促生細菌Bacillus sp. QN₂MO-1的鑒定及對番茄生長的影響

張妙宜 高祝芬 唐文 趙炎坤 李凱 王尉 謝江輝 張錫炎 黃綿佳

摘? 要：為分離和鑒定具有促生作用的內(nèi)生菌，開發(fā)潛在功能的微生物菌株，本研究以諾尼（Morinda citrifolia L.）為研究對象，從植株不同組織中共分離得到621株內(nèi)生細菌，經(jīng)復篩得到具有促生和解磷作用的菌株，命名為QN2MO-1。基于菌株的生理生化分析和16S rDNA的序列比對，該內(nèi)生細菌與Bacillus siamensis KCTC 13613T（AJVF01000043）具有99.04%的同源性。藥敏性分析顯示，該菌對青霉素、硫酸鏈霉素和氨芐西林具有明顯的抗性。QN2MO-1可促進番茄種子的萌發(fā);與對照相比，5%菌體發(fā)酵液處理能顯著提高植株的生長。

關(guān)鍵詞：諾尼;暹羅芽胞桿菌;促生;種子萌發(fā);田間試驗

中圖分類號：S641.2? ? ? 文獻標識碼：A

Abstract： To identify endophytic bacteria with growth-promoting function and develop potential functional microbial strains， we isolated 621 strains from different tissues of Noni （Morinda citrifolia L.）. After screening， a strain with growth-promoting and phosphate-solubilizing function was obtained and named QN2MO-1. Based on the physiological and biochemical analysis of the strain and the sequence alignment of 16S rDNA， the endophyte had 99.04% homology with Bacillus siamensis KCTC 13613T （AJVF01000043）. Antibiotic sensitivity analysis showed that the strain had obvious resistance to penicillin， streptomycin sulfate and ampicillin. Compared with the control， QN2MO-1 could promote the germination of tomato seeds and 5% of fermentation broth treatment could significantly improve plant growth.

Keywords： Morinda citrifolia L.; Bacillus siamensis; growth-promoting; seed germination; field trial

DOI： 10.3969/j.issn.1000-2561.2020.12.015

海濱木巴戟（Morinda citrifolia L.），俗稱諾尼，茜草科巴戟天屬，譽為“天賜之物”“長壽之物”，為海南珍貴鄉(xiāng)土樹種，種植粗放、成本低、收益高、功效良好，兼具經(jīng)濟和生態(tài)價值[1]。諾尼果氨基酸種類多且蛋白質(zhì)含量高，早在2000多年前波利尼西亞人就以其為治療疼痛的最主要藥用植物[2-4]。有研究表明，藥用植物體內(nèi)含有大量功能內(nèi)生菌，為新的活性物質(zhì)和抗生素分離提供了重要的微生物資源。因此，開展諾尼內(nèi)生細菌鑒定和功能研究可為開發(fā)微生物菌劑提供重要的基礎。

植物內(nèi)生菌在現(xiàn)今耕作競爭中優(yōu)勢日漸明顯[5]。內(nèi)生菌可將連作中秸稈碳氮等消耗和酚類化感物質(zhì)等累積物的木質(zhì)素、纖維素等降解為土壤微生物易吸收的小分子物質(zhì)，從而促進碳氮源的有效循環(huán)，使土壤微生物種群主導結(jié)構(gòu)從真菌向細菌轉(zhuǎn)變，有效抑制重金屬離子對土壤酶活性和微生物活動的脅迫，提高土壤質(zhì)量[6]。國內(nèi)外正逐漸關(guān)注植物內(nèi)生菌的潛在功能，童文君[7]從美花石斛（Dendrobium loddigesii Rolfe）內(nèi)生菌種群中分離到67株具不同解磷、解鉀和產(chǎn)生長素（IAA）的潛能細菌，對菌株進行分類確定芽孢桿菌屬為優(yōu)勢屬。鄧平香等[8]研究了內(nèi)生菌對富集重金屬土壤的修復作用，從東南景天（Sedum alfredii）根系分離純化到熒光假單胞菌R1，對不同處理的鋅、鎘污染土接種R1，R1代謝產(chǎn)酸能促進東南景天生長和溶解土壤Zn和Cd。由此，探究創(chuàng)新農(nóng)業(yè)循環(huán)模式，發(fā)掘植物內(nèi)生菌促生優(yōu)勢及改良土壤潛力，具有廣闊的應用前景。本研究以藥用植物諾尼為研究對象，從植株各部位分離和鑒定內(nèi)生細菌，對其生理生化特性進行表征，通過田間試驗分析其對番茄生長和發(fā)育的影響。

1? 材料與方法

1.1? 材料

1.1.1? 樣品來源及處理? 諾尼的根、莖、葉、花和果實采自海南省澄邁縣橋頭鎮(zhèn)（19°58′35″N，109°55′35″E），分別將樣品進行分類標記，裝袋編號，4 ℃保存。

1.1.2? 培養(yǎng)基[9]? LB培養(yǎng)基：酵母粉5 g，胰蛋白胨10 g，氯化鈉l0 g，瓊脂20 g，蒸餾水1 L，pH 7.2～7.5;解磷培養(yǎng)基：葡萄糖10 g，磷酸二氫鉀0.2 g，硫酸銨0.5 g，氯化鈉0.3 g，硫酸鎂0.3 g，氯化鉀0.2 g，0.5%硫酸錳6 mL，0.5%硫酸亞鐵6 mL，磷酸三鈣5 g，瓊脂20 g，蒸餾水1 L，pH 7.2～7.4。

1.1.3? 供試作物? 供試材料為番茄（Lycopersicon esculentum Mill.），由海南澄邁老城濟光農(nóng)資店提供的常規(guī)主栽品種‘京丹1號。

1.2? 方法

1.2.1? 內(nèi)生細菌分離、初篩? 樣品消毒：取諾尼植株根、莖、葉、花、果實洗凈風干。為了對各組織進行滅菌處理，首先將各組織用75%乙醇處理5 min，后用次氯酸鈉（棕色瓶）處理20 min，再用10%的碳酸氫鈉浸泡10 min，無菌水沖洗5次，在滅菌濾紙上晾干并標注。

樣品印跡試驗[10]：采用組織印跡法將樣品貼放于LB培養(yǎng)基中5 min，28 ℃培養(yǎng)3 d作為無菌檢查。

樣品研磨：樣品徒手切成薄片后置于滅菌研缽中研磨至糊狀，各取汁液1 mL于離心管中（樣品之間處理需注意消毒），加入4 mL LB培養(yǎng)基，室溫180 r/min培養(yǎng)1 h，渦旋振蕩。

分離篩選：配制濃度梯度為10?1、10?2、10?3的樣品懸浮液，充分振蕩后各取200 μL滴于LB培養(yǎng)基上，涂布均勻，重復3次，常溫下倒置培養(yǎng)2 d，觀察菌落形態(tài)（樣品之間處理注意消毒）。用平板劃線法多次純化特征相異的單菌落至純培養(yǎng)。

1.2.2? 內(nèi)生細菌復篩? 將純化菌株轉(zhuǎn)接到固體解磷培養(yǎng)基上，37 ℃培養(yǎng)2 d，觀察其是否產(chǎn)溶磷圈，產(chǎn)透明溶磷圈初定為解磷菌，選取溶磷圈明顯的10株菌株，擴大培養(yǎng)并保存，進行功能測定。

（1）解磷能力測定。將初篩解磷菌制成菌懸液過濾離心，按磷含量0、0.02、0.05、0.10、0.15、0.20、0.40、0.80、1.20、1.60 mg/L的濃度梯度配制磷標準曲線，采用鉬銻抗比色法測定各濃度磷含量[9]，以未接種空白培養(yǎng)基為對照，每個濃度重復3次，利用分光光度計讀取OD700值，根據(jù)標準曲線計算濾液中的磷含量（mg/L）。

（2）產(chǎn)生長素（IAA）能力評估。將菌株接種于含100 mg/L L-色氨酸的LB培養(yǎng)基中，設3個重復，室溫、180 r/min培養(yǎng)2 d，取50 μL菌懸液滴于白色點滴板上，加入等體積“顯示劑”（Salkowski比色液），對照設置2組：等體積未接菌LB培養(yǎng)基和比色液的混合液為陰性對照，等體積50 μg/mL IAA液和比色液的混合液為陽性對照，室溫避光靜置15 min，顏色不變色為陰性，不產(chǎn)IAA;變粉紅則為產(chǎn)IAA菌，可進行IAA含量測定[11]。

產(chǎn)IAA能力測定：配制IAA母液（100 μg/mL），在25 mL定容瓶中定容濃度為0、10、20、30、40、50、60 μg/mL的IAA溶液，用分光光度計測定OD530，繪制IAA標準曲線。將菌懸液離心（10 000 r/min，10 min），取上清液，加入等體積Salkowski比色液，方法同上，根據(jù)IAA標準曲線計算菌株IAA產(chǎn)量[11]。

1.2.3? 內(nèi)生細菌分類鑒定? （1）形態(tài)學與生理生化鑒定。將菌株活化，37 ℃培養(yǎng)2 d，參考《常見細菌鑒定手冊》[12]、《伯杰氏細菌鑒定手冊》[13]對其菌落形態(tài)特征及酶學特性、碳氮源利用、耐受性等進行生理生化鑒定[14]。

（2）分子生物學鑒定。將活化菌株接種于LB培養(yǎng)基中，用細菌通用引物（27F： 5′-AGAGTT TGATCCTGGCTCAG-3′和1492R： 5′-GGTTA?CCTTGTTACGACTT-3′）擴增16S rDNA基因[9]。PCR擴增反應體系（25 μL）：DNA模板1 μL，上游引物0.5 μL，下游引物0.5 μL，2TaqPCR MasterMix 12.5 μL，ddH2O 10.5 μL，反應條件包括94 ℃預變性5 min，94 ℃變性1 min，55 ℃退火1 min，72 ℃延伸2 min，72 ℃后延伸10 min，4 ℃保存。

取5 μL PCR產(chǎn)物于1%瓊脂糖凝膠電泳預檢測，并送至華大基因測序。將序列與Genebank數(shù)據(jù)庫進行Blast比對，選取同源性較高序列，運用MEGA 7.0軟件鄰接法[14]進行聚類分析和構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹。

1.2.4? 內(nèi)生細菌對多種抗生素的藥敏性分析? 在LB培養(yǎng)基中滴加100 μL菌懸液，涂布均勻后放置抗菌藥物藥敏紙片，封口培養(yǎng)2 d，觀察記錄透明圈大小。

1.2.5? 內(nèi)生細菌對番茄種子萌芽和生長的影響? 將菌種接入LB培養(yǎng)基中，常溫下?lián)u瓶培養(yǎng)（180 r/min，2 d），以不接菌種LB培養(yǎng)基為空白對照。對番茄種子進行表面消毒[15]。

將番茄種子放入鋪有無菌濾紙的培養(yǎng)皿中，設置菌原液、不同菌液濃度（10?1、10?2、10?3）、清水、培養(yǎng)基6個處理，各重復3次，每皿放置15粒種子。人工氣候培養(yǎng)箱中以溫度30 ℃、濕度80%、光照40%，培養(yǎng)7 d，觀察記錄其萌芽情況（胚芽長度1.5 mm以上），計算萌芽率：萌芽率=（萌芽終期正常萌芽種子數(shù)/供試種子總數(shù)）× 100%。相同條件培養(yǎng)至10 d，并用游標卡尺測算記錄胚軸長度、胚根長度、胚軸粗壯程度等。

1.2.6? 內(nèi)生細菌發(fā)酵液田間試驗? 試驗地概況：坐標為19°30'21"N，109°29'42"E，受熱帶季風氣候影響光熱充足，土壤類型為磚紅壤，肥力中等。

發(fā)酵液制備：以平板劃線法將復篩所得目標菌株接于LB培養(yǎng)基上，37 ℃培養(yǎng)2 d。挑取單菌落于LB培養(yǎng)基中，37 ℃、180 r/min培養(yǎng)24 h。發(fā)酵液以豆粕和糖蜜為培養(yǎng)基（C/N=1∶16），加入6%種子液，常溫140 r/min培養(yǎng)7 d，吸取100 ?L稀釋10倍涂板計數(shù)，將發(fā)酵液活菌數(shù)稀釋至105 CFU/mL備用。

試驗設計：設計3個處理，以農(nóng)戶常規(guī)種植方式為對照，按自漚沼澤肥∶復合肥=40∶1的混合配比澆施;按2.5%和5%濃度發(fā)酵液澆施。各處理施肥次數(shù)及時間保持一致，試驗數(shù)據(jù)測量采取隨機取樣方式。

田間管理：2018年10月8日播種育苗;11月27日定植移栽，株距55 cm，行距120 cm，保苗株數(shù)1株/m2[16];2019年1月15日為開花坐果期;2月20日左右開始采摘，4月12日試驗結(jié)束。

指標測定：各處理隨機固定15株，根據(jù)不同發(fā)育期采集樣品指標進行生物學性狀及農(nóng)藝學性狀分析，如株高、莖粗、葉綠素、葉面積、壯苗指數(shù)、花數(shù)、可溶性固化物、果縱徑、果橫徑、單果重、鮮重、干重、生物量增加、整齊度[17-18]。

1.3? 數(shù)據(jù)處理

采用Microsoft Excel 2007軟件和單因素方差分析試驗數(shù)據(jù)，運用鄧肯氏新復極差檢驗法（DMRT法）進行差異顯著性分析。

2? 結(jié)果與分析

2.1? 促生內(nèi)生菌的篩選

對諾尼植株不同部位樣品進行消毒制成懸濁液，通過稀釋平板法初步分離純化到621株內(nèi)生細菌，選取10株優(yōu)勢菌進行解磷及促生功能復篩，挑取其中效果最佳的果實內(nèi)生菌為研究對象，命名QN2MO-1。該菌落在LB培養(yǎng)基上呈橢圓形，呈淡黃色，不透明，表面平整，邊緣鋸齒狀，中央隆起，橢圓或短桿狀，屬于革蘭氏陽性菌（圖1）。隨著培養(yǎng)時間延長，菌落趨向干燥扁平、邊緣褶皺不規(guī)則。

2.2? QN2MO-1內(nèi)生細菌解磷能力和IAA產(chǎn)出分析

采用鉬銻抗比色法測定菌懸液水解磷能力，紫外分光光度計OD700測定磷標準曲線各濃度吸光度，得出標準曲線方程y=0.415x+0.0132（R2= 0.9935）。將QN2MO-1懸浮液稀釋100倍后測得OD700值為0.416，根據(jù)標準曲線方程得到該菌解磷能力為（103.42±1.07）mg/L，說明該菌株具有高效解磷能力。

根據(jù)Salkowski比色法鑒定結(jié)果（圖2），菌株QN2MO-1混合液與IAA陽性對照組呈粉紅色，而未接菌陰性對照組無顏色變化，說明菌株QN2MO-1可分泌IAA。利用紫外分光光度計分析IAA的標準曲線y=0.0069x+0.0058（R2=0.9989），計算QN2MO-1在含L-色氨酸LB培養(yǎng)基下分泌IAA量為（39.81±0.31）μg/mL。

2.3? QN2MO-1內(nèi)生細菌生理生化特征分析

試驗測定結(jié)果顯示，QN2MO-1在淀粉水解、明膠液化、過氧化氫酶活性和H2S產(chǎn)出中呈陽性反應，V-P試驗代謝得出QN2MO-1可發(fā)酵葡萄糖產(chǎn)丙酮酸，能將硝酸鹽還原為亞硝酸鹽;但酶脂、脲酶和甲基紅（MR）試驗表現(xiàn)出陰性反應。

碳源利用試驗發(fā)現(xiàn)，QN2MO-1可利用肌醇、D-果糖、山梨醇、蔗糖、可溶性淀粉、蜜二糖、松三糖、海藻糖、α-乳糖、無水乳糖、D-甘露醇等碳源，不可利用麥芽糖、甘露醇、D-半乳糖、鼠李糖、木糖、葡萄糖;在氮源利用試驗中可利用天門冬酰胺、組氨酸、纈氨酸、蛋氨酸、甘氨酸、草氨酸、苯丙氨酸、硝銨酸、硫氨酸和甲硫氨酸，但是不可利用精氨酸、絲氨酸、乙酸銨、氯化銨、酪氨酸、半胱氨酸和四水合鉬酸銨。

2.4? 內(nèi)生細菌對多種抗生素的敏感性

由表1可知，QN2MO-1菌株對供試抗生素表現(xiàn)出不同的敏感性，尤其對青霉素、硫酸鏈霉素和氨芐西林3種抗生素表現(xiàn)出明顯抗性，而對其他抗生素不具有抗性，這些抗生素可用于后期選擇性培養(yǎng)QN2MO-1菌株。

2.5? QN2MO-1細菌分子生物學鑒定

通過PCR擴增反應和測序得到1個QN2MO-1共1456 bp序列片段，在GeneBank和EzBioCloud數(shù)據(jù)庫中進行比對分析，通過MEGA 7.0軟件鄰接距離矩陣法將選取的24株與QN2MO-1同源性較高的16S rDNA基因序列共建系統(tǒng)發(fā)育樹（圖3）。結(jié)果表明，菌株QN2MO-1與Bacillus siamensis KCTC 13613T（AJVF01000043）和Bacillus amyloliquefaciens DSM 7T（FN597644）有較高同源性，處于同一分支，Bootstrap值為54%，且相似率分別為99.04%和98.76%。根據(jù)16S rDNA序列分析及進化學結(jié)果，結(jié)合形態(tài)、培養(yǎng)及生理生化特征，初步鑒定該菌為Bacillus sp. QN2MO-1。

2.6? 內(nèi)生細菌對番茄種子萌芽率的影響

設定不同濃度（10?1、10?2、10?3）的菌懸液分別處理平板的番茄種子，以菌原液和水作為對照。種子培養(yǎng)7 d后，10?1菌懸液處理的種子萌芽率為53.3%，是水（對照）的1.26倍;10?2菌懸液萌芽率與水處理的結(jié)果差異不顯著;當菌懸液濃度下降時種子萌發(fā)率有所下降;菌原液濃度過高導致種子不萌發(fā)。因此，說明該菌液在一定濃度時具有催芽效果，尤其在10?1時處理效果最佳（圖4）。

2.7? 內(nèi)生細菌對番茄幼苗生長的影響

番茄發(fā)芽10 d后，分析不同濃度菌液對番茄幼體生長的影響。稀釋菌懸液對萌芽幼苗地上部生長影響明顯優(yōu)于水，10?1濃度處理的萌芽幼苗胚軸比對照的長0.46倍，10?2處理的幼苗胚軸直徑比對照的增加0.29 mm，說明10?2濃度可使幼苗莖部粗壯;10?3使幼苗整體長勢均勻，胚根比對照處理長2.86 mm，幼苗總長平均值為12.01 mm;觀察種子總體發(fā)育情況，處理組幼苗葉片數(shù)均多于對照組（圖5）。結(jié)果表明，QN2MO-1菌懸液可促進幼苗的生長。

2.8? 內(nèi)生細菌發(fā)酵液對番茄田間試驗的結(jié)果分析

由圖6可知，發(fā)酵液對開花坐果期番茄生物學性狀作用均優(yōu)于常規(guī)組，2.5%和5%濃度處理組的株高分別比對照高13.80 cm和33.00 cm，莖圍分別增1.17 cm和1.25 cm;發(fā)酵液濃度可提高植株的開花率，分別比對照提高32.86%和52.09%。經(jīng)方差分析，3個處理間葉綠素和葉表面積無明顯差異。

在采果期，發(fā)現(xiàn)5%發(fā)酵液使葉綠素含量比對照高4.65;不同處理間可溶性固形物含量無明顯差異;較常規(guī)施肥方式，莖粗隨發(fā)酵液濃度增加而提高，2.5%、5%濃度處理的莖粗分別為17.17 mm和19.92 mm;從農(nóng)藝學性狀看，果實縱徑和橫徑也呈遞增趨勢，果縱徑分別增加1.78 mm和2.55 mm，果橫徑則分別增加1.74 mm和2.52 mm，而常規(guī)組果實大小差異明顯，果縱徑差74.13%，果橫徑差57.15%;但3個處理果形指數(shù)均為1.06，果形呈長圓形，差異不顯著;在產(chǎn)量上，2.5%發(fā)酵液處理的單果重比對照增加16.96%，5%發(fā)酵液處理的則增加26.72%（圖7）。

采果后，植株生物量測定結(jié)果表明，發(fā)酵液處理組的植株長勢優(yōu)，澆施2.5%和5%濃度發(fā)酵液分別使整體株高比CK高0.14 m和0.38 m，整齊度也比對照91.03%高0.49%和0.84%，鮮重增加3.44%和10.78%。生物量增長則增加3.7%和6.55%（表2）。

3? 討論

植物內(nèi)生菌種類多樣性取決于自身和寄主種類多樣性，以及寄主不同部位分布的可選性[19]，目前報道的原料研究對象中，內(nèi)生菌多為芽孢桿菌屬（Bacillu）、假單孢菌屬（Pseudomonas）等，存在于至少129種大田作物及工業(yè)原料作物中[20]。2010年發(fā)現(xiàn)的暹羅芽孢桿菌（B. siamensis）是從泰國螃蟹腌制品中分離獲得的芽孢桿菌屬新種，其功能研究報道甚少，Raquel Pastor-Bueis等[21]在大田試驗研究了B. siamensis液態(tài)肥對甜椒的增產(chǎn)效果，Amanul Islam等[22]從豆科作物中分離出一株暹羅芽孢桿菌，該菌使番茄株高增加14.66%～15.68%。作為芽孢桿菌屬新種，開發(fā)功能性暹羅芽胞桿菌類菌劑有很大的研究空間。近年來，隨著微生物資源庫的不斷擴寬，“不爛果”——諾尼的奇特藥用功效早在數(shù)十年前已被科學家驗證，國內(nèi)學者鄭學勤發(fā)現(xiàn)諾尼富含八碳酸可抗氧化[23]，而近年來關(guān)于諾尼內(nèi)生菌的報道以鑒定為主[24]，并未對其功能進行研究。

基于充分開發(fā)種間橫向傳播微生物資源庫和拓展促生劑有效成分來源的理念，從來源安全、方便收集的角度考慮，以保健性藥用植物諾尼為對象，研究其內(nèi)生細菌的農(nóng)業(yè)應用潛能，本研究從諾尼葉、莖、果、根、花共分離篩選到621株內(nèi)生細菌，分離部位的菌株數(shù)量莖>果>葉>花>根，發(fā)現(xiàn)除根際內(nèi)生菌外，植株的其他功能部位也含有豐富的內(nèi)生菌資源，并從諾尼果實中發(fā)現(xiàn)并分離得到Bacillus sp.。通過菌株功能測定，發(fā)現(xiàn)其具有高效解磷和產(chǎn)IAA能力。眾所周知，磷是植物生長所需的營養(yǎng)元素之一，特別是在我國缺磷耕地達2/3以上，篩選優(yōu)勢解磷菌不僅可以促進作物生長[25]，也可以緩解磷資源枯竭的壓力。另外，已有大量研究證明植物生長素活躍于植物整個生長發(fā)育期，可促進嫩葉、莖端、根尖等細胞分化，也是種子萌發(fā)過程中生物合成的重要來源[26]，早在1999年Shafiq就提出了促生菌產(chǎn)IAA等激素參與植物生命活動的調(diào)控過程[27-28]，而且當濃度過高時反而抑制植物生長，可見IAA具有兩重性，分泌量的多寡也直接干預植物生理性狀的表達[29]。大量研究以根際土壤為產(chǎn)IAA菌株的分離篩選材料，賈西貝等[30]從堿蓬根際土壤中篩選并優(yōu)化一株IAA分泌量達87.86 μg/mL的短小芽孢桿菌（B. pumilus）。本研究從諾尼果實中分離內(nèi)生菌拓寬了產(chǎn)生長素內(nèi)生菌的篩選范圍。許明雙[31]從番茄和水稻種子中分離得到兼具溶磷、產(chǎn)IAA或固氮等促生特性的內(nèi)生菌可影響番茄幼苗根莖長度，Goudjal等[32]也研究發(fā)現(xiàn)植物內(nèi)生菌可產(chǎn)IAA并促進番茄幼苗的生長，隨著IAA處理浸泡時間的延長，可能因IAA濃度增加而抑制根部生長，另外，唐玉娟[33]通過研究論證了促生內(nèi)生菌對宿主植株個體發(fā)育均有明顯促進作用，經(jīng)處理，植株株高、莖粗、果重、鮮重、干重等生長指標顯著提高。

番茄營養(yǎng)豐富，既是蔬菜也是水果，全球消費量大。本研究從諾尼果實中分離到一株解磷能力達（103.42±1.07） mg/L和產(chǎn)IAA能力達（39.81± 0.31） μg/mL的內(nèi)生細菌Bacillus sp. QN2MO-1對番茄具有明顯促生效果。通過種子萌芽試驗驗證，不同濃度菌懸液對番茄種子和幼苗的作用有差異，菌原液可能因濃度過高反而抑制種子萌發(fā)，稀釋至一定濃度時則促進幼苗不同部位的萌發(fā)和生長，說明菌液對不同部位的促進作用因濃度不同而異，可根據(jù)培養(yǎng)需要動態(tài)調(diào)節(jié)菌液濃度達到最佳促生效果。通過大田試驗，發(fā)現(xiàn)發(fā)酵液對番茄生物學性狀和農(nóng)藝性狀均具促進作用，5%發(fā)酵液更能提高番茄光合效率和有機物質(zhì)總量積累，田間對照組中為農(nóng)戶常規(guī)施肥方式，自漚肥可能造成新的農(nóng)業(yè)污染，因此，可考慮該發(fā)酵液在常規(guī)施肥中自漚肥與復合肥的替代作用，以提高養(yǎng)分利用率及產(chǎn)量，降低農(nóng)業(yè)化學污染源。后續(xù)將通過抗生素標記方法對QN2MO-1菌株在番茄植株中的定殖作進一步研究。

參考文獻

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