的符合納入及排除標準的帶狀皰疹100例作為帶狀皰疹組。100例中男54例，女46例；年齡25～64(46.23±7.74)歲。病程2～6(3.67±0.73)d。根據(jù)水皰簇數(shù)、水皰數(shù)目、紅斑面積、瘙癢疼痛、水皰變化及燒灼感這6個因子將帶狀皰疹100例進行病情嚴重程度評分，分數(shù)越高，病情越嚴重[2]。100例中總分≤6分(輕度帶狀皰疹)30例，總分6～12分(中度帶狀皰疹)44例，總分>12分(重度帶狀皰疹)26例。另選取同期在該院門診進行健康體檢的健康體檢者70例作為健康組，其中男36例，女34例；年齡27～63(45.11±7.84)歲。帶狀皰疹組和健康組性別及年齡比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05),具有可比性。本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學倫理委員會批準同意執(zhí)行。

1.2納入及排除標準 納入標準：①患者臨床癥狀和體征符合帶狀皰疹診斷標準[5]；②患者均于發(fā)病7 d內(nèi)就診；③患者和(或)其家屬對本研究知情同意并自愿參與本研究、簽署知情同意書。排除標準：①伴有嚴重器質(zhì)性疾病及免疫系統(tǒng)、血液系統(tǒng)疾病者；②合并惡性腫瘤者；③服用免疫抑制劑者；④妊娠或哺乳期婦女。

1.3治療方法 帶狀皰疹組均采用相同措施治療，靜脈滴注阿昔洛韋(麗珠集團麗珠制藥廠生產(chǎn)，國藥準字：H10960079)每日600 mg，持續(xù)滴注7 d，后改為口服阿昔洛韋每日300 mg，持續(xù)口服7 d，治療期間不服用其他糖皮質(zhì)激素類藥物。

1.4觀察指標及方法 比較帶狀皰疹組和健康組外周血T淋巴細胞亞群CD3+、CD4+及CD8+水平，不同病情程度帶狀皰疹患者外周血T淋巴細胞亞群CD3+、CD4+及CD8+水平，以及帶狀皰疹患者治療前后病情程度評分及外周血T淋巴細胞亞群CD3+、CD4+、CD8+水平變化；采用Spearman相關分析對帶狀皰疹患者外周血T淋巴細胞亞群CD3+、CD4+、CD8+水平與病情程度的相關性進行分析。所有帶狀皰疹患者于入院第2天和治療結束后1 d抽取靜脈血5 ml，對照組于體檢時抽取靜脈血5 ml，加入100 μl肝素抗凝，6 h內(nèi)檢測T淋巴細胞亞群CD3+、CD4+及CD8+水平。標本檢測，采用單克隆抗體三色熒光標記法，取抗凝細胞混懸液100 μl，加入10 μl標記的熒光單克隆抗體(Tritest CD3+、CD4+、CD8+，賽默飛有限公司)，室溫避光反應15 min，溶血后采用流式細胞儀(美國Beckman-Coulter公司，型號：EPICS-XL Ⅱ型)分析，流式細胞儀每次采集細胞數(shù)10 000個以上，采用Listmode系統(tǒng)軟件分析數(shù)據(jù)，分析T淋巴細胞亞群CD3+、CD4+及CD8+水平，即T淋巴細胞亞群CD3+、CD4+及CD8+占淋巴細胞的百分比。

2 結果

2.1帶狀皰疹組和健康組外周血T淋巴細胞亞群CD3+、CD4+及CD8+水平比較 帶狀皰疹組外周血T淋巴細胞亞群CD3+及CD4+水平低于健康組，CD8+水平高于健康組，差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.01)，見表1。

2.2不同病情程度帶狀皰疹患者外周血T淋巴細胞亞群CD3+、CD4+及CD8+水平比較 帶狀皰疹患者隨著病情程度增加，外周血T淋巴細胞亞群CD3+及CD4+水平逐漸降低，CD8+水平逐漸升高，不同病情程度帶狀皰疹患者總體比較差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。重度帶狀皰疹患者外周血T淋巴細胞亞群CD3+、CD4+水平低于輕、中度帶狀皰疹患者(重度vs輕度：t=3.889、P<0.001,t=5.797、P<0.001;重度vs中度：t=2.393、P=0.020,t=2.839、P=0.006)，CD8+水平高于輕、中度帶狀皰疹患者(重度vs輕度：t=4.457、P<0.001;重度 vs 中度：t=3.421、P=0.001)，差異有統(tǒng)計學意義。中度帶狀皰疹患者外周血T淋巴細胞亞群CD3+、CD4+水平低于輕度帶狀皰疹患者，CD8+水平高于輕度帶狀皰疹患者，差異有統(tǒng)計學意義(t=2.047、P=0.044，t=3.022、P=0.004，t=4.398、P<0.001)。見表2。

表1 帶狀皰疹組和健康組外周血T淋巴細胞亞群CD3+、CD4+及CD8+水平比較

表2 不同病情程度帶狀皰疹患者外周血T淋巴細胞亞群CD3+、CD4+及CD8+水平比較

注：與輕度帶狀皰疹患者同一指標比較，aP<0.05，bP<0.01；與中度帶狀皰疹患者同一指標比較，cP<0.05，dP<0.01

2.3帶狀皰疹患者治療前后病情程度評分及外周血T淋巴細胞亞群CD3+、CD4+、CD8+水平比較 治療后，帶狀皰疹患者病情程度評分及外周血T淋巴細胞亞群CD8+水平與治療前比較降低，外周血T淋巴細胞亞群CD3+、CD4+水平與治療前比較升高，差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，見表3。

表3 帶狀皰疹患者治療前后病情程度評分及外周血T淋巴細胞亞群CD3+、CD4+、CD8+水平比較

2.4外周血T淋巴細胞亞群CD3+、CD4+、CD8+水平與帶狀皰疹患者病情程度相關分析 Spearman相關分析結果顯示，外周血T淋巴細胞亞群CD8+水平與帶狀皰疹患者病情嚴重程度呈正相關(r=0.475，P<0.001)，外周血T淋巴細胞亞群CD3+、CD4+水平與帶狀皰疹患者病情嚴重程度呈負相關(r=-0.432，P<0.001；r=-0.364，P<0.001)。

3 討論

帶狀皰疹為一種病毒感染性疾病，在機體細胞免疫力下降時易因過度飲酒、勞累、呼吸道感染及月經(jīng)來潮等原因導致病毒在成年后再次被激活，使皮膚和周圍神經(jīng)出現(xiàn)炎癥反應[6-11]。因此，帶狀皰疹的發(fā)病與機體的免疫力有密切關系。B淋巴細胞和T淋巴細胞在機體免疫調(diào)節(jié)中分別介導體液免疫和細胞免疫，已有研究表明在帶狀皰疹發(fā)病過程中機體防御以細胞免疫應答為主[12]，機體內(nèi)T淋巴細胞亞群功能和數(shù)量在維持機體正常免疫功能中發(fā)揮著重要的作用，故本研究將T淋巴細胞亞群水平作為免疫功能的重要指標[13]。

正常機體內(nèi)各T淋巴細胞亞群互相作用，并維持一定動態(tài)平衡，共同發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)作用，當不同T淋巴細胞亞群的數(shù)量異常時，可導致機體免疫功能紊亂，并發(fā)生病理改變，機體被病毒感染的風險增加[14-15]。CD3+ T淋巴細胞是外周血中成熟T淋巴細胞的標志，CD4+ T淋巴細胞可輔助活化B細胞和細胞毒性T淋巴細胞產(chǎn)生抗體，激活巨噬細胞，已有研究表明帶狀皰疹患者在細胞免疫應答方面有一定異常現(xiàn)象[16-17]。周海林和蔣法興[12]研究認為CD3+和CD4+T淋巴細胞在病毒性疾病發(fā)病中有重要意義，特別是CD4+ T淋巴細胞數(shù)量下降可能是帶狀皰疹患者免疫功能受損的主要原因。許蕓等[18]研究認為CD8+T淋巴細胞數(shù)量增加表示機體內(nèi)抑制性T淋巴細胞增多，CD8+T淋巴細胞可作為判斷機體免疫狀態(tài)的客觀指標之一。

本研究結果顯示，帶狀皰疹組外周血T淋巴細胞亞群CD3+及CD4+水平低于健康組，CD8+水平高于健康組，差異具有統(tǒng)計學意義。提示帶狀皰疹患者外周血T淋巴細胞亞群受到明顯抑制，與劉軍超等[19]研究相符，該研究結果顯示帶狀皰疹患者外周血T淋巴細胞亞群CD3+及CD4+處于低水平，經(jīng)治療后帶狀皰疹患者外周血T淋巴細胞亞群CD3+和CD4+上升至正常。本研究結果還顯示，帶狀皰疹患者隨著病情程度增加，外周血T淋巴細胞亞群CD3+及CD4+水平逐漸降低，CD8+水平逐漸升高，不同病情程度帶狀皰疹患者總體比較差異有統(tǒng)計學意義；重度帶狀皰疹患者外周血T淋巴細胞亞群CD3+、CD4+水平低于輕、中度帶狀皰疹患者，CD8+水平高于輕、中度帶狀皰疹患者，差異有統(tǒng)計學意義；中度帶狀皰疹患者外周血T淋巴細胞亞群CD3+、CD4+水平低于輕度帶狀皰疹患者，CD8+水平高于輕度帶狀皰疹患者，差異有統(tǒng)計學意義；治療后，帶狀皰疹患者病情程度評分及外周血T淋巴細胞亞群CD8+水平與治療前比較降低，外周血T淋巴細胞亞群CD3+、CD4+水平與治療前比較升高，差異具有統(tǒng)計學意義。說明帶狀皰疹患者外周血T淋巴細胞亞群CD3+、CD4+及CD8+水平與病情嚴重程度相關，經(jīng)治療后病情趨于好轉，外周血T淋巴細胞亞群CD3+、CD4+及CD8+指標也趨于恢復正常。Laing等[20]研究表示，經(jīng)過相應治療后帶狀皰疹患者外周血T淋巴細胞亞群CD4+水平可較治療前升高，與本研究結果相符。本研究Spearman相關分析結果顯示，外周血T淋巴細胞亞群CD8+水平與帶狀皰疹患者病情嚴重程度呈正相關，外周血T淋巴細胞亞群CD3+、CD4+水平與帶狀皰疹患者病情嚴重程度呈負相關，這與Vukmanovic Stejic等[21]研究報道相符。

總之，帶狀皰疹患者外周血T淋巴細胞亞群CD3+及CD4+水平低于健康人群，CD8+水平高于健康人群；外周血T淋巴細胞亞群CD3+、CD4+及CD8+水平與帶狀皰疹患者病情嚴重程度存在相關性。因此，早期監(jiān)測外周血T淋巴細胞亞群水平變化，有助于盡快對帶狀皰疹患者病情發(fā)展做出合理判斷，并及時給出相應治療方案，利于疾病治療。