降調(diào)節(jié)聯(lián)合雌孕激素對改善PCOS患者凍融D3胚胎移植臨床結(jié)局的分析

朱愛珍，王雪松，葉蕾，景霞，王增艷

(1.山西省運城市中心醫(yī)院生殖醫(yī)學科，運城 044000；2.廣東省廣州市中山大學附屬第一醫(yī)院生殖醫(yī)學中心，廣州 510080)

多囊卵巢綜合征(PCOS)患者并發(fā)卵巢過度刺激綜合征(OHSS)的發(fā)生率高達20%～30%，PCOS不孕癥患者助孕的難題之一是OHSS發(fā)生率高。近幾年來，對PCOS患者選擇全胚冷凍后凍融胚胎移植(FET)可以大大降低重度OHSS的發(fā)生率。決定FET成功妊娠的關(guān)鍵因素是合理的子宮內(nèi)膜準備方案，因此如何為PCOS患者選擇適宜的子宮內(nèi)膜準備方案進行FET成為生殖領(lǐng)域研究熱點之一。由于PCOS患者月經(jīng)不規(guī)律，沒有自發(fā)排卵或者稀發(fā)排卵，所以FET周期不適合選用自然周期，臨床大多選擇激素替代治療(HRT)人工周期或者促排卵周期。近年來，促性激素激素釋放激素激動劑(GnRH-a)垂體降調(diào)節(jié)后再進行HRT的內(nèi)膜準備方案(降調(diào)節(jié)+HRT方案)在FET周期內(nèi)膜準備方案中應用越來越多。有研究認為GnRH-a垂體降調(diào)節(jié)可改善子宮內(nèi)膜容受性[1]。Hill等[2]研究認為GnRH-a降調(diào)節(jié)聯(lián)合雌孕激素替代準備內(nèi)膜在FET中應用，與自然周期比較可以獲得較高的臨床妊娠率和活產(chǎn)率。張京順等[3]認為GnRH-a降調(diào)節(jié)后聯(lián)合雌孕激素替代準備內(nèi)膜適用于包括PCOS在內(nèi)的患者，能改善PCOS患者的FET結(jié)局。但降調(diào)節(jié)+HRT會增加患者的臨床花費，目前哪一種內(nèi)膜準備方案更適宜PCOS患者尚無定論。本研究通過比較單純雌孕激素替代和降調(diào)節(jié)聯(lián)合雌孕激素替代方案準備內(nèi)膜在PCOS患者中的應用效果，探討適宜PCOS患者的最佳FET內(nèi)膜準備方案。

資料與方法

一、研究對象

選擇2017年1月至2018年12月在山西省運城市中心醫(yī)院生殖醫(yī)學科就診的75例符合納入標準的PCOS患者為研究對象，其中有2例患者因出現(xiàn)宮腔積液，3例患者因子宮內(nèi)膜薄，取消移植未納入統(tǒng)計分析。最終納入70例患者(70個周期)的臨床資料。納入標準：(1)按照2004年鹿特丹標準[4]診斷為PCOS；(2)均為第1次移植。排除標準：合并夫婦染色體異常；合并存在子宮畸形和其他子宮基礎(chǔ)病變(如子宮內(nèi)膜異位癥、子宮肌瘤、子宮內(nèi)膜息肉)；存在卵巢占位性病變或輸卵管積水；合并存在其它內(nèi)分泌疾病(如甲狀腺、腎上腺功能異常等)。

將研究對象按照內(nèi)膜準備方案的不同分為兩組：采用降調(diào)節(jié)聯(lián)合雌孕激素替代方案準備內(nèi)膜的為降調(diào)節(jié)+HRT組(32個周期)，采用雌孕激素替代治療方案準備內(nèi)膜的為HRT組(38個周期)，比較兩組患者的一般資料及妊娠結(jié)局。

二、研究方法

1. 內(nèi)膜準備：HRT組：月經(jīng)(或撤退出血)第5天開始用雌激素，采用遞增方案，即戊酸雌二醇(補佳樂，1 mg/片，拜耳醫(yī)藥，德國)起始劑量為6 mg/d，通過B超檢查監(jiān)測子宮內(nèi)膜厚度，適當調(diào)整藥物用量；當超聲檢查提示子宮內(nèi)膜厚度≥8 mm時，肌肉注射黃體酮(20 mg/支，浙江仙琚藥業(yè))60 mg×3 d行內(nèi)膜轉(zhuǎn)化。注射黃體酮后第4天，在超聲引導下將第3天(D3)胚胎移入宮腔，并繼續(xù)使用黃體酮及補佳樂。

降調(diào)節(jié)HRT組：月經(jīng)(或撤退出血)第3～5天給予GnRH-a(醋酸亮丙瑞林微球，3.75 mg/支，珠海麗珠制藥)3.75 mg，注射后28 d開始行HRT(方法同HRT組)。行超聲檢查提示子宮內(nèi)膜厚度≥8 mm時，開始轉(zhuǎn)化內(nèi)膜，肌肉注射黃體酮60 mg×3 d。后續(xù)操作同HRT組。

2. 性激素水平測定：采用化學發(fā)光法測定月經(jīng)第2～5天(或撤退出血第2～5天)血清基礎(chǔ)性激素水平；孕酮轉(zhuǎn)化日測定E2、孕酮水平。

3. 胚胎解凍及移植：根據(jù)玻璃化冷凍操作常規(guī)解凍卵裂期胚胎(D3胚胎)。對卵裂期胚胎進行質(zhì)量評分[11]，將胚胎分為4級：1級胚胎：胚胎卵裂球大小均勻，碎片<10%；2級胚胎：卵裂球大小均勻，碎片10%～20%；3級胚胎：碎片20%～50%的胚胎；4級胚胎：碎片>50%的胚胎。定義1級和2級胚胎為優(yōu)質(zhì)胚胎。所有患者均移植1～2枚可移植胚胎(1～3級)。

4. 子宮內(nèi)膜形態(tài)分型：A型：三線型，外層和中央強回聲線，外層和宮腔中線間為低回聲區(qū)；B型：中等強度回聲，均勻，中線回聲斷續(xù)不清；C型：回聲強，無中線回聲。

5. 移植結(jié)局：在移植后第14天抽血檢測HCG水平，血β-HCG>10 U/L為陽性；移植后35 d左右超聲可見宮內(nèi)孕囊及胎芽胎心者為臨床妊娠。確認臨床妊娠后，遞減雌激素。孕激素在妊娠10周時減少，在妊娠12周時停止。超聲提示宮腔內(nèi)見≥3個妊娠囊時，在10周內(nèi)進行減胎術(shù)。

6. 觀察指標：一般臨床資料，包括患者年齡、體重指數(shù)(BMI)、基礎(chǔ)性激素水平、不孕年限、移植胚胎數(shù)、轉(zhuǎn)化日子宮內(nèi)膜厚度、E2水平、移植日子宮內(nèi)膜厚度等；妊娠結(jié)局，包括胚胎種植率、臨床妊娠率、早期流產(chǎn)率、異位妊娠率等。

三、統(tǒng)計學分析

結(jié) 果

一、兩組患者的一般資料比較

兩組患者的年齡、不孕年限、BMI、基礎(chǔ)LH、FSH、E2、睪酮(T)水平及移植胚胎數(shù)比較均無顯著性差異(P>0.05)，組間具有可比性(表1)。

二、兩組患者妊娠結(jié)局比較

兩組患者的胚胎種植率、臨床妊娠率、異位妊娠率、早期流產(chǎn)率比較均無顯著性差異(P>0.05)。HRT組的補佳樂使用時間及劑量顯著高于降調(diào)節(jié)+HRT組(P<0.05)，孕酮轉(zhuǎn)化日內(nèi)膜厚度及移植日內(nèi)膜厚度則顯著低于降調(diào)節(jié)+HRT組(P<0.05)(表2)。

表1 兩組患者一般情況比較(-±s)

表2 兩組患者臨床結(jié)局比較[(-±s)，%]

注：與HRT組比較，*P<0.05。aHRT組有1例患者因內(nèi)膜厚度不夠，加用了陰道芬嗎通；降調(diào)節(jié)+HRT組有5例加用了芬嗎通，在比較轉(zhuǎn)化日E2水平時，剔除了兩組中該6例患者的數(shù)據(jù)

討 論

PCOS患者多表現(xiàn)有內(nèi)分泌紊亂，LH水平高、雄激素過多、胰島素抵抗以及糖脂代謝異常等。在誘導排卵周期內(nèi)，雄激素和抗苗勒管激素(AMH)的分泌增加會影響卵泡的發(fā)育。同時，體內(nèi)LH水平過高會導致子宮內(nèi)膜過早轉(zhuǎn)化[4]，繼而引起子宮內(nèi)膜與胚胎發(fā)育不同步，導致胚胎著床率降低。由于PCOS患者不能自發(fā)排卵，F(xiàn)ET周期傾向于利用人工周期準備內(nèi)膜[5]。Olivennes[6]發(fā)現(xiàn)長效GnRH-a促排卵方案相對于其他促排卵方案，可以獲得較高的臨床妊娠率和活胎分娩率，這可能與GnRH-a垂體降調(diào)節(jié)通過抑制垂體分泌內(nèi)源性雌激素，造成低雌激素狀態(tài)有關(guān)。在PCOS患者中，通過磷脂酶C和腺苷酸環(huán)化酶信號通路，高LH水平可激活子宮內(nèi)膜腺體[7]。GnRH-a降調(diào)節(jié)聯(lián)合HRT抑制下丘腦-垂體-卵巢軸，減少LH分泌，且能改善子宮內(nèi)膜容受性，同時緩解雄激素過多，改善妊娠結(jié)局。Groenewoud等[8]研究表明：在FET周期中GnRH-a降調(diào)節(jié)聯(lián)合雌孕激素替代方案能獲得顯著高于自然周期的臨床妊娠率和活產(chǎn)率。該結(jié)論與Chambers等[9]的結(jié)論相似。牛婷等[10]研究認為GnRH-a-HRT組妊娠率高于HRT組。本研究比較了HRT組和降調(diào)節(jié)+HRT組的臨床妊娠率，結(jié)果發(fā)現(xiàn)降調(diào)節(jié)+HRT組的臨床妊娠率略高于HRT組，但尚無統(tǒng)計學差異，這可能與本研究的樣本量較小有關(guān)。

子宮內(nèi)膜容受性是指子宮內(nèi)膜允許胚胎定位、黏附，并改變子宮內(nèi)膜間質(zhì)促進胚胎成功植入的一種狀態(tài)。“種植窗口”發(fā)生在排卵后6～8 d，或受精后5～7 d，這個短暫的窗口期是由卵巢分泌的甾體激素引發(fā)的，該過程涉及眾多因素的相互作用，如胞飲突、整合素、白血病抑制因子、雌孕激素及其受體等[11]。長效GnRH-a降調(diào)節(jié)聯(lián)合雌孕激素替代方案可改善PCOS患者FET的臨床結(jié)局，可能與子宮內(nèi)膜中雌激素水平下降有關(guān)。有學者指出，GnRH-a處理后血清雌激素水平降低，有利于子宮內(nèi)膜種植窗口的形成[12]，促進胚胎早期種植。但在PCOS患者的FET周期中，采用人工周期雌孕激素替代方案準備內(nèi)膜對卵泡發(fā)育的抑制作用不完全，部分卵泡仍可能分泌雌激素。而長效GnRH-a的應用可以減少內(nèi)源性雌激素的釋放，降低雌激素水平，在體內(nèi)形成低雌激素環(huán)境，更有利于胚胎的種植和植入，繼而提高臨床妊娠率[13-15]。本研究結(jié)果顯示，GnRH-a降調(diào)節(jié)HRT組中孕酮轉(zhuǎn)化日的E2水平明顯低于HRT組；孕酮轉(zhuǎn)化日及移植日的子宮內(nèi)膜厚度均顯著高于HRT組；補佳樂使用時間和補佳樂使用劑量亦顯著低于HRT組。進一步驗證了前述研究的結(jié)論。

本研究尚存在以下局限性：首先，作為回顧性研究，患者的選擇存在一定偏倚；其次，納入的樣本量較小，研究結(jié)果可能存在一定偏倚；最后，研究過程中未收集LH激素水平的變化，可能在機制研究中存在一定缺陷。因此后期尚需進一步增加樣本量開展前瞻性研究加以探討。但本文結(jié)果仍為尋找更適合PCOS患者FET周期的內(nèi)膜準備方案提供了一定數(shù)據(jù)積累。

綜上，本研究結(jié)果提示PCOS患者FET周期的內(nèi)膜準備中，GnRH-a聯(lián)合HRT方案與HRT方案比較，減少了雌激素的使用時間和使用量，降低了孕酮轉(zhuǎn)化日的E2水平，增加了子宮內(nèi)膜厚度，亦能獲得滿意的臨床結(jié)局。但是，長效GnRH-a的價格相對較高，在一定程度上增加了患者的經(jīng)濟負擔。因此，臨床上應謹慎合理地掌握臨床適應證，以期為患者選擇更優(yōu)的個體化內(nèi)膜準備方案。