井岡霉素與氟環(huán)唑防治水稻紋枯病的配方離體篩選及田間應(yīng)用效果

黃建華 何東兵 陳宏州 楊紅福 姚克兵 繆康

摘要：為了明確井岡霉素與氟環(huán)唑混用對水稻紋枯病菌的聯(lián)合作用類型，采用生長速率法測定了2個單劑及7個配比混劑對水稻紋枯病菌的毒力，結(jié)果表明井岡霉素與氟環(huán)唑以2 ∶ 1的配比復(fù)配時的增效系數(shù)（SR）最大，為1.93。以此配比加工的24%井岡霉素·氟環(huán)唑懸浮劑的田間應(yīng)用試驗結(jié)果表明，藥后20 d，混劑525～675 g/hm2對水稻紋枯病的病株防效和病指防效與單用12.5%氟環(huán)唑750 mL/hm2的效果相當(dāng)，且無顯著差異。24%井岡霉素·氟環(huán)唑懸浮劑用量為675 g/hm2時，藥后20 d的病株防效和病指防效分別為87.19%、85.23%。

關(guān)鍵詞：井岡霉素;氟環(huán)唑;水稻紋枯病菌;配方篩選;防治效果

中圖分類號： S435.111.4+2 ?文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A ?文章編號：1002-1302（2020）23-0108-03

水稻紋枯病是侵染水稻莖基部的重要病害，病菌通過菌核或病稻草在土壤中越冬[1]。水稻收獲時的秸稈全量還田使得田間菌源逐年增加，秸稈還田后田間施氮量并未減少，氮素水平偏高，使得紋枯病呈逐年加重發(fā)生趨勢，這給水稻生產(chǎn)造成極大損失[2-3]。氟環(huán)唑是重要的三唑類殺菌劑品種，內(nèi)吸性較強(qiáng)，對水稻紋枯病菌抑制力強(qiáng)，抑制中濃度僅為0.27 μg/mL[4]，對水稻紋枯病防效顯著，其作用機(jī)制主要是抑制病原菌甾醇生物合成，同時兼具保護(hù)及治療作用，還有誘導(dǎo)作物抗病性的作用[5-6]。井岡霉素曾是防治水稻紋枯病的主力品種[7-8]，持效期相對較噻呋酰胺短，它對紋枯病菌有多方面的作用機(jī)制[9]，當(dāng)藥劑作用消失后，病菌可恢復(fù)正常生長狀態(tài)，因此，井岡霉素對紋枯病抗性菌株種群沒有直接篩選作用，即使在紋枯病菌群體中出現(xiàn)抗性菌株，它也很難因這種篩選作用而使病菌種群發(fā)展成抗性群體[10]，因此，井岡霉素是低抗性風(fēng)險的殺菌劑，在水稻紋枯病的防治中仍能發(fā)揮作用[11-12]。為了江蘇省丹陽市水稻紋枯病的精準(zhǔn)防治、綠色防控，確定氟環(huán)唑與井岡霉素防治水稻紋枯病的混用或復(fù)配的最佳配比，本研究開展了離體配方的篩選，并對此配方藥劑品種對水稻紋枯病的防治試驗。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

水稻紋枯病菌（Rhizoctonia solani）由江蘇丘陵地區(qū)鎮(zhèn)江農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所植保研究室采自江蘇省丹陽市珥陵鎮(zhèn)水稻紋枯病重發(fā)水稻田，分離、鑒定并保存?zhèn)溆谩?/p>

供試藥劑為60%井岡霉素A原藥、20%井岡霉素A 可濕性粉劑（A組分含量，浙江桐廬匯豐生物化工有限公司提供），97%氟環(huán)唑原藥（沈陽科創(chuàng)化學(xué)品有限公司提供），24%井岡·氟環(huán)唑懸浮劑（江蘇省蘇科農(nóng)化有限責(zé)任公司加工），12.5%氟環(huán)唑懸浮劑（巴斯夫中國有限公司，市購）。

1.2 井岡霉素與氟環(huán)唑復(fù)配配方篩選試驗

先將60%井岡霉素A和97%氟環(huán)唑分別用適量水和丙酮溶解后加10%吐溫-80，配制成 1 000 μg/mL 母液。再將母液配制系列測定濃度，待測藥劑均設(shè)置按2倍稀釋的7個濃度梯度，采用菌絲生長速率法測定病菌各藥劑濃度的PSA平板上的生長直徑，井岡霉素、氟環(huán)唑在含藥平板中的測定濃度分別設(shè)計為20.000 0～0.312 5、0.500 0～0.007 812 5 μg/mL，井岡霉素和氟環(huán)唑（4 ∶ 1、3 ∶ 1、2 ∶ 1、1 ∶ 1、1 ∶ 2、1 ∶ 3和1 ∶ 4）復(fù)配劑的濃度均為1.000 0～0.015 625 μg/mL。上述所有試驗所用系列濃度藥劑均為現(xiàn)配現(xiàn)用。

利用打孔器在培養(yǎng)有水稻紋枯病菌的PSA平板上制取直徑5 mm的菌餅，將之移入已制備的各藥劑系列濃度的含藥PSA平板上，另設(shè)無藥的PSA平板為空白對照，每個處理按上述操作進(jìn)行4次重復(fù)。將上述處理平板放置25 ℃培養(yǎng)箱中恒溫培養(yǎng)48 h，待對照處理菌落長至約平皿直徑的4/5時，采用十字交叉法測量菌落直徑，減去菌餅直徑即為生長直徑，以下述公式計算藥劑對紋枯病菌的生長抑制率：

菌絲生長抑制率={（對照菌落生長直徑-處理菌落生長直徑）/對照菌落生長直徑}×100%。采用DPS 13.0專業(yè)版數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)，計算各藥劑組合對水稻紋枯病菌菌絲生長抑制的回歸方程、EC50及其95%置信限。

根據(jù)Wadley 法，采用增效系數(shù)（SR）評價藥劑混用的聯(lián)合作用類型[13]。

1.3 井岡霉素與氟環(huán)唑復(fù)配防治水稻紋枯病的田間試驗

田間試驗地點為江蘇省丹陽市珥陵鎮(zhèn)中仙村，試驗水稻品種為南粳晶谷，前茬為小麥，栽插方式為旱育機(jī)插，該地區(qū)土壤為灰沙土，肥力良好，單獨排灌。田間施藥日期為2020年8月5日，采用衛(wèi)士WS-16型噴霧器進(jìn)行粗噴霧，藥液量600 kg/hm2，藥前田間保持3～5 cm水層，藥后持續(xù)保水5 d。施藥時田間紋枯病處于發(fā)病初期。試驗期間平均溫度 29.4 ℃，最高溫度38.1 ℃，雨日數(shù)4 d，降雨量 58.5 mm。

田間小區(qū)試驗設(shè)6個處理，分別為24%井岡·氟環(huán)唑375、525、675 mL/hm2，12.5%氟環(huán)唑 750 mL/hm2，20%井岡霉素A 450 g/hm2和空白對照。各處理小區(qū)面積133 m2，重復(fù)3次，隨機(jī)區(qū)組排列。

防效調(diào)查時在每小區(qū)隨機(jī)定3點，每點25穴，藥前調(diào)查紋枯病發(fā)病基數(shù)，藥后10 d和20 d調(diào)查各處理紋枯病發(fā)生量，計算病穴和病株校正防效。藥后20 d時按9級分級標(biāo)準(zhǔn)（0級：全株無病;1級：基部葉片、葉鞘發(fā)病;3級：倒第三葉及以下各葉鞘或葉片發(fā)病;5級：倒第二葉及以下各葉葉鞘或葉片發(fā)病;7級：劍葉葉鞘或葉片發(fā)病;9級：全株發(fā)病枯死）進(jìn)行病指調(diào)查，計算病指防效。

2 結(jié)果與分析

2.1 井岡霉素與氟環(huán)唑復(fù)配的最佳配比

室內(nèi)配方篩選試驗結(jié)果表明，井岡霉素、氟環(huán)唑單劑對水稻紋枯病菌菌絲生長抑制的EC50分別為6.654 1、0.032 2 μg/mL，氟環(huán)唑?qū)λ炯y枯病菌菌絲生長的抑制活性明顯高于井岡霉素。

井岡霉素與氟環(huán)唑分別以4 ∶ 1、3 ∶ 1、2 ∶ 1、1 ∶ 1、1 ∶ 2、1 ∶ 3和1 ∶ 4的配比復(fù)配組合對水稻紋枯病菌菌絲生長抑制的EC50分別為0.099 8、0.077 7、0.049 7、0.040 4、0.032 1、0.028 5和0.024 0 μg/mL，7種復(fù)配組合對水稻紋枯病菌的增效系數(shù)（SR）分別為1.58、1.63、1.93、1.59、1.50、1.51和1.68。這表明，井岡霉素與氟環(huán)唑分別以 4 ∶ 1、3 ∶ 1、2 ∶ 1、1 ∶ 1、1 ∶ 2、1 ∶ 3和1 ∶ 4的配比復(fù)配，增效系數(shù)均大于1.5，復(fù)配劑的聯(lián)合作用類型均為增效作用;當(dāng)井岡霉素與氟環(huán)唑以2 ∶ 1的配比復(fù)配時，增效系數(shù)最大，表明增效作用最大（表1）。因此，井岡霉素與氟環(huán)唑復(fù)配防治水稻紋枯病可優(yōu)選2 ∶ 1的配比。

2.2 井岡·氟環(huán)唑?qū)λ炯y枯病的田間防治效果

試驗結(jié)果表明，藥后10 d，24%井岡·氟環(huán)唑處理的防效與用量呈正相關(guān)，24%井岡·氟環(huán)唑 675 g/hm2 的防效最高，病穴防效和病株防效分別為81.27%、83.36%，與12.5%氟環(huán)唑 750 mL/hm2 防效無明顯差異，顯著高于20%井岡霉素A 450 g/hm2 的防效，極顯著高于24%井岡·氟環(huán)唑375 g/hm2的防效。

藥后20 d 24%井岡·氟環(huán)唑375 g/hm2、20%井岡霉素A 450 g/hm2的防效與藥后10 d相比有所下降，但24%井岡·氟環(huán)唑525 g/hm2、24%井岡·氟環(huán)唑675 g/hm2、12.5%氟環(huán)唑750 mL/hm2的防效均比藥后10 d的防效高。24%井岡·氟環(huán)唑 675 g/hm2 的病穴防效和病株防效分別為85.15%、87.19%，和12.5%氟環(huán)唑 750 mL/hm2 及24%井岡·氟環(huán)唑525 g/hm2的防效無顯著差異，但顯著高于20%井岡霉素A 450 g/hm2的防效，極顯著高于24%井岡·氟環(huán)唑375 g/hm2的防效。24%井岡·氟環(huán)唑525 g/hm2、24%井岡·氟環(huán)唑 675 g/hm2、 12.5%氟環(huán)唑750 mL/hm2的病指防效無顯著差異，但顯著高于20%井岡霉素A 450 g/hm2 的防效， 極顯著高于24%井岡·氟環(huán)唑375 g/hm2的防效（表2）。

水稻紋枯病發(fā)病初期使用24%井岡·氟環(huán)唑WP 525 g/hm2處理，藥后20 d的病穴、病株和病指防效分別為78.41%、80.32%、81.25%;使用 675 g/hm2 處理20 d后的病穴、株和病指防效分別提高至85.15%、87.19%、85.23%。

3 小結(jié)與討論

井岡霉素與氟環(huán)唑?qū)λ炯y枯病菌聯(lián)合作用表現(xiàn)為增效作用，且以井岡霉素 ∶ 氟環(huán)唑配比為 2 ∶ 1 時作用最大，井岡霉素為生物農(nóng)藥，對環(huán)境友好，氟環(huán)唑活性高，用量少，兩者混用或復(fù)配符合綠色防控的要求。以此配比采用24%井岡·氟環(huán)唑懸浮劑進(jìn)行的田間防治試驗表明，2種藥劑的優(yōu)化配方對水稻紋枯病表現(xiàn)出較好的防治效果，具有較長的持效期，用量為525～675 g/hm2的效果及持效期與氟環(huán)唑單用的相當(dāng)。因此，生產(chǎn)上使用24%井岡·氟環(huán)唑防治水稻紋枯病推薦劑量為525～675 g/hm2，紋枯病重發(fā)年份推薦使用675 g/hm2。

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